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DNA含量测定

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差异表达基因克隆技术的新进展

相关专题 崔大祥 闫小君 苏成芝 2004-8-2 16:34:54 国外医学遗传学分册1999年第22卷第5期  提要 分离并克隆差异表达基因是目前功能性基因研究的热点。mRNA差异展示是筛选差异表达基因最有效的技术之一,它的主要不足是有一定假阳性。RDA、SSH、DSD、LSH技术能够克服假阳性,但也具有一定的不足,应根据需要选择运用。随 ...

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微阵列分析与基因差异表达

相关专题 药物基因组学中的基因表达分析目前主要应用于创新药物研究和开发。同时,基因表达谱已经开始为慢性致命性疾病的药物治疗效应提供预测信息,并指导治疗选择,而寡核苷酸微阵列平台具有应用于药物基因组学研究的潜在优势。   微阵列分析的特点   与DNA顺序分析和基因分型不同,微阵列基因表达分析的分析物是信使RNAs(mRNA)。信使 ...

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Isolation of DNA fragments using glass milk (GENE

相关专题 1. Excise DNA section from gel into eppendorf tube.2. Add 2-3 volumes of NaI (NaI for geneclean - dissolve 89.9 g NaI in 100ml dH2O store in light proof bottle) soluti ...

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Beginner’s guide to Real

相关专题 PCR or the Polymerase Chain Reaction has become the cornerstone of modern molecular biology the world over. Real-time PCR is a novel application of the Polymerase Chai ...

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FAQs on Real

相关专题 Why PrimerBank?PrimerBank is a public resource for PCR primers. These primers are designed for gene expression detection or quantification (real-time PCR). There are s ...

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Real

相关专题 The DNA Facility houses the “real-time” or kinetic PCR instrument the Applied Biosystems Model 7700 sequence detection system (the TaqMan instrument). The polymerase c ...

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几种转染时常用的报告基因

相关专题 总有一种转染方法适合你 报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。 作为报告基因,在遗传选择和筛选 ...

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RNA提取与RT

相关专题 在做Northern等杂交实验、构建cDNA文库、获取能够编码真核生物蛋白的基因、获得RNA病毒基因时,会用到RNA提取和RT-PCR技术。真核生物的基因组是DNA,为什么不直接从DNA PCR得到我们需要的基因呢?因为真核生物的基因含有大量的非编码区,称为内元(intron),真正编码蛋白的区段是被这些内元隔开的,这些编码区叫做外 ...

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一种新颖简便的荧光实时RT

相关专题 一种新颖简便的荧光实时 RT-PCR相对定量方法的建立 A Novel and Convenient Relative Quantitative Method of Fluorescence Real Time RT-PCR Assay Based on Slope of Standard Curve 稿件编号:2005 ...

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聚合酶链反应一单链构象多态性分析 (PCR

相关专题   聚合酶链反应-单链构象多态性分析(Single Strand Conformation Polymorphism Analysis of Polymerase Chain Reaction Products PCR-SSCP)是近年来发展起来的一种基因分析方法。 PCR-SSCP分析的基本程序为:首先PCR扩增特定靶序列,然后将 ...

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A method for the absolute quantification of cDNA using real

相关专题 Joseph A. Whelan Nick B. Russell Michael A. WhelaundefinedOnyvax Ltd. St. George’s Hospital Medical School Cranmer Terrace London SW17 0RE UKReceived 3 February 2003; receive ...

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Primer Premier: Program for Design of Degenerate Primers fro

相关专题 Vinay K. Singh A.K. Mangalam1 S. Dwivedi1 and S. Naik1Premier Biosoft International Palo Alto CA USA and 1Sanjay Gandhi Post GraduateInstitute of Medical sciences Luck ...

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Optimized Welsh DDRT

相关专题 Provided by Mirta Grifman and found in Neuroscience Protocols (Nov 1995)MATERIALS:Special equipment: Thermocycler for PCR such as the Perkin-Elmer (Norwalk CT) oil-fre ...

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核酸探针标记(label of nuclei acid probe )

相关专题 一、探针的类型 核酸分子探针是指用放射性核素或其他标记物标记的、能与特定的靶分子发生特异性相互作用的DNA或RNA片段。1. 基因组DNA探针:病毒DNA等2. cDNA探针;最常用3. 寡核苷酸探针:10-50bp,测序、点突变4. RNA探针:稳定性高、特异性强,但RNA极易降解,不宜操作。二、探针的标记物理想的标记物:敏感度 ...

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PCR及RT

相关专题 1. 问题:RT-PCR灵敏度:在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物。 可能原因: 1)RNA被降解 建议解决方法: 在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA使用良好的无污染技术分离RNA; 在将组织从动物体取出后立刻处理在100%甲酰胺中储存RNA; 如果使用胎盘RNase抑制剂,不要加热超过45℃或pH超过8.0 ...

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In situ RT

相关专题 Solutions10X RT Buffer10X PCR Buffer100 mM Tris pH 9.0500 mM KCl1% Triton X-10025 mM MgCl2use at a concentration of 1.5 mMLysis Solution4M GuSCN 250 g guanidine thioc ...

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成功的RT

相关专题 1、高质量RNA成功的cDNA合成来自高质量的RNA。高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂,如EDTA或SDS。RNA的质量决定了你能够转录到cDNA上的序列信息量的最大值。一般不必使用oligo(dT)选择性分离poly(A)+RNA。不管起始模板是总RNA还是poly(A)+ RNA,都可以检测到扩增结果(图2) ...

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Access RT

相关专题 1)什么是Access RT-PCR?2)什么是Access RT-PCR系统?3)总RNA能否作为模板,是否一定需要poly(A)+RNA?4)使用Access RT-PCR系统需要的RNA的量是多少?5)同一般常用方法相比较,Access RT-PCR系统有哪些优点?6)使用Access RT-PCR系统需要优化哪些条件?7)T ...

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我的RT

相关专题 我做的是人VI 型胶原蛋白α1 链的克隆流程和实验结果如下,给做RT-PCR 的战友一点参考。首先引物设计引物设计有3 条基本原则:首先引物与模板的序列要紧密互补,其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构,再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA 聚合反应(即错配)。具体实现这3 条基本原则需要考虑到诸多因素,如引物长度(p ...

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四步法消除SYBR Green Ⅰ实时定量RT

相关专题 张驰宇1 2)  张高红1 2)  杨 敏1)  贲昆龙1) 3(1) 中国科学院昆明动物研究所分子与细胞免疫学实验室昆明 650223 ;2) 中国科学院研究生院北京 100039)摘要 为建立一种新的SYBR green Ⅰ实时定量RT-PCR 方法使之能够有效消除引物二聚体(PDs)对实时定量结果的影响. 对RT-PCR ...

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