• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        基因芯片样品制备

        互联网

        2317

        一般说来应用 DNA 芯片进行实验包括 5 个过程:生物学问题的提出和芯片设计;样品制备;生物杂交反应;结果探测;数据处理和建模。

        1 .样品制备。一般所需 mRNA 的量是以一张表达谱芯片需要 3μg mRNA 计算的

        不同组织抽提 3 10μg mRNA 所需组织量

        器官 / 组织

        提取 3μgmRNA 所需组织量 ( )

        提取 10μgmRNA 所需织量 ( )

        RNA 得率 [ 单位 : 毫克 RNA/ 克组织 ]

        mRNA 所占百分比 [%]

        成人正常组织

        0.2083

        0.6944

        1.80 - 1.80 mg/g

        0.80

        成人正常组织

        缺数据

        缺数据

        1.30 - 1.30 mg/g

        缺数据

        成人正常组织

        0.3000

        1.0000

        1.00 - 1.00 mg/g

        1.00

        成人正常组织

        0.5000

        1.6667

        0.60 - 0.60 mg/g

        1.00

        成人正常组织

        0.1852

        0.6173

        2.70 - 2.70 mg/g

        0.60

        成人正常组织

        0.3125

        1.0417

        1.20 - 1.20 mg/g

        0.80

        病理组织

        结肠癌

        0.2521

        0.8403

        1.70 - 1.70 mg/g

        0.70

        病理组织

        胃癌

        0.4317

        1.4388

        0.50 - 0.50 mg/g

        1.39

        病理组织

        空肠腺癌

        0.3571

        1.1905

        1.40 - 1.40 mg/g

        0.60

        病理组织

        直肠癌

        0.1604

        0.5348

        1.70 - 1.70 mg/g

        1.10

        病理组织

        肝癌

        0.1116

        0.3720

        3.84 - 3.84 mg/g

        0.70

        病理组织

        肺癌

        0.1282

        0.4274

        2.00 - 2.00 mg/g

        1.17

        考虑到个体差异以及样品在研磨、匀浆等过程中的损失,客户提供的样品量应在上述基础上增加 1-2 倍。

        2 样本采集过程关键点.

        组织标本采集操作建议规程 ,( 取标本所需关键器材和处理要求 )

        铝箔

        DEPC 水浸泡过夜, 78°C 烘干,高压灭菌后烘干

        1.5 ml 微离心管
        15 ml 聚丙烯离心管

        市场有售 RNAase-Free 的相应规格离心管

        标签纸

        记号笔

        样品登记表

        由客户指定专人填写

        液氮罐

        应常备液氮罐,并保证液氮的来源

        取材部位的病理切片

        由客户提供 1-2

        注:
        · 以下步骤 1 5 应在冰上进行且不超过 15 分钟,超过时间会导致样品的 RNA 降解。
        · 对肿瘤组织的取材,要求尽可能准确地判定肿瘤和正常组织,例如对于手术切除的整个或部分前列腺,可能要根据冰冻切片报告的结果来判定要进行研究的取材部位。

        1 离体新鲜组织,切成多个 1cm3 小块,剔除结缔组织和脂肪组织。胃、肠组织应剪除外膜;肝、肾、脾应剪除门部血管神经,肿瘤组织应将周围的正常组织切除干净(正常组织也应将周围的肿瘤组织切除干净)。

        2 RNase-Free 0.9 %生理盐水中漂洗样品,以去除血渍和污物。

        3 用铝箔包裹组织,或用 5ml 冻存管装载组织 ( 但最好统一采用铝箔 ) 。用记号笔在铝箔或冻存管外表写明样品编号,并贴上标签,迅速投入液氮冷却。

        4 填写样品登记表,写明样品名称、种类、编号、取样日期、样品处理情况等

        将液氮冷却的组织放入样品袋(每个样品袋只保存同样的组织),袋口留一根编号绳,绳上粘一张标签纸(标签上注明:样品名称、编号、日期),迅速转入便携式液氮罐

        5 保留 1-2 张取材部位的病理切片。

         

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序