低离子强度盐水 （LISS） 配血法

低离子强度盐水（LISS）配血法

1）原理红细胞混悬于等渗盐水中，由于细胞膜上有唾液酸中的羧基离子而负电，此负电荷形成的排斥力（Zet电位）使单个红细胞之间保持一定距离。完全抗体分子大，能在红细胞之间搭桥，使细胞发生凝集。

不完全抗体分子小，只能使红细胞致敏，而不出现凝集。如降低介质的离子强度，则可增加抗原抗体之间的引力（或降低Zet电位），使原来在盐水介质中不能凝集红细胞的抗体能够发生凝集，如用于间接抗人球蛋白试，可加快反应速度，缩短保温的时间。

2）试剂和材料

（1）0．03／LLISS于大烧杯中放蒸馏水700，加甘氨酸18．00g，用电磁搅拌器混合溶解，补蒸馏水使溶液总量为800，再混合5in，用1／LNOH液调节pH至6．7，再混合5in，复核pH一次。

加入氯化钠1．79g，KH2PO42．57，无水N2HPO40．79g，N2HPO4?2H2O0．99g，混合5in，转入容量瓶中，加蒸馏水至1000，此时溶液pH仍为6．7，分装小瓶，1．055kg／2，高压灭菌30in，冷藏保存，用前应预热至室温。

（2）受血者和供血者5％红细胞LISS悬液红细胞先用等渗盐水洗涤两次，再用0．03／LLISS洗涤一次，最后各配成5％红细胞悬液。

（3）受血者和供血者血清

（4）抗人球蛋白血清

（3）方法

①取洁净小试管2支，分别标明主侧和次侧，主侧加受血者血清2滴和供血者5％LISS红细胞悬液1滴；次侧加供血者血清2滴和受血者5％LISS红细胞悬液1滴。

②立即以1000r／in离心1in，查上清液有无溶血，再轻轻将管底红细胞松散，观察有无凝集。并记录结果。

③置37℃水浴温育10in。

④再立即离心1in，查上清液有无溶血，再轻掸试管将管底红细胞松散，观察有无凝集，并记录结果。

⑤用盐水洗涤红细胞3次，倒尽末次洗液，加最适稀释度抗人球蛋白血清1滴，混合。

⑥以1000r／in离心1in，观察有无凝集，记录结果。

⑦对试结果阴性者，加IgG致敏红细胞1滴，经离心后查有无凝集，如不见凝集，表示结果无效，须全部重做。

⑧结果判定。在交叉配血的任何步骤中，不见溶血或凝集者表示交叉配血相合。