高效液相色谱仪（HPLC）的校正(1)

    0.1、输液系统：

　　0.1.1、梯度误差GC不超过±3%

　　0.1.2、泵流量设定值误差Ss＜±2%

　　0.1.3、流量稳定性误差SR＜±2%

　　0.2、紫外检测器性能

　　0.2.1、基线噪声不超过5×10-4AU，基线漂移不超过5×10-3AU

　　0.2.2、定量测量重复性误差（6次进样）RSD≤1.5%

　　0.2.3、最小检测浓度不超过1×10-7g/ml萘/甲醇溶液

　　0.2.4、可调波长紫外可见光检测器波长示值不超过±2nm(HP1100高效液相色谱仪可由仪器自身完成)

　　1、校正条件

　　1.1、环境温度10-30℃，相对湿度低于65%

　　1.2、校正设备

　　1.2.1、秒表分度值小于0.1s

　　1.2.2、分析天平最大称量200g，最小分度值0.1mg

　　1.2.3、容量瓶

　　1.2.4、微量注射器

　　1.3、标准物质和试剂

　　1.3.1、HPLC用甲醇、纯水，分析纯的丙酮

　　1.3.2、1×10-4g/ml，1×10-7g/ml的萘甲醇溶液

　　1.3.3、紫外波长标准溶液

　　2、校正方法

　　2.1、梯度误差GC的校正

　　2.1.1、进行梯度洗脱程序，A溶剂为水，B溶剂为0.1%丙酮的水溶液，B经5个阶段从0变到100%，20%―40%―60%―80%―100%，重复测量两次，取平均值，求各段梯度误差Gci，取最大作为仪器梯度误差，公式：Gci=（Li―Lm）/Lm×100%

　　Li：第i段信号值的平均值；Lm-：各段输出信号平均值的平均值

　　可接受标准：-3%≤Gci≤3%

　　2.2、泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差SR的校正

　　2.2.1将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器联接好，以甲醇为流动相，按表一设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确的收集10-25分钟，称重，按下式计算流动相流量设定值误差Ss和流动相流量稳定性误差SR。公式：Ss=（Fm-FS）/Fs100%

　　可接受标准：-2%≤Ss≤2%

　　SR=（Fmax-Fmin）/F×100%

　　可接受标准：-2%≤SR≤2%

　　Ss：流量设定值误差（%）；Fm=（W2-W1）/ρt.t：流量实测值（ml/min）

　　W2：容量瓶+流动相的重量（g）；W1：容量瓶的重量（g）；Fs：流量设定值（ml/min）；

　　ρt：实验室温度下流动相的密度（g/cm3）；t：收集流动相的时间（min）；

　　SR：流量稳定性误差（%）；Fmax为同一组测量中流量最大值（ml/min）；

　　Fmin：同一组测量中流量最小值（ml/min）；F为同一组测量值的算术平均值（ml/min）