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        原代细胞中各种组织消化方法集合

        互联网

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        细胞培养名称:新生大鼠皮质星形胶质细胞培养

        组织来源:种属:大鼠

        年 龄:新生1天-2天

        取材部位: 皮质

        选用的酶:0.125%胰酶

        消化时间:37度15min

        注意事项:胰酶平时用1.5ml EP管分装冻存,用时解冻,37预温1min,以保持胰酶好的活性,消化时每隔5min轻轻摇动消化组织。

        细胞培养名称:成年大鼠室下区星形胶质细胞培养

        组织来源:种属:大鼠

        年 龄:成年2.5月零

        取材部位: 室下区/室周区

        选用的酶:0.125%胰酶+0.02%EDTA

        消化时间:37度25min

        注意事项:每隔5min轻轻摇动消化组织吹打时采用分步吹打,先用较粗的巴斯德吸管吹打4-5次,静置后转移上部悬液,原管加培养液后换细管吹打。

        细胞培养名称:大鼠前脂肪细胞培养

        组织来源:种属:大鼠

        年 龄:2月龄180-220g

        取材部位: 副睾脂肪垫

        选用的酶:0.25%胰酶-0.02%EDTA

        消化时间:时间很快 大概就1分钟细胞就开始变圆

        消化流程:倒掉旧培养液,PBS洗2遍,加0.5ml消化液均匀润湿,镜下观察,细胞开始变圆马上加完培中止消化,1000rpm离心5分钟,去上清加培养基重悬细胞,1:2或1:3接种。

        注意事项:细胞消化很快,时刻观察。胰酶、培养基37度预热。

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