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        【求助】DEPC如何处理枪头,要详细

        丁香园论坛

        10655
        第一次,自己配了DEPC,还没来得急摇匀,老师就让我们泡上枪头了。实验失败了无数次,要了命了,没找出原因。这次准备重新处理枪头,有几个问题想问问各位师兄师姐:
        1.装枪头的盒子怎么处理,用DEPC水多擦洗几次烘干行不行?
        2.那个DEPC水是不是按比例配好之后摇匀一整夜,就可以使用了?
        3.我把枪头和EP管直接泡在DEPC水里,浸泡24小时候,手带着干净的手套然后一个个的插到枪头盒子里行吗?
        我们这里都是这么做的:
        直接在枪头盒的底下戳一个洞,然后将枪头盒与枪头连同一块在DEPC处理水中浸泡过夜,捞出来之后121℃灭活30-40min,烘干之后i就可以用了。
        我们经常用的就是你说的第3种,也没什么问题呀,应该找找其他原因
        有这么麻烦,直接买axygen的无RNA酶的枪头不成吗。
        中国的老板啊,就是不让学生用好一点的东西,搞得一个个就跟民工似的(非贬义)
        就是就是撒,节省节省再节省,结果实验老出问题撒
        98074015 wrote:
        有这么麻烦,直接买axygen的无RNA酶的枪头不成吗。
        中国的老板啊,就是不让学生用好一点的东西,搞得一个个就跟民工似的(非贬义)
        同意你的观点,买点RNase free的也真的不贵,35元/盒,但你浸了半天,效果可能还不好,却因此花了一两天的人力。按现在3-5K/月的工资,每个工作日的人工成本就在150-200块钱左右。当然,导师可能是按免费劳动力来计算的。
        我来晚啦!!!

        DEPC是强致癌剂(分子克隆)。DEPC1/1000的比例加入水中然后高压处理后,DEPC才会分解。否则残留的DEPC对人的健康有威胁,同时也会对你的下有实验有影响。

        现在大家都在使用外源RNA酶清除剂(无毒,高效,操作简便,而且为了对战友们的支持价格也是很便宜的)

        可参考一下华越洋,www.huayueyang.com

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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