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        实验前处理 | 人体脐带组织研磨优选流程

        丁香通

        1297

        1. 时间:2019 - 10 - 11

        2. 样品:人体脐带组织

        3. 仪器:主机 TL2010S 中通量组织研磨仪(北京鼎昊源科技有限公司生产)

        配件 2 ml 研磨管,12×2 ml 适配器(1 对),直径 5 mm 不锈钢研磨珠

        4. 步骤:

        ① 将脐带组织分成等量的小块,分别装入 2 ml 研磨管中;

        ② 在研磨管中分别加入 2 颗直径 5 mm 的不锈钢研磨珠;

        ③ 在研磨管中分别加入 300μm 裂解液,盖紧管盖,置入 2 ml 适配器中,将适配器固定在 TL2010S 研磨仪的摇臂上;

        ④ 在 TL2010S 操作面板上设置实验参数:

        Speed(振荡速度):2000 次/分钟

        Cycle(循环次数):1 次

        RunTime(研磨时间):50s

        启动研磨仪,一键自动研磨;

        ⑤ 研磨完全停止后,卸下适配器,取出研磨管,脐带组织已研磨成细腻的匀浆状;

        ⑥ 离心之后取上清液提取 DNA,进行后续实验。

        研磨总结:

        针对于脐带、胎盘等韧性较大的动物组织,在摸索最佳实验条件时,可以参照以下参数:

        1. 研磨时加入适量溶液(裂解液或缓冲液);

        2. 选用直径 5 mm 或 6 mm 的研磨珠,2 ml 的研磨管中加入 2 颗;

        3. 转速 1800 - 2000 次/分钟;

        4. 研磨时间 30s- 60s,设定梯度时间,找出最佳研磨时间。

        https://www.biomart.cn/infosupply/ 20481643.htm

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