细胞工程基础实验技术

1. 器皿洗涤
玻璃器皿洗涤 ：新的玻璃器皿上附有游离的碱性物质，其洗涤方法是用1%的HCl溶液浸泡一昼夜，再用合成洗涤剂洗刷，然后用清水反复冲洗，最后用蒸馏水冲洗1～2次，干燥后即可使用。已使用过的试管、烧杯、三角瓶等的洗涤方法是，先将器皿中的残渣除去，用清水洗净，再用合成洗涤剂洗刷，用清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗1～2次。用过的吸管、滴管等内径狭小的玻璃制品，需先放入铬酸洗涤液中浸泡两小时以上，取出后经流水冲洗半小时左右，再用蒸馏水冲洗1～2次，然后烘干或晾干。载玻片和盖玻片容易破碎，洗涤时不宜用力擦洗，其洗涤方法是先用清水冲洗，然后放入铬酸洗涤液中浸泡几小时或用稀铬酸洗涤液煮沸半小时，取出后用清水冲洗干净，将其储藏在95%的酒精中。
塑料用品洗涤 ：塑料用品一般用合成洗涤剂洗涤，因其附着力较强，因此冲洗时必须反复多次，最后用蒸馏水冲洗。
金属用品洗涤 ：金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤，需要清洗时，一般用酒精擦洗，并保持干燥。
2. 培养基配制
2.1 母液配制
为工作方便起见，常用培养基通常先按配方配制成浓度高于实际使用浓度若干倍的母液，使用时按按比例稀释即可。一般大量元素配制成10－20倍母液，微量元素和其它成分配制成100－200倍母液。常用的MS培养基母液配制见附表。配好的母液需贮存于2～4℃的冰箱中，定期检查有无沉淀和微 生物 污染，如果出现沉淀或微 生物 污染，则不能使用。
2.2 植物激素配制
植物激素一般配制成浓度为0.1~1.0mg/ml的溶液，贮存在2～4℃下备用。由于多数激素难溶于水，一般按以下方法配制。
IAA：  先用少量95%乙醇使之充分溶解，再加蒸馏水定容至需要浓度的体积。
NAA ： 可溶于热水中，也可采用与IAA同样的方法配制。
2,4-D ： 先用少量1N的 NaOH溶液充分溶解，然后缓慢加入蒸馏水定容至需要浓度体积。
细胞分裂素类 ： KT和BA等细胞分裂素类物质均溶于稀盐酸，应先用少量1N的HCl溶解后再稀释至需要浓度。
赤霉素 ： 赤霉素的水溶液稳定性较差，一般用95%的乙醇配制成5～10mg/ml的母液低温保存，使用时再稀释。