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        聚凝胶法交叉配血实验

        相关实验:聚凝胶法交叉配血实验

        最新修订时间:

        原理

        红细胞表面带有大量的负电荷,以避免其产生自发性凝集。当红细胞悬浮在电解质时,阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此的红细胞刚被扩散的双层离子云所围绕,而形成Zeta电位,Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

        材料与仪器

        实验材料
        仪器、耗材

        步骤

        一、交叉配血试验

        1、取试管2支,标主次侧.主侧管加病人血清(血浆)2滴,加供血者3一

        5%红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴,次侧反之.

        2、各加LIM0.7ml,混合均匀后,再各加Polybrene溶液 2滴,并混合均匀.

        3、用血库专用离心机1000g离心力,离心1O秒,(若用普通离心机,离心条件为:3400rpm离心1O秒)然后把上清液倒掉,不要沥干让管底残留约0.1ml液体.

        4、轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集则必须重作.

        5、最后加入Resuspending2滴.轻轻转动试管混合并同时观察结果.如果在30s内凝集散开,代表是由Polybrene引起的非特异性聚焦,配血结果相合,如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合,如反应可凝,可进一步倒在玻片上用显微镜观察.

        二、血型测定

        1、取试管并标记,加入己知诊断血清2滴,再加待检者3-5%红细胞悬液(洗涤不洗涤均可)l滴.

        2、加LIMO.7ml混合均匀后,再加Polybrene2滴,并混合均匀·

        3、用BaSO血库专用离心机1000g离心力,离心10秒(若用普通离心机其离心条件为:3400rpm离心10秒)然后把上清液倒掉,不要沥干.让管底残留约 0.1ml液体.

        4、轻轻摇动试管.目测红细胞有无凝集,如无凝集则必须重作.

        5、最后加入Resuspending2滴,轻轻转动试管混合并观察结果,如凝集散    开,结果为阴性,如凝集不散开结果为阳性.

        注意事项

        1、可以用含EDTA之血浆代替血清使用.

        2、若病人血清(血浆)含肝素,如洗肾患者,须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。

        3、本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定.

        4、试剂使用前请回复室温再进行操作。

        5、加做辅助性抗球蛋白试验,目的是增加检测抗一K的敏感性,对检测其   他红细胞抗体无帮助.

        6、在冬天气温极底的情况下,操作交叉配血试验某些病人血清中可能含有    寒冷凝集素等因素,而导致假阳性的结果出现,若有此怀疑,建议在最后滴入Resuspending时试管立即置入37℃水浴时,轻轻转动试管混合,并在30秒      内观察结果.

        7、BaSO血库专用离心1000g离心力相当于3000γpm上文所指的普通离心机离一般为80型离心机,其相当离心力所对应转速为3400γpm.

        来源:丁香实验

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