其他试剂

细胞制作

研究体外培养细胞成功率．主要针对原代培养的动物和人的组织细胞，由于培养的目标细胞很多是成体细胞和分化终末的细胞，缺乏肿瘤细胞无限增值的能力。容易导致培养失败，为了在实验中提高原代培养的成功率，应注意一下几个方面的因素。一、取材(一) 细胞的种类根据实验的目的和要求，尽可能选择具有分裂增殖能力的细胞，如上皮细胞、成纤维细胞等。原代培养肿瘤细胞较正常细胞容易，成功率也较高。(二) 取材的部位在实验目的和要求允许的情况下．取材应 ...

Transwell 小室在细胞实验中很常用，共培养实验、趋化实验、细胞迁移、细胞侵袭以及药物转运实验都会用到，但小室的规格有很多种，不同的实验需要用到的小室规格也不同。根据 transwell 板的不同，transwell 小室可以分为 6 孔板小室、12 孔板小室和 24 孔板小室以及和 transwell 皿配套的 75 mm 直径的小室；根据孔径的不同，从小孔径到大孔径又分为 0.4μm 规格、3μm 规格、5μm 规格、8μm 规格，不同实验对小室孔径的要求也不一样。小于 3μm 孔径的 ...

xiaoerlong 求“体内培养”定义lightningwing 能否说的详细些，是抗体这类的体内培养，还是生物医学工程相关的体内培养？xiaoerlong 生物医学工程相关的体内培养（细胞培养方面的）xiaoerlong lightningwing wrote:能否说的详细些，是抗体这类的体内培养，还是生物医学工程相关的体内培养？生物医学工程相关的体内培养xxsl_2007 还真不好回答。体内培养是在动物体内生产所需物质的方法，如 ...

liuzm021 如题，谢谢。xiaojianmao 都是离子，应该可以吧……建议灭完分装……看到染了直接丢掉……xiayuxue 可以呀，为什么不能？roy2929 补一点超纯水进去再灭吧，会有蒸发~liuzm021 多谢各位，我自己也觉得可以。不过最好还是少灭几次吧本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

256k 实验要抽血，提取血中的单核细胞、巨噬细胞、DC细胞，然后提取RNA。------------------------------------背景线。提取RNA不可能一次成功，如果多次做就要反复抽自己的血，太血腥也太打击积极性了。我设想：能否，分离出的单核细胞扩大培养，再传几代，以扩大细胞数目。问题：单核细胞能传代么？能扩大培养么？ningmeng1119 提取出来后你可以把细胞保存起来，需要的时候拿出来复苏直接提取RNA，可以试一下256k 谢谢 ，这也是 ...

观天 有用钒酸钠（sodium orthovanadate）、氟化钠（sodium fluoride）做细胞培养抑制磷酸酶活性的吗？（不是提蛋白的cocktail）请问使用浓度是多少？有一篇paper配的钒酸钠stock pH=10,需要这么高吗？同一篇paper又-80°C保存，-20°C容易降解吗？观天 已经知道了。wangyananxy 同问，求楼上解答！谢谢观天 使用浓度因细胞而不同，可用MTT确定；配制：stock pH=10时以单体形式存在； ...

ez815 各位战友，请问gastrin怎么溶解？我买了想加在细胞培养液中，但不知道粉末怎么溶解？急呀！紧急求助！在此谢过！zhujoker http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=gastrin看看人家是怎么做的？kuailecaoyang 请问一下问问题的战友已经知道怎么溶解了吗，gastrin？我也想做，但是也不知道如何溶解。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷 ...

七叶禾0916 想要将细胞培养板重复利用，要怎样处理呢，有人说用酸泡过夜，再用自来水和蒸馏水冲，再用酒精浸泡过夜，再紫外灭菌2h，不知应该用什么酸泡，这样处理效果怎样？求高手指教！！！wendywan 可以用酸泡一夜，然后单蒸水冲掉酸，后双蒸水冲至少三遍以上，这是最少的。然后紫外灭菌，时间可以长一些，放在超净台里照着就好了。酸一般可以用浓硫酸加重铬酸钾，比例在网上查一下就可以了！完了之后，可以在用之前重新包被板子，这样的话，效 ...

杨蕾医生 PBS是为了洗掉培养基 以便胰酶的消化 可是 能否用双蒸水呢lmnsmu 不可以用ddH2O，它里面没有离子，渗透压与细胞内液不同，会导致细胞水肿。不过偶尔用一次，时间短也不会有太大的影响。杨蕾医生 lmnsmu wrote:不可以用ddH2O，它里面没有离子，渗透压与细胞内液不同，会导致细胞水肿。不过偶尔用一次，时间短也不会有太大的影响。嗯 有道理 谢谢指点啦knightkidd 考虑渗透压！不然全爆了~本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用 ...

bbdeng 有没有红细胞裂解液的配方？本人试了碧云天的红细胞裂解液，效果不大好，请高人指点！dnazyme http://baike.baidu.com/view/2601370.htmhttp://www.genialgenetics.com/products/reagents/erythrocyte-lysis-solution.htmlCOMPOSITION AND COMPONENT DATAPrepared or working solu ...

zcy20002001 请问上海哪里有可以做细胞低氧培养的地方，本人想做低氧条件下细胞的信号转导，谢谢！j19s87x 有意可以联系我QQ：59405497 以前做过，也在上海zcy20002001 没有QQ号，请问你在上海哪个大学或研究所，或者留一个msn细胞超人 现在很多人都在作信号转导 ，我女朋友博士课题也是在做，挺麻烦的，要做很长时间常能出结果，你去别人那儿做是啥意思，花钱用人家设备，还是跟他们老师合作。北京这边很多也是做低 ...

cell100 最近用ly294002处理2种细胞系，添加浓度为20uM处理2-12小时，wb检测p-Akt的量发现不但没减少，反而增加，很奇怪的！百思不得其解，不知是何原因？用50uM处理时也是这样?看来只有向高手求助了。cell100 用50uM处理后的结果也差不多，请高手帮忙分析一下原因，呵呵shutaozheng_824 其实，我也出现过类似的情况啊！当时我在用MAPK/ERK1/2 特异性抑制剂U0126预处理食管癌细胞 ...

entmao 我做的是喉癌HEP-2细胞培养，要用胰岛素刺激，浓度5微克/ml,不知道临床用的普通胰岛素可不可以用。另外临床用胰岛素都是多少多少单位，不知道1U胰岛素等于多少微克。请各位大侠们指导，多谢啦。ylhuang0502 这个我是外行，但是胰岛素作为一种多肽，LZ要保证它能透过细胞膜，所以一般商用多肽类的抑制剂等试剂用于细胞时，都会连接TAT等信号肽，以保证能透过细胞膜。这一个很重要，希望LZ选用临床用的普通胰岛 ...

375308329 我用雷帕霉素50、100、200uM处理了细胞24小时，然后测了个MTT但是一点趋势都没有，想请问有哪位高手做过这个药的相关实验？非常感谢！jz2298 什么细胞？小有 这个药是典型的诱导自噬的chaomindai 单用这个药物处理细胞，在低浓度时对细胞几乎没有影响。我曾用rapamycin 100nM-100uM处理cortical neuron，对neuron影响不大，但在加H2O2的同时加rapamycin ...

woowe97417 要转一个带氯霉素抗性的质粒到DH5α保存，但是发现用的DH5α对氯霉素不敏感，氯霉素是用无水乙醇配的，有做过类似实验的站友帮忙解答一下，谢谢啦！gingivalis 严谨型质粒 25 ug/ml松弛性质粒 170 ug/ml《现代分子生物学实验技术》--P753 (卢圣栋)DH5α应该对氯霉素敏感，如果在上述两个浓度条件下，DH5α能生长，那就是DH5α出问题了，高压灭菌后扔掉，换新的重做。woowe97417 谢谢楼上的， ...

不要太懒哦 请教各位高手，如果在细胞的消化传代过程中，我想以EDTA替代胰酶对细胞进行消化的话，EDTA的配方？？？浓度？？多谢！！佳杰宝贝 EDTA可以代替胰酶吗？黑糊糊2000 EDTA 不能代替trypsin,EDTA是螯合剂结合钙离子的，钙离子可以抑制胰酶的作用，所以采用胰酶和EDTA一起来作用，当然EDTA 因为对螯合细胞结构之间的钙离子的作用，所以对细胞有一定程度的离散作用，一般多用的浓度是0.02% 可以用不含钙镁的平衡盐溶 ...

lifengna 各位战友，最近在做雷帕霉素对mTOR通路的抑制试验，培养的是C2C12细胞，在分化阶段进行干预，其中一组单独添加50 um/L雷帕霉素，奇怪的是不仅没有抑制C2C12的分化，反而比空白组更好，这是怎么回事呢？排除实验操作中的问题。谢谢大侠出手相救！zhm1212 你做雷帕霉素50 um/L，这个浓度难道不高吗？有报道称全血中雷帕霉素安全有效的浓度窗为5．5～16．4 nmol／Lbubu88 你是用的哪个公司的雷帕霉素？ ...

ph1996 请教各位战友：刚买来细胞因子TNF-α，peprotech公司的产品，说明书中未具体说明这个细胞因子是如何来配，以及长期保存的话如何配母液。请各位用过这个细胞因子的战友给解答一下，谢谢，在线等~~~~ph1996 说明书中提到，如果长期保存，可以用含有0.1%的BSA的BUFFER来存，可这个BUFFER是什么啊？freecell 按照蛋白质的保存方法就可以了，DPBS加入终浓度20%的甘油，-80冻存。ph1996 刚 ...

zhuoer9401 我在养一种细胞，分别用低糖培养液和高糖培养液，然后做RT-PCR，我扩增得这种基因在低糖得时候不能扩增出来，但是在高糖得时候能扩增出来。可能就是在低糖的时候不转录，而在高糖得时候转录。我的发现有没有意义啊？zhujoker 你的发现理论上是有意义的。但是不知道你的基因到底是什么基因了，细胞到底是什么细胞了？因为如果你养的是肿瘤细胞，并且你发现的这个基因是原癌基因的话，你的这个发现就更有意义了。因为 ...