沙眼衣原体感染的实验室诊断

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    诊断沙眼衣原体感染常用的实验室方法有以下几种：①标本涂片染色直接镜检；②细胞培养法；③抗原检测试验,包括直接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验；④DNA杂交及聚合酶链反应(PCR)法；⑤血清抗体检测。

     (一) 标本涂片染色直接镜检
    将临床标本涂片后，作姬姆萨染色、碘染色或帕氏染色，镜下观察。可用于新生儿眼结膜刮片的检查，但它不适宜用于泌尿生殖道沙眼衣原体感染的诊断，因为在这种情况下，它的敏感性和特异性均极低。

 

     (二) 细胞培养法
    此法是目前检测沙眼衣原体感染最为敏感和特异的方法，敏感性为70%～95%。此法可用作证实试验和治疗后的判愈试验。作细胞培养取材很重要。对女性患者，一般取宫颈管标本,方法是先用一根长棉拭擦去宫颈表面粘液,弃去; 再用另一根长棉拭插入宫颈管1～2cm处,捻转数圈,停留10秒后取出送检。作沙眼衣原体检查时,拭子标本放入标本运送液中,-85℃低温冰箱保存待用。对于新生儿眼炎或肺炎，也可取结膜刮片标本及痰液、支气管洗出液等。

     (三)直接免疫荧光法
    针对沙眼衣原体主要外膜蛋白(Syva,Difco,Kallestad 的产品 )或脂多糖(Bartels,Boots Celltech,Califonia Integrated Diagnostic的产品)的单克隆抗体与相应的抗原结合，单克隆抗体标有荧光素，在荧光显微镜下，阳性者可见到亮苹果绿的原体和始体。此法诊断沙眼衣原体感染的敏感性为70%～90%，特异性为83%～99%。由于有可能将某些发光颗粒(白细胞、上皮细胞、色素颗粒)、细菌和酵母菌误认为沙眼衣原体，因此我科此项检查的由专人负责。直接免疫荧光法的优点是：快速，价廉，操作简便，标本的贮存和运送方便，标本中的沙眼衣原体不必是存活的或是有感染性的。缺点是在低感染率的人群中敏感性差，受实验人员的主观影响大。它最适宜用来检测沙眼衣原体高流行率人群(如性病门诊病人)。

 

 

     (四)酶联免疫吸附试验
    将沙眼衣原体抗体致敏聚苯乙烯小珠 ( Chlamydiazyme，为Abbott的产品)或包被微量板孔(IDEIA,为 Boots Celltech 的产品；Pathfinder，为Kallestad的产品)，捕获标本中的沙眼衣原体抗原，通过酶联显色反应而判断结果。此法诊断沙眼衣原体感染的敏感性与直接免疫荧光法相当，而特异性稍有不如(90%左右)。试验结果阴性时，不能完全排除沙眼衣原体感染，有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故。
 此法的一个显著优点是自动化程度高，可同时检测大批量标本，结果判断客观性强。它与直接免疫荧光法一样，最适宜用来检测沙眼衣原体高流行率人群。在低流行率的人群中应用时，解释结果宜慎重。