φ（Phi）小体染色检查

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（一） 原理
粒细胞系列的白血病细胞中形成的φ（Phi）小体与3，3，—二氨基联苯胺（DAB）及（或）过氧化氢基质液作用，以及硝酸酮处理的氢过氧化酶染色，能催化DAB氧化生成蓝色沉淀，定位于胞质中。
（二） 操作步骤
1 试剂配制
(1) 1.25%戊二醛固定液：0.1mol/L磷酸盐缓冲液（PH7.3）95ml，分析纯戊二醛液（25%浓度）5ml，分析纯纯甲醛液（37%浓度）2ml，混匀并调整PH至7.3。
(2) 基质液: 3，3，—二氨基联苯胺5mg，0.05mol/LTris-盐酸缓冲液（PH7.6）10ml，1%过氧化氢溶液0.1ml，将以上三者混匀。
(3) 0.5%硝酸铜溶液：用0.05mol/LTris-盐酸缓冲液（PH7.6）配制。
2 操作方法
（1） 新鲜干燥涂片放入1.25%戊二醛固定液中固定2分钟。
（2） 用生理盐水冲洗后保存在盐水中。
（3） 浸入基质液中作用3分钟。
（4） 用0.05mol/LTris-盐酸缓冲液（PH7.6）快速冲洗3次。
（5） 放入0.5%硝酸铜溶液2分钟。
（6） 用生理盐水冲洗，晾干后镜检。
3 染色结果
阳性结果为胞质中出现1条至多条纺缍状或细棒状的棕色小体。
4 正常参考结果
正常人血液及骨髓中各类细胞均为阴性反应。

 

（三） 临床意义
鉴别白血病类型：φ（Phi）小体是粒细胞系的白血病细胞一种病理改变所形成的，因此阳性结果仅在白血病细胞中出现，不但有助于白血病类型的鉴别，而且具有很强的病理价值。
（1） 急粒：白血性原粒细胞的胞质中φ（Phi）小体有较高的检出率。
（2） 急性早幼粒细胞白血病：异常早幼粒细胞胞质中φ（Phi）小体检出率高。
（3） 急淋：各阶段淋巴细胞φ（Phi）小体为阴性。
（4） 急单：各阶段单核细胞φ（Phi）小体为阴性。

 

备注：
1  所需试剂：分析纯戊二醛，分析纯纯甲醛（有），PH计（有），3，3，—二氨基联苯胺，过氧化氢（有），硝酸铜。
2  开展的项目可与四项组化一起检查，收费定为20元/例，即细胞化学包括POX、PAS、AS-DCE、NBE、Phi小体。
3  Tris-盐酸缓冲液（PH7.6）的配制。
4  普通参考书无此项目，一般医院亦无此项目开展，可作课题有助于将来总结。