• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        甲醛滴定法测定氨基酸含量

        互联网

        18918

        一、目的

        初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点

        二、原理

        水溶液中的氨基酸为兼性离子,因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。甲醛可与氨基酸上的—N+H3结合,形成—NH—CH 2 OH、—N(CH 2 —OH) 2 等羟甲基衍生物,使N+H3上的H+游离出来,这样就可以用碱滴定N+H3放出H + ,测出氨基氮,从而计算氨基酸的含量。

        若样品中只含有单一的已知氨基酸,则可由此法滴定的结果算出氨基酸的含量。

        若样品中含有多种氨基酸(如蛋白质水解液),测不能由此法算出氨基酸的含量。

        脯氨酸与甲醛作用后,生成的化合物不稳定,导致滴定后结果偏低;酪氨酸含酚基结构,导致滴定结果偏高。

        三、材料、 试剂 与器具

        (一) 试剂

        1、0.5%酚酞酒精溶液

        称0.5g酚酞溶于100ml60%酒精中。

        2、0.05%溴麝香草酚蓝溶液

        取0.05溴麝行草酚蓝溶于100ml 20%乙醇溶液中。

        3、1%甘氨酸溶液

        取1g甘氨酸溶于100ml 蒸馏 水。

        4、标准0.100mol/L 氢氧化钠溶液

        5、中性甲本醛溶液

        取甲醛溶液50ml,加0.5%酚酞指示剂约3ml,滴加0.1mol/LnaOH溶液,使溶液呈微粉红色,临用前中和。

        (二)实验器具

        1、锥形瓶 2、碱式滴定管

        3、 移液管洗耳球 4、天平

        5、容量瓶 6、试剂瓶

        7、量筒 8、玻棒与烧杯

        四、操作步骤

        1、取3只100ml锥形瓶,按下表加入试剂。

        2、混匀后用标准0.100mol/L氢氧化钠溶液滴定至紫色(pH8.7~9.0)

        3、结果计算

        每毫升 氨基酸 溶液中含氨基氮的毫克数为

        五、注意事项

        利用甲醛滴淀法可以用来测定蛋白质的水解程度。随着蛋白质水解度的增加,滴定值也增加,当蛋白质水解完成后,滴定值不再增加。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序