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        各种组织特殊染色法—病毒包涵体染色法

        互联网

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        (一)Macchiavello氏改良法显示SARS病毒包涵体
        1.切片脱蜡至水。
        2.0.5%高锰酸钾氧化切片5分钟。
        3.水洗。
        4.2%草酸水溶液漂白切片2分钟。
        5.水洗。
        6.0.25%淡绿水溶液或伊红作对比染色。
        7.水洗。
        8.0.25%柠檬酸水溶液分化切片20秒,于显微镜下控制,水洗。
        9.1%甲基蓝作对比染色30秒。
        10.水洗。
        11.风干切片。
        12.二甲苯透明,中性树胶封固。
        13.结果:SARS病毒包涵体于肺组织细胞浆内,呈鲜红色,细胞核呈蓝色。纤维蛋白渗出物呈粉红色,结缔组织呈蓝色。(图)
        (二).Giemsa法显示多种病毒包涵体。
        1.切片脱蜡至水,蒸馏水洗。
        2.浸入0.01M磷酸盐溶液(PBS)PH7.6中,换洗3次,3分钟/次。
        3. 浸染于PH7.6的Giemsa染液中过夜。
        4.PBS冲洗15分钟。
        5.0.01%柠檬酸水溶液分化,于镜下控制。
        6. 蒸馏水洗。
        7.吸水纸吸干或风干切片。
        8.丙酮脱水,1-2分钟。
        9.入1:1丙酮和二甲苯1-2分钟。
        10.二甲苯透明,中性树胶封固。
        结果:SARS病毒包涵体于肺细胞胞浆中呈现鲜红色;合胞病毒,巨细胞病毒包涵体于肺组织的细胞核内,在没有形成包涵体前呈鲜红色,形成包涵体后呈深紫色至蓝色。红血细胞显示绿色。(图)
        试剂 的配制:
        Giemsa粉 2.4g
        甲醇 50ml
        甘油 50ml
        先将Giemsa粉溶于甲醇中,然后加入甘油,混合后放入50℃左右的烤箱中加入热助其彻底溶解。然后放于4℃冰箱中备用。临用时,取0.01PBS40mlGiemsa原液,即可使用。
        Giemsa法显示海蓝组织细胞
        I 试剂 的配制
        取0.01M的PBS(pH7.6)40ml,加入Giemsa原液1ml混合均匀后即可使用。
        II 操作方案
        1.常规石蜡切片脱蜡至水
        2.0.5%高锰酸钾水溶液氧化切片5分钟
        3.自来水洗。
        4.2%草酸水溶液处理切片1-2分钟。
        5.自来水洗PBS洗。

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