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        HIV测定(ELISA法)标准操作规程

        互联网

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        1、检验目的
        应用双抗原夹心酶联免疫法原理(ELISA)定性检测人血清、血浆标本中的HIV(1+2)型抗体的测定,用于HIV感染的辅助诊断,抗HIV药物治疗的效果的监测。
        2、原理
        采用夹心ELISA方法检测血清或血浆标本中人类免疫缺陷病毒HIV(1+2)型抗体,预包被高纯度基因重组HIV(1+2)型抗原,可与标本中的抗-HIV抗体反应,加入HRP标记HIV(1+2)型抗体抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,然后加入TMB底物产生显色反应。通过酶标仪检测吸光度(OD值),根据OD值判断HIV抗体的存在与否。
        3、性能参数
        灵敏度高(0.5ng/ml)
        4、标本要求
        (1)标本类型:血清,血浆。
        (2)标本采集:见标本采集手册
        (3)标本储存和运输:室温放置不超过8小时,2-8℃不超过72小时,-20℃可长期保存,应避免反复冻融
        (4)标本拒收状态:细菌污染,严重溶血或脂血标本不能作测定。
        5、容器和添加剂类型
        6、试剂
        (1)试剂名称:人类免疫缺陷病毒HIV(1+2)型抗体诊断试剂盒。
        (2)试剂生产厂家:上海科华生物工程股份有限公司
        (3)包装规格: 96T/Kit
        (4)试剂盒组成:①、HIV酶标板;②、HIV酶标试剂;③、HIV(1+2)型阳性及阴性对照血清;④、显色剂A液和B液;⑤、此外还有浓缩洗涤液、终止液、自封袋、封板膜、说明书等。
        7、仪器设备:
        酶标仪:ZS板式,北京普朗生物技术有限公司,每年由计量单位进行一次校准。
        洗板机:DNM-9620型,北京普朗生物技术有限公司,每年由国家计量单位进行一次校准。
        移液器:上海求精,每年由国家计量单位进行一次校准。
        8、校准程序

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