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        【求助】U6启动子种属特异性问题??

        丁香园论坛

        12828
        小弟要在绵羊上做RNAi,不知人源,鼠源U6或H1启动子在绵羊体内是否有功能?哪位大侠知道呀?先谢了!实验室里有U6或H1启动子载体!
        mengxiaoyong wrote:
        小弟要在绵羊上做RNAi,不知人源,鼠源U6或H1启动子在绵羊体内是否有功能?哪位大侠知道呀?先谢了!实验室里有U6或H1启动子载体!


        shRNA表达质粒多采用RNA聚合酶III启动子,如人源H1或鼠源U6启动子,pol III在哺乳动物细胞(绵羊是哺乳动物)内引导非编码小RNA的转录,转录产物无poly(A)尾,且在转录过程中遇到连续4-5个U时转录终止。此载体最后转录出的产物是经折叠形成的发夹状小RNA(shRNA); shRNA 在细胞内被Dicer酶切割成3’端带有两个U突出的siRNA,进而启动RNAi,介导基因沉默。载体中的间隔序列为9个核苷酸时最为有效。

        是可行的!
        不知道LZ现在没有搞清楚种属之间的差异,我也很想知道答案
        我也很想知道,关于U6的种属问题

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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