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        实验设备仪器,及其起步

        相关实验:活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备

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        extrostype

        对于初学者,需要开展免疫荧光技术,需要采购哪些设备,需要什么实验室硬件配置?

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        3 个回答

        user-title

        迟C迟

        有帮助

        提前准备细胞样品

        试剂:多聚甲醛 70%甲醇 丙酮 PBS Triton BSA DAPI染液 DABCO Tris 甘油

        仪器耗材:离心机 细胞培养箱 培养板 最重要的荧光显微镜

        另外给你实验步骤:细胞爬片免疫荧光实验步骤

        第一天:

        1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;

        2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;

        3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤);

        4. PBS浸洗玻片3次,每次3 min,吸水纸吸干PBS,在玻片上滴加正常山羊血清,室温封闭30min;

        5. 吸水纸吸掉封闭液,不洗,每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒,4℃孵育过夜;

        第二天:

        6. 加荧光二抗: PBST 浸洗爬片3次,每次3min,吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗,湿盒中20-37℃孵育1h,PBST浸洗切片3次,每次3min;注意:从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。

        7. 复染核:滴加DAPI避光孵育5min,对标本进行染核,PBST 5minx4次洗去多余的DAPI;8. 用吸水纸吸干爬片上的液体,用含抗荧光淬灭剂的封片液封片,然后在荧光显微镜下观察采集图像。

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        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        1、. 烘箱

        2、培养箱

        3.免疫荧光分析仪

        4、水浴锅:

        5、 冰箱

        6、各种试剂

        7、蒸汽消毒锅:

        8、各种天平:台秤、精密电子分析天平,用于称量各类试剂。

        9、液体体积的度量:量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯、锥形瓶等

        10、pH计

        11、高速离心机:

        12、小型设备、用具: 定时器、滤膜、保鲜膜、防护眼镜鸭嘴镊;常规的玻璃或塑料器皿,包括平皿、试管、烧杯、量瓶、试剂分液漏斗、避光保存的试剂应使用棕色试剂瓶,如饱和酚、巯基乙醇等;记号笔、各种手套(PE、乳胶、家用、防酸的等)。

        user-title

        府宅

        有帮助

        1. 细胞样品
        2. 试剂、试剂盒: 多聚甲Quan;70% 甲醇;丙Tong;PBS;Triton ;BSA;DAPI 染液;DABCO;Tris;甘油
        3. 仪器、耗材:免疫荧光分析仪、玻片

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