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放射性免疫分析(RIA)

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C1q放射免疫测定法

一、实验试剂 CFD稀释液(即VBS),10%三氯醋酸,C1q溶液。 二、实验设备 PEG(MW6 000),离心机。 三、实验步骤 1. C1q标记法C1q的同位素标记,一般用125I,也可用131I。 125I的标记有两种方法,即氯胺T法和乳过氧化物酶法。下面介绍氯胺T法: (1)在100 μl C1q(1 mg/ml)中,加入100 μCi125I, ...

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时间因素对放免分析测定磺胺类残留的影响

【摘要】本文研究时间因素对应用CharmⅡ放射免疫分析方法测趸磺赣类药物残留试验的影响,试验结果说明如果延长或缩短操作时间,将影响检测结果,因此在操作中要快速,保证检测的准确性。 【关键词】放射免疫分析 磺胺类测定 时间 【中图分类号】R155.51&nb ...

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放射性核素数据

1、放射性核素衰变表 3 H 35 S 32 P 125 I ...

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标记抗体的免疫放射技术(IRMA)

(一)原理 IRMA是采用过量的标记抗体与待测抗原的非竞争性结合反应,然后加入固相的抗原吸附剂以结合游离的标记抗体,离心去沉淀,测定上清液中的放射性强度,从而推算出待测样品的抗原含量。 (二)放射免疫检测与免疫放射检测(即IRMA与RIA)的区别 见表13-4。 表13-4 IRMA与RIA的区别 ...

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基于放射免疫测试系统的数据管理实现

阐述了放射免疫分析及数据管理的概念,结合实际对放射免疫测试系统进行了需求分析,采用了模块化设计方案及相关技巧。通过实例实现了放射免疫测试系统的数据管理功能。

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放射免疫分析中影响标准曲线建立的因素

放射免疫分析(RIA)是由美国生物学家Yalow和Berson于1959年创建的一种体外放射分析技术,该技术有其结果可靠。简便易行,成本低廉,高灵敏度,高特异性的优点。其超微量测定可达ng至pg水平,目前可测物质已达300余种,对临床的诊断和治疗起着积极而重要的作用。在实际工作实践中,标准曲线的制做非常重要。它可对整批实验结果产生重大影响。在放免分析测定中被测物质浓度是根据标准曲线计算得来的。标准 ...

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放射免疫法快速检测饲料中磺胺粪药物残留

磺胺类药物(Sulfonamides,SAs)是指具有对氨基苯磺酰胺结构的一类药物的总称,是一类用于预防和治疗细菌感染性疾病的化学治疗药物。通过任何途径摄入的磺胺类药物会在人体中蓄积,其残留能破坏人的造血系统,造成溶血性贫血症、粒细胞缺乏症、血小板减少症等。国际食品法典委员会(CAC)和欧美等大多数国家规定食品和饲料中的磺胺类药物总量及磺胺二甲基嘧啶等单个磺胺类药物的含量不得超过0.1 mg/kg ...

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放射免疫分析法测定重组人白细胞介素-2含量

白细胞介素-2(interleukin rhlL-2,IL-2)主要由活化的T淋巴细胞分泌的一种糖蛋白,是调节机体免疫功能最主要的淋巴因子一。天然IL-2含有糖基,基因重组IL-2不含糖基,由133个氨基酸组成,相对分子质量为15KD。IL-2在机体应答,免疫调节和抗肿瘤免疫中具有十分重要的作用。临床用于多种恶性实体肿瘤。重组人IL-2是一种重组人白细胞介素一2的生物制品,一般制备成粉针剂应用,其 ...

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放射免疫分析法原理及操作注意事项

放射免疫分析的原理:就是利用放射性核素标记抗原或抗体,然后与被测的抗体或抗原结合,形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。它又分为两种方法。 一、竞争性RIA,又称传统RIA 主要特点:标记的是抗原。其原理:未知抗原Ag+标记抗原Ag +已知定量抗体Ab标记抗原与抗体复合物AgAb+未知抗原与抗体复合物Ag Ab+游离标记抗原Ag (去除)(未知抗原多,标记抗原与定量抗体结合的复合物就少,表现为负相 ...

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第五代放射免疫分析方法及有关问题探讨

磁性微粒子固相RIA是最近发展起来的一类新型RIA,它克服了目前市售常规试剂检测程序多,流程长的缺点,已列为第五代RIA技术。本文就试剂制备,免疫反应模式、技术特征和对比分析及应用前景等方面作简要 评述。

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孕酮的放射免疫测定法

孕酮的放射免疫测定法很敏感,但由于孕酮是半抗原,须先同牛血清白蛋白结合,才能注射于家兔,使之产生抗体。牛血清白蛋白结合在孕酮上的不完全部位对抗血清的特异性有很大关系,若结合在C3抗血清无特异性,结合在C6则特异性高,结合在Cll特异性更好。孕酮试剂盒已广泛应用于临床,介绍如下。 一、基本原理 此法采用双抗体放射免疫法 Ag※+Ab+Abl一(Ag※Abl)+(AgAbI)+Ag※ 含孕 ...

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间接放射免疫法检测待测样品mTNF

肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)是一类能直接导致某些肿瘤细胞坏死的细胞因子,有TNF-α与TNF-β两种类型。 TNF-α主要来源于活化的单核/巨噬细胞,TNF-β主要来源于活化的T淋巴细胞。虽然两型TNF的细胞来源不同,结构也不同,但均能与不同的受体结合,故具有极其相似的生物学活性。TNF可进入体液成为分泌型(或可溶性 ...

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HCG在放射免疫法中的测定

一、原理 HCG是放射性同位素标记技术与抗原抗体免疫反应相结合的超微量分析法,是用放射性核素(如125I/3H)标记的极微量的示踪抗原(Aundefined)/抗体(Aundefined)与待测抗原Ag/抗体Ag)一起来竞争结合有限的特异性抗体(Ab)/抗原(Ag),故称饱和分析或竞争抑制法,其反应过程为:Aundefined•Ab量固定,.Aundefined+Ag>Ab可结合的数目(抗原过量),Aundefined与Ag竞争结合Ab,直到反应 ...

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放射免疫测定胰岛素

一 、标准管 待测管01020408016012 试管号1,23,45,67,89,1011,1213,1415,16 标准品(不同浓度)100100100100100100 待测血清100100 抗血清(二抗)100100100100100100100100 分析试剂100100100100100100100100 混匀,37℃温育2h 125I-胰岛素100100100100100100100 ...

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放射免疫标记技术

一、放射免疫标记技术 放射免疫标记技术是将同位素分析的高灵敏度与抗原抗体反应的特异性相结合,以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法,由于此项技术具有灵敏度高 (可检测出毫微克(ng)至微微克(pg),甚至毫微微克(fg)的超微量物质,特异性强(可分辨结构类似的抗原)、重复性强、样品及试剂用量少、测定方法易规范化和自动化等多个优点。因此、在医学及其他生物学科的研究领域和临床实验诊断中广泛应用于各 ...

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放射免疫分析中造成测量误差的可能因素

造成误差的可能来源有以下几个方面: 一、各种仪器:设备的准确性、稳定性、效率以及被污染等情况带来的误差。 如:①由于放射性测量仪器的稳定性、效率、样品试管的材料和均匀性及被测物的放射性强度等原因。②由于样品的自吸收,本底校正,测定时间,可能的污染等原因。③在试验室中所有的移液管、微量取样器以及天平的刻度、校准和使用方法等原因。④由于反应试管、移液管以及测定用试管等表面清洁度和所引起的不同吸附等原因 ...

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放射免疫分析及其在检验医学中的应用

放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法。于1960年由美国学者Yalow和Berson创立,并首先用于糖尿病患者血浆胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破,开辟了医学检测史上的一个新纪元。它使得那些原先认为是无法测定的极微量而又具有重要生物学意义的物质得以精确定量,从而为进一步揭开生命奥秘打开了一条新的道路,使人们有可能 ...

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放射免疫分析平衡饱和加样程序

一、基本原理 所谓平衡饱和,是指抗原和抗体反应达到再不结合,也不解离的平衡状态,称为饱和状态,即平衡饱和。所以,有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。 二、加样程序 一般先加标准物或被测样品,再加抗血清,最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合,提高抗原的竞争抑制能力。 在小分子半抗原的放射免疫分析中,标记抗原和未标记抗原与抗体结合的亲合力常 ...

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放射免疫分析顺序饱和加样程序

1 、基本原理先将标准物或血样品与抗血清混匀,免疫反应6~24h,使抗原与抗体充分结合,甚至达到平衡,然后再加入标记抗原,与抗体反应12~24h,最后分离B与F,这称为顺序饱和分析法。 应用顺序饱和加样,可以提高测定方法的灵敏度。Utiger在做人促甲状腺激素(TSH)放射免疫分析时,将标记物延至第2天加入,发现其灵敏度增加两倍。如果缩短最后的温育时间,仍可取得满意的结果。所以一般认为,在顺序饱和 ...

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放射免疫对流电泳

(一)原理 将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中放出的射线作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影再经过显影把“像”显示出来。这样能检出肉眼看不见的沉淀线从而提高反应的敏感性这种方法可应用于凝胶中的所有反应。 (二)材料 1、放射性同位素标记的抗原或抗体 2、X—射线胶 ...

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