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- 2026年04月25日
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- 提供商：
北京普瑞华盛生物技术有限公司
- 服务名称：
组织样本匀浆实验服务
- 规格：
元/样
【组织匀浆的制备】
1、取组织块(0.1g~0.2g)最少可到2~5mg在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，准确称重，放入5ml
的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(pH7.4,0.01mo1/LTris-HC1,1mmo1/LEDTA-2Na,0.01mol/L
蔗糖，0.8%的氯化钠溶液)或者0.86%的生理盐水于匀浆管中，冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式有多种:手工匀浆，机器匀浆，超声粉碎。
手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研
磨数十次(6~8分钟)，充分研碎，制成10%的匀浆液。
机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000 转/分上下研磨制成10%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3~5次，在冰水中进行)，皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎，可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎，也可用国产超声波发生仪，用400安培，5秒/次，间隙10秒反复3~5次。
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片(直接涂片、染色均可以)，显微镜下观察细胞是否破碎，若没有则可延长匀浆时间。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10~15分钟，取上清液进行测定。
【样本保存】
动物组织样本暂时不测定，可立即低温冻存，温度越低越好，中间如不反复冻融，-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。
制备好的匀浆液建议不要冻存,最好当天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所下降,部分指标4℃可存放3~5天
(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,总蛋白测定可存5~7天等)
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文献和实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。生化实验一般建议用肝素抗凝。 ②样本保存：全血样本收集好后，若不能当天检测，4℃可保存1-2天。血清、血浆收集好后，若暂时不测定，可分装冻存备用，避免反复冻融，一般4℃可保存一周，-20℃可保存半个月，-80℃可保存一个月。特殊指标对样本有较高要求除外。 二、组织样本的收集和处理 1. 10%动物组织匀浆 取0.02-0.2 g新鲜动物组织块，用2-8°C的PBS（0.01 M，pH 7.4）漂洗，去除血液，滤纸拭干，称重，放入匀浆容器中，按照动物
。 2） 2000 rpm离心5 min，弃上清。按照每200万细胞加入50 μL裂解液的比例加入预冷的裂解液工作液，重悬细胞。冰浴裂解30 min，期间涡旋震荡3~4次，每次10 s。 B、贴壁细胞 1） 按常规方法用胰酶消化贴壁细胞，收集细胞后2000 rpm离心5 min，弃上清。PBS轻轻重悬细胞并计数。 2） 2000 rpm离心5 min，弃上清。按照每200万细胞加入50 μL裂解液的比例加入预冷的裂解液工作液，重悬细胞。冰浴裂解30 min，期间涡旋震荡3~4次，每次10 s。 C、组织样本
蛋白印迹 Western Blotting 抗体和样品要求 上海西唐生物蛋白印迹 Western Blotting 实验服务， 021-55229872 1. 为保证质量，抗体最好为进口单克隆抗体； 2. 样本要求：尽可能新鲜； 3. 样本量：组织样本，质量大于 100mg ；细胞样本，细胞数大于 1×106 ； 注意事项： 1. 市内细胞样品可直接常温运送，运送时在培养瓶中
