ABO正定型和Rh血型鉴定（微柱凝胶检测法）

<center><span><strong>1. 原理</strong></span></center>

ABO血型系统的红细胞遗传表型是根据每个人红细胞上是否存在A和/或B抗原以及血清中相应的抗体来决定的，将人分为四种血型：A型、B型、AB型和O型。红细胞上有A抗原的A型血清中有抗B，红细胞上有B抗原的B型血清中有抗A，红细胞上有A和B抗原的AB型血清中无抗A和抗B，红细胞上无A和B抗原的O型血清中有抗A和抗B。

Rh血型系统的鉴定是根据是否存在D抗原来决定的。

微柱凝胶检测法是凝胶分子筛技术和免疫学抗原抗体反应相结合的产物，通过调节凝胶（葡聚糖）的浓度，控制凝胶间隙大小，只允许游离红细胞通过，从而达到分离游离红细胞和凝集红细胞的目的。

如果红细胞沉积在凝胶管底部，表明红细胞未发生凝集，即凝集实验阴性；如果红细胞聚集在凝胶上部或中部，表明红细胞发生凝集，即凝集实验阳性。

2. 标本采集

2.1 标本种类：新抽取的抗凝血

2.2 标本要求：

2.2.1 抗凝剂：EDTA（浓度15g/L）或枸橼酸钠（浓度32g/L）抗凝

2.2.2 采血量：至少不低于5ml的静脉血（加入试管后注意于抗凝剂混匀）

2.2.3 离心要求：转速必须大于3500转/分，时间必须大于15分钟

3. 标本储存：待测标本在2-8℃下的保存时间为48小时

4. 标本运输：室温保存

5. 标本拒收标准：不可使用溶血或受污染，或者含有凝块的样品。

6. 试剂

6.1 试剂名称：DianaGel Confirm凝胶卡、DianaSol 1号试剂

6.2 试剂生产厂家：Diagnostic Grifols,S.A.（西班牙）

6.3 试剂说明：每张DianaGel Confirm凝胶卡由8个微孔管组成

（A-B-D-Ctrl-A-B-D-Ctrl），微孔管内含缓冲液浸泡的微粒筛，加上不同的试剂，试剂为：A：单克隆抗－A（克隆16243 G2+16247 E6），B：单克隆抗－B（克隆9621 A8-），D：单克隆抗-D（克隆P3×290+P3×35+P3×61+P3×21223 B10），质控孔（Ctrl）:无抗体的胶溶液微孔管做质控。

7. 操作步骤

7.1 将样品、DianaSol 1号试剂和DianaGel Confirm凝胶卡达到室温；

7.2 将新DianaGel Confirm凝胶卡离心；

7.3 红细胞悬液的制备： 用Diana 1号试剂来配制2-3％的血红细胞

稀释液（25μl压积极红细胞加入1ml的Diana 1号试剂中）；

7.4 在相应的微孔（1-6微管）中分别加入25μl的2-3％的红细胞悬液；

7.5 在DianaFuge离心机中离心9min；

7.6 判读结果。

8. 结果判断模式

9. 临床意义：ABO、Rh血型鉴定不合出现溶血性输血反应。