高效液相色谱仪常规分析操作步骤及规程

1)． 严格过滤色谱纯流动相，根据需要选择不同的滤膜。

2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气20～30分钟。

3)． 打开色谱工作站，连接好流动相管道，连接检测系统。

4)． 有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，冲洗时速度不要超过10ml/min。

5)． 调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000psi。选用合适的流速。

6)． 设定不同样品的检测器分析参数。

7)． 等基线走稳即可进样分析，分析样品时对样品的前处理非常重要。

8)． 关机时，先关检测器，泵不要关掉，应改用流动相冲洗泵，不同的流动相冲洗时间不同，一般冲洗30min，若是缓冲盐作流动相应先用水冲洗30min，再用纯甲醇冲洗。

9)． 然后关液相泵。

10)． 需要把进样阀冲洗干净，另把注射器等工具清理整洁。

11)． 填写登记本，由负责人签字。

注意事项：

　　1.首先必须是HPLC级的，这一条相信大家都做到了。

　　2.脱气。由于流动相里含有微量空气，经泵的压力作用，会在流通池里产生气泡，这对分析产生一定的影响，如噪音增大，甚至于掩盖信号峰。因此，流动相在使用前必须经超声脱气20分钟以上。

　　3.过滤。由于流动相里有很微小的垃圾，如不经过过滤，偶尔会卡在单向阀门中，从而产生压力波动。这一点很多用户不太注意，等到产生压力波动又不知道什么原因产生的。