膈神经放电实验原理和步骤

【目的和原理】  
节律性呼吸(rhythmic respiration)运动是呼吸中枢节律性活动的反映。呼吸中枢的节律性活动通过支配呼吸肌的膈神经(phrenic nerve)和肋间神经（传出神经）引起膈肌和肋间肌（效应器）的节律性舒缩活动，从而引起节律性呼吸运动。本实验的目的是用电生理方法观察和记录家兔在体膈神经传出冲动发放，借以加深对呼吸节律(respiratory rhythm)来源的认识。
【实验材料】  
兔；信号处理系统、示波器、前置放大器、监听器、哺乳类动物手术器材一套、引导电极及固定架、注射器（ 30ml、20ml、lml）、装有CO ₂ 的气囊、玻璃分针；20％氨基甲酸乙酯、生理盐水和医用液体石蜡加温至38～40℃、尼可刹米注射液。
【实验步骤】
    1.仪器调试
   （1）前置放大器  增益：×1O00，高频滤波：10KHz，时间常数：0.01～0.001s。
（2）示波器  灵敏度：调节整机灵敏度为500～200μv/cm，输入选择：AC双端输入，扫描速度：0.5～0.2S／cm。如使用信号处理系统，打开主机电源和四路放大器电源，点击显示屏快捷方式进实验主界面，选定实验的各项参数，进入信号记忆状态。
    2.仪器连接：同“减压神经放电”，如有呼吸换能装置，可将换能器输出由Y下线DC输入。
    3.麻醉和固定 用20％氨基甲酸乙酯（5ml／kg）从兔耳缘静脉注射,待麻醉后，背位固定于兔台上。
    4.手术
    （1）剪去颈部兔毛，自胸骨上端向头部作一正中切口，约10cm。分离皮下组织肌肉，找到气管，并作气管插管术。
    （2）分离并拉开颈部软组织，可在脊柱腹外侧看到颈椎发出的第3、4、5颈神经，自颈椎斜向外侧。于甲状软骨下1～2cm处是第3颈神经。在颈椎旁的肌肉上便可见一细的垂直下行的膈神经。膈神经由第4、5颈神经的腹支汇合成，在颈部下1／5处与臂丛（由颈5～8神经的腹支、胸1神经腹支汇合而成）交叉，在斜方肌的腹缘进入胸腔。用玻璃分针在臂丛上方分离膈神经2cm左右，穿线置外周端备用。
    （3）分离两侧迷走神经并穿线备用。
    （4）颈部一侧皮肤接地。借助于U型架作好皮兜，并注入38℃液体石蜡保温，防止神经干燥。用玻璃分针将膈神经放至引导电极上。注意神经不可牵拉过紧，引导电极应悬空，不要触及周围组织。