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        冷冻切片操作

        互联网

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        1.冷冻切片机要始终处于运行状态,即使在不做冷冻切片时也要开着致冷,不能时开时关,以免影响机器寿命。

        2.手术取下的新鲜组织不要固定,因固定过的组织不利于切片,而且还会影响染色。

        3. 用OCT做包埋剂,起到支撑的作用。先将OCT标在固定头上再将组织放在OCT上,OCT不要太多,以免流到固定头外,组织表面露在OCT外。

        4. 外固定头放在冷冻机内的速冷台上,在-25℃左右,冻10min,视组织不同而时间略有差异,组织较大或脂肪组织时间可长一些,一般情况下10min左右即 可。如果冷冻不足,则切片可呈粥糜状或切不下来;如果冷冻过分,则切片呈碎悄状或切片上呈条痕状,都得不到良好的切片。

        5.高速刀的角度,固定好,切片刀要快。

        6. 把冻好的冻头夹到切片机上,用精调修平组织,使其暴露最大切面,将微调刻度调在5μm,放下抗卷板开始切片,得到满意切片后,打开抗卷板,将组织贴在载玻片上。载玻片要放平。动作要稳,一次完成,这样才能将切片完整的贴在载玻片上。

        7.切片晾干后用95%乙醇固定10s,水洗后进行常规染色。

        8.冷冻切片完成后取下冻头组织,固定后做常规切片。将冷冻机内的组织碎屑清扫干净,定期打开紫外线消毒。

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