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        退火的温度选择取决于引物的碱基序列吗?

        互联网

        1985
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        PCR退火温度应如何设置?

        问题:请问一下

        A 引物序列越长 退火温度 越低

        B 引物序列越短 退火温度 越低

        C 引物中C G 含量越高 退火温度 越高

        D 引物中A T 含量越低 退火温度 越低

        选择是A

        退火就是复性 我想请问一下退火温度 和引物序列为什么会有关系?也就是说退火到底是做什么,为什么序列会影响温度?

        答案:

        退火指的是是在高温下分开的DNA的两条单链,在减低温度后重新结合成为双链的过程。

        退火温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸,G+C含量约50%的引物,55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度:

        Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T)

        复性温度=Tm值-(5~10℃)

        因为退火是A-T、C-G配对、形成氢键的过程,因此温度的高低会影响配对的效率。C-G的键能高,因此存在较多的C-G的话,要在较高温度下就能使得两个单链结合为双链,也就是退火。

        PS:个人认为答案应该是C。A是错误的。引物越短退火温度越低。

        B一般来说是正确的,但还是受到CG含量的影响。综上,我觉得是题目和所给的答案对不上。

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