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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
118ml
货号:C1300
存储条件:常温保存。
产品简介
冰冻切片包埋剂是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已广泛用于免疫组化实验室中,其用途是在冰冻切片时支撑组织,以增加组织的连续性,减少皱折及碎裂。又因包埋液为水溶性,故在漂片时可溶于水,在后续染色中不会增加背景染色。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
使用说明:(仅供参考):
方式一:
1. 将放在蔗糖溶液中的组织块取出,放入20g/L蔗糖与 OCT 包埋剂1:1 体积比例的混合液中,室温浸泡 2h。
2. 将组织移入 OCT 包埋剂中室温浸泡 4h,更换新的 OCT 包埋剂,室温浸泡 6h。
3. 将标本置于托物台,用恒冷箱切片机切片(一般-22℃),片厚10um,贴于预处理的载玻片上,-20℃冰箱保存。
方式二:
1. 设置恒温冷冻切片机的运行温度在-10℃~-25℃范围内。
2. 在样本夹/盘的表面涂一层包埋剂,然后将组织轻轻按压在样本夹/盘上指定的位冒,在组织的周围适当的补加包埋剂,将样本冷冻到适合的切片温度。
注意事项:
1. 易碎可能因为冷冻过快或标本太大。
2. 组织、包埋块从支架脱落,可能因为包埋剂不足或组织在包埋剂中的位置过偏组织向前推进但不能顺利切片,可能因为刀和组织未固定紧或刀的角度不合适或组织未完全冷冻。
3. 切片卷曲可能因为 Anti-roll plate 不干净或切片太薄或刀钝。
4. 切片撕裂可能因为组织过分冷冻或刀口受损或不洁。
5. 切片融化可能因为冷室和刀的温度不正确。
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文献和实验。(此步骤一定要吸干水分,如有液体残留,OCT包埋后,组织表面形成冰晶,影响切片效果)。整个样本处理过程需要保持低温环境。 组织冰冻 在金属烧杯中加入三分之二的异戊烷(使样本足以完全浸入液体中), 然后放入液氮容器(与异戊烷的液面相平)中,使其充分接触,孵育15分钟。同时将所有过程中的采集器具进行预冷。 用预冷的样本匙将新鲜组织浸没在异戊烷中,速冻约1min或直至组织完全冷冻。 采用异戊烷而不是液氮的原因是液氮的沸点低,组织直接放入液氮后会沸腾,在组织周围产生气穴,导致组织降温过程
切片前实验准备 1.将OCT包埋的的组织块放入标本台: a.用OCT填充样品碟。 b.将OCT包埋的组织块置于台面,切面朝向台外 c.将样品碟和组织块放置在低温恒温室内的低温恒温器上 d.让OCT和组织块冻结并粘附在标本台上 2.使用冰冻切片去除多余的OCT: a.一旦冷冻,将组织块安装在低温恒温器的卡碟处,开始切片以去除多余的OCT。 b.切片情况在不同的组织和低温恒温器中有所不同。按照制造商的建议进行冷冻切片 c.继续切片,直到组织可见。 3.组织区域的切割选取
1.冷冻切片机要始终处于运行状态,即使在不做冷冻切片时也要开着致冷,不能时开时关,以免影响机器寿命。2.手术取下的新鲜组织不要固定,因固定过的组织不利于切片,而且还会影响染色。3. 用OCT做包埋剂,起到支撑的作用。先将OCT标在固定头上再将组织放在OCT上,OCT不要太多,以免流到固定头外,组织表面露在OCT外。4. 外固定头放在冷冻机内的速冷台上,在-25℃左右,冻10min,视组织不同而时间略有差异,组织较大或脂肪组织时间可长一些,一般情况下10min左右即 可。如果冷冻不足,则切片可呈
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