简介
凯氏定氮法由丹麦化学家 J. Kjeldahl 于 1883 年建立，至今仍然是蛋白质定量最为精确和标准的方法， 但是由千操作过程繁琐，在实验室常规的溶液蛋白质含量分析中已经被其他较简便的方法所取代。
原理
凯氏定氮法测定蛋白质总含量的基本原理是建立在蛋白质的含氮量通常在 16% 左右(14%- 19%)，并因此而得名。
用途
目前在农业及食品工业中，凯氏定氮法仍作为动植物和食品蛋白质的含量测定方法。
材料与仪器
器材：凯氏蒸熘装置
试剂：
①硫酸
②标准碱溶液
步骤
质谱法测定蛋白质精确分子量基本过程可分为如下几步，本方法以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱为例介绍质谱法测定技术的全过程。
A. 将样品在硫酸中加热消化，硫酸将蛋白质氧化为二氧化碳和水，氮还原生成氨(NH3), 并与硫酸结合生成硫酸铵。
B.加入强碱，使硫酸按分解放出氨，通过特殊的凯氏蒸熘装置将氨收集到无机酸溶液中。
C. 用标准碱溶液进行滴定，确定氨量，根据氨量计算出样品的含氮量， 进而计算出蛋白质含量。
注意事项
1. 样品中存在的非蛋白态氮对于测定值有直接的影响。
2. 在构成蛋白质的氨基酸有偏差的情况下， 含氮量就会明显高于理论含氮量，造成测定误差。
3. 与其他方法相比，操作过程繁琐，对操作者的技术熟练程度要求高。
来源：丁香实验
