细胞性免疫原的制备

细胞性免疫原主要是指人、动物、微生物或寄生虫的细胞。

一、绵羊红细胞的制备

绵羊红细胞是制备溶血素的免疫原，制备时采健康绵羊的颈静脉血，立即注入无菌有玻璃珠的三角瓶内，经充分摇动15～20min，以去除纤维蛋白，获得抗凝绵羊全血。另外，也可将全血和Alsever液以1：2混合，Alsever液既能起到抗凝作用又能起到保护作用。全血与Alsever液充分混合后，置4℃保存可使用3周左右。

免疫前取适量抗凝血于离心管中，用无菌生理盐水洗细胞2～3次（每次2000rpm，10min）。取压积红细胞，用无菌生理盐水稀释至2%～5%，即可用于免疫注射。

二、以制备菌体（O）抗原为例

选用经鉴定合格抗原性完整的标准菌株，接种于琼脂斜面培养基，置温箱37℃培养24h增菌；用适量生理盐水洗刮下菌苔，移入含有无菌玻璃珠的三角瓶中，充分摇动混匀菌体；100℃水浴2～2.5h杀菌并破坏H抗原。将处理过的菌液检测有无活菌存在，合格后用生理盐水稀释成每毫升8亿～10亿菌，加入石炭酸至终浓度为5%，即为O（菌体）抗原。