高效液相色谱仪（HPLC）的校正(3)

  　2.6、波长示值误差

　　2.6.1、用注射器将紫外波长标准溶液（标准波长为235nm，257nm，313nm和350nm）从检测器入口注入样品池冲洗，并将池充满，将波长调到低于标准波长5nm处，到标准波长+4nm处，测得的最大吸收值处对应的波长与标准波长之差为波长示值误差；目前仪器可以在1ml/min的流量下，直接用空管连接检测器，每隔2min改变1nm，连续进标准样10ul，同样可得波长示值误差。

　　2.6.2、可调波长紫外可见光检测器波长示值误差(此项只适用于HP1100高效液相色谱仪且带有HP工作站)。

　　2.6.3、打开HP1100液相色谱仪和HP工作站，打开输液泵和检测器，用纯水冲洗系统直至稳定，进入Diagnosis窗口，点击氘灯图标，进入showmoduletests状态，点击VWDVLcalibrationtest点击start，系统自动进入校正状态，待校正完毕，将校正结果打印归档。

　　2.6.4、可接受标准：λ≤2nm

　　3、性能确认

　　3.1、使用标准品或供试品，确认仪器性能符合使用要求；

　　3.2、先进行色谱柱的性能确认，内容包括：分离度，对称因子，理论塔板数和峰面积标准偏差。

　　3.3、液相色谱柱的确认

　　3.3.1、测试标准样配制：称量1000mg苯酚，100mg联苯加入到100ml容量瓶中，移入邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯各1ml，然后用甲醇定容到100ml，混匀，从中移取1ml该溶液，用乙腈：水=70：30定容至100ml。

　　3.3.2、方法：流动相为乙腈：水=70：30，流速为1.0ml/min，波长为254nm，温度为30℃，进样量为：10ul，运行10min。

　　3.3.3、色谱柱：Extend-C18Analytical，5um，4.undefined250mm。

　　3.3.4、连续进行5次分析，分离度均R＞1.5；邻苯二甲酸二乙酯对称因子S在0.80～1.50范围内；邻苯二甲酸二乙酯柱效＞3000m-1；邻苯二甲酸二乙酯峰面积的标准偏差应≤1.5%。

　　3.4、按照性能确认方法逐步进行，并记录谱图；根据性能测试的结果，评价仪器是否符合性能要求。

　　4、校正结果处理和校正周期

　　4.1校正结果全部项目均符合技术要求者，判为合格，方可使用。若某些指标达不到要求，关于仪器情况，仪器负责人以维修报告的形式报于QC经理，由QC经理批准维修方案。

　　液相色谱仪的校正周期为一年。