DNA含量测定

相关专题 一、实验目的 1. 了解DNA的存在状态，增加感性认识。 2. 掌握DNA的制备方法以及细胞分级，细胞核制备，细胞膜裂解和解离DNA-蛋白复合体（DNP）的技术。 3. 学习用紫外分光光度计测定DNA含量的方法。 二、实验原理 核酸是重要的生物大分子。在细胞核内，核酸通常是与某些组织蛋白质结合成复合物，即以脱氧核糖 ...

相关专题 A frequent cause of concern among investigators performing quantitative RT-PCR is inaccurate data due to DNA contamination in RNA preparations. Although DNA contaminat ...

相关专题 反转录-聚合酶链反应（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction RT-PCR)是一项有效的和广泛使用的研究工具，它可以用于多种应用，包括RNA检测、基因定量以及克隆。随着这项技术的逐渐普及，针对提高速度、方便性和多用途性的革新方案的需求，也变得越来越迫切。作为反转录的领先者，In ...

相关专题 摘要 RT－PCR 已经成为研究者确定感兴趣的器官、组织或细胞中mRNA 转录本出现、结构和表达水平的基本方法。RT－PCR的基本步骤包括：首先对样品中出现的所有mRNA 合成一个cDNA拷贝，接着扩增感兴趣的基因。因为两个步骤中使用的反应缓冲液不能兼容，所以这两个步骤（RT 和PCR）通常分别进行。即使有些试剂盒能将两个步骤 ...

相关专题 This protocol describes the detailed experimental procedure for real-time RT-PCR using SYBR Green I as mentioned in Xiaowei Wang and Brian Seed (2003) A PCR primer ban ...

相关专题 DNA PrepPrepare DNA via your favorite method. You may find a protocol underMini Yeast Genomic Prep.Restriction Digest1.Digest DNA with appropriate restriction enzyme. ...

相关专题 警示：在我们的手册中介绍的实验可能具有潜在的危险性，要求操作人员具有相当的安全训练、特殊装备、以及相关安全部门的监督。作为实验操作员的你承担全部的责任、义务和由于实施安全步骤和措施带来的危险。麻省理工大学没有责任、义务或承担由于实施本材料中内容所引起的危险xian o’brien 大公无私地为此测试，优化和作图黑体字表示的试剂列在方 ...

相关专题 Background on the art of getting beautiful Southerns:There are several things to consider. (1) Digesting enough DNA. (2) The DNA must be digested to completion; i.e. n ...

相关专题 PURPOSE: TolocateaparticularsequenceofDNAwithinacomplexmixture(locateonegenewithinanentiregenome) SeparatemixtureofDNAsequencesonagelprobewithspecificDNAsequence(gene) ...

相关专题 General Primer General Primer Design Guidelines Note the 5’-3’ direction of the contig. Locate primers 100 to 200 bp from the feature. Pick primer from ≥ 2x high qu ...

相关专题 (一) 鼠肝DNA的制备原理 DNA是储存遗传信息的物质，是遗传的物质基础，它与生命的正常活动如种厉遗传、生长发育有密切关系。其结构与功能的研究是当前分子生物学研究的主要内容之一。核酸广泛存在于生物中，DNA含有生物体的全部遗传信息，在生物组织中以核蛋白(DNP)形式存在。真核生物中，DNA主要存在于细胞核中，核外也有少量， ...

相关专题 实验原理 ：利用液氮对植物组织进行研磨，从而破碎细胞。细胞提取液中含有的SDS溶解膜蛋白而破坏细胞膜，使蛋白质变性而沉淀下来。EDTA抑制DNA酶的活性。再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白，得到的DNA溶液经乙醇沉淀。 实验材料：新鲜植物叶片 实验步骤：1.取4g新鲜叶片，在液氮中研磨成粉末状(越细越好)。 2.转移至50ml离心管 ...

相关专题 Semiquantitative RT-PCR analysis to assess the expression levels of multiple transcripts from the same sampleMaria Maronundefined Simona Mozzetti Daniela De Ritis Luca Pierel ...

相关专题 RT-PCR AnalysisSolutions10X RT Buffer10X PCR Buffer100 mM Tris pH 9.0500 mM KCl1% Triton X-10025 mM MgCl2use at a concentration of 1.5 mMLysis Solution4M GuSCN 250 g g ...

相关专题 从RNA到电泳鉴定 一、RT-PCR原理提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA 作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA 为模板，用VI 型胶原蛋白的α1 链的编码序列的特异性引物进行PCR 扩增，而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR 使RNA 检测的灵敏性提高了几个数量级， ...

相关专题 This method was submitted by Jim Hutchins from the University of Mississippi Medical Center. The following is a great RT-PCR protocol developed by Ignacio Rodriguez at ...

相关专题 For quantifying mRNA we use a competitive RT-PCR protocol with internal standard RNAs. These are added in a defined quantity to the RNA sample prior to the RT reaction ...

相关专题 Application: Quantitative RT-PCR is used to quantify mRNA in both relative and absolute terms. It can be applied for the quantification of mRNA expressed from endogeno ...

相关专题 【原理】 限制性显示 PCR 技术 (Restriction Display PCRRD-PCR) 技术的思路是在获得反转录的 cDNA 之后 进行 Sau 3AI 酶切? Sau 3AI 识别位点是四个碱基 理论上计算平均每 256 个碱基有一个识别位点 然后在酶切片段的两端加上通用接头?接头由 15bp 和 21 bp 长 ...

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