【求助】如何研究组氨酸残基是否被磷酸化
丁香园论坛
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如何研究蛋白中的组氨酸残基被磷酸化？现在都有什么手段检测？市面上没有抗磷酸化组氨酸残基的特异性抗体吧？期待战友们的回复。
没有人做过吗？我没有检索到相关文献，不知道哪位战友能提供相关资料？多谢！！！！！！！！
如何研究蛋白中的组氨酸残基被磷酸化？现在都有什么手段检测？
可以用western的方法，检测磷酸化和总蛋白，然后做比值。还可以用组织化学染色的方法，对磷酸化的蛋白进行染色。当然，这两个方法均需要磷酸化的抗体。
市面上没有抗磷酸化组氨酸残基的特异性抗体吧？
抗体不是针对一个组氨酸残基设计的，而是一段序列。如果你所研究的分子以前有报道磷酸化，应该会有公司出的商品性抗体。如果是最近研究的，也可以找文献作者索要，可能也会给你。如果以前完全没有报道，可以自己进行定点突变的引物设计，然后做PCR。
可以用western的方法，检测磷酸化和总蛋白，然后做比值。还可以用组织化学染色的方法，对磷酸化的蛋白进行染色。当然，这两个方法均需要磷酸化的抗体。
市面上没有抗磷酸化组氨酸残基的特异性抗体吧？
抗体不是针对一个组氨酸残基设计的，而是一段序列。如果你所研究的分子以前有报道磷酸化，应该会有公司出的商品性抗体。如果是最近研究的，也可以找文献作者索要，可能也会给你。如果以前完全没有报道，可以自己进行定点突变的引物设计，然后做PCR。
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