流式细胞术

一、样品制备1. 变性条件——SDS LB直接裂解用常温或者高温预热过（预热更有利于阻止蛋白水解或者磷酸酶去磷酸化，但容易遗忘，LB久煮某些性质会改变）的undefinedSDSLB（或者略高1.undefined）直接加 到细胞或者组织上并煮样。通常6孔板细胞80%以上密度，需200ul，其他按平板面积比类推。通常条件下，SDSLB都是过量的（因此不一定要严格参考 SDS LB稀释比）；如果SDSLB不够，样品核酸、蛋白浓度过高时，煮样后会发现tip吸不上来，非常粘、 ...

一、材料和试剂 1. 抗体 （1）Ratanti-mouseCXCR5-biotin（BP Pharmingen 551960） （2）Goatanti-ratIgG-biotin（BP Pharmingen 554014） （3）Straptavidin-PECy7（B PPharmingen 557598） （4）Ratanti-mous ...

一、材料与试剂 1. 抗体 （1）鼠抗人CD56FITC（BD340410） （2）鼠抗人CD2FITC（BD555326） （3）鼠抗人CD19FITC（555412） （4）鼠抗人CD14PerCP（InvitrogenMHCD1431） （5）鼠抗人CD16PacBlue（BD558122） （ ...

1. Q：要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查，但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查，请问：胃组织要怎样保存好呢？用低温保存，还是用乙醇固定？或者固定后再低温下保存？ A：我做过乳腺细胞的DNA含量测定，取得组织以后，先处理成单细胞悬液，然后再加70%冰乙醇固定，要保证冰乙醇的最终浓度为50%，这样固定的细胞悬液可以至少保存12小时，最多可保存一个月，上机检测前再加PI综合染液 ...

一、资料与方法 1. 检测对象：研究对象来自武汉协和医院2003年3月-2004年10月的住院患者或门诊体检人群。恶性肿瘤组：经临床手术和病理检査确诊为肺癌、肝癌、前列腺癌、乳腺癌、消化道肿瘤和妇科肿瘤等患者121例，其中男74例，女47例，平均年龄56.5岁；疾病对照组：临床确诊为胆囊炎、胰腺炎、前列腺炎（增生或肥大）、肝炎或肝硬化等良性疾病患者的血清样本作为良性疾病 ...

一、材料和方法 1. 标本来源：156份临床病理确诊的消化系统肿瘤患者（男92例，女64例，年龄12~85岁，平均年龄53岁）血清标本来自北京天坛医院和中国医学科学院肿瘤医院，其中，肝癌50份、胰腺癌33份、肠癌32份、胃癌41份。健康体检者（男70名，女57名，年龄16~68岁，平均年龄46岁）血清标本127份。消化系统炎症患者（男47例，女48例，年龄18~70岁， ...

一、仪器和试剂 Luminex200流式荧光检测仪(美国Luminex公司）；流式荧光多肿瘤标志物联合检测试剂（上海透景生命科技有限公司）； E170电化学发光分析仪及配套肿瘤标志物检测试剂（罗氏公司）。 二、标本来源 2007年5月~6月，200名患者空腹静脉血，每人采集4 ml，血样分别置于美国BD公司分离胶试管中，-20℃下保存待检。 三、操作与评价方法 试剂盒测定参数设置和仪器操作严 ...

简介 免疫细胞是一组不均一的细胞群体。各种特定的细胞群其细胞表面表达有各自特异的表面标志分子，利用这些特异的表面标志，可以鉴定、分离和纯化相应的细胞群。随着单克隆抗体技术的诞生和免疫标记技术（特别是荧光标记技术）的发展，以及计算机科学的应用，使利用仪器的方法检测特异的细胞膜表面分子成为可能。本章介绍的荧光激活细胞分类技术就是采用单克隆抗体技术和免疫荧光标记技术，并结合光学检测和计算机分析技术而产 ...

由于在流式细胞实验过程中，荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此，需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素，例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。 流式抗体的选择： 1 流式抗体本身也是抗体，所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件：目标蛋白特异性，反应种属以及应用实验。 2 流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。在流式实验过 ...

微流式细胞分析术（Personal Flow Cytometry）是采用微毛细管流式技术（Microcapillary）对液流中形成单细胞流的细胞或其它生物微粒（如人工微球，细菌，小型模式生物等）逐个进行绝对计数和快速定量分析的技术。作为下一代的流式检测技术平台，微流式细胞仪诞生于上世纪九十年代。经过近二十年的发展和完善，今天的流式细胞仪已经接近成熟，并被广泛的运用于从基础研究到工业生产的各个方 ...

流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒（如微球，细菌，小型模式生物等）逐个进行快速定量分析和分选的技术。作为应用流式细胞术进行检测的技术平台，现代流式细胞仪产生于上世纪六七十年代。经过近四十年的发展和完善，今天的流式细胞仪已经十分成熟，并被广泛的运用于从基础研究到临床实践的各个方面，涵盖了细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、遗传学及临床 ...

一、对照组的设置： 在流式细胞术中所测得的量都是相对值，不是绝对值。如需知道绝对值 时必须设置对照组样品。对照组样品包括有阴性对照和阳性对照。 1. 阴性对照的设置 ① 在实验过程中，如做间接标记法，可设置与一抗无关的实验，即在 实验中不加一抗而只加上带有荧光标记的第二抗体作为阴性对照 管，作为阴性对照。 ② 在实验过程中，假设做直接标记法，可设置理论上的阴性细胞作为 阴性对照管， 实验过程及步 ...

视频介绍了微流体探针的操作和使用方法，包括如何组装和安装至倒置显微镜顶部，如何对准底层表面，以及处理侵入溶液的底层表面时的用法。

我们提出了一种新的多室神经元共培养微系统平台用以研究体外中枢神经系统轴突-神经胶质细胞之间的相互作用，此平台能平行开展多至6个独立实验，且由于使用新的微流体器具组装方法，大规模生产时仍具有良好的重复性。

这里提出了一种研究DNA纳米复合物实时动力学的结合使用纳米光子学（即量子点-荧光共振能量转移，QD-FRET）技术和微流体技术的新方法。QD-FRET可以高灵敏度地指证分子间的相互作用和定量分析整个合成过程，而微流体提供了一个控制良好的微环境以对自组装过程进行空间分析。

应用主要组织相容性复合体(MHC)II型四聚体，可直接通过流式细胞仪观察抗原特异性CD4+ T细胞。此方法依赖于负载于MHC的肽类和相应T细胞受体之间的高特异性相互作用。

一种新型微流体装置已经被开发出来，它利用了被动式抽吸现象，且拥有可控制地以液滴形式运输的液体输送系统。

BioFlux产品融合了方便的微孔板高通量技术和调控生理相关剪切流技术，可以模拟一个广泛条件的生理条件模型，准确获得高质量的图像。

该视频描述了一个以猕猴为模型，利用多色流式细胞仪进行详细地细胞免疫反应表型和功能分析的方法，特别是CD4+和CD8+ T细胞细胞内细胞因子的生成，以及其独特的记忆子集。

视频演示以微流体孔板的形式模拟生理剪切流环境，以粘附和聚集血液中的血小板的过程。