DNA标记

来源自：http://protein.dxy.cn/bbs/topic/17898080 当抗体孵育、TBST漂洗结束后，进入ECL显影步骤。当然，目前国内一些实验室已经换用仪器扫描荧光信号，而我们更是二抗直接连荧光蛋白连ECL和常规的底片显影都省略了，因此以下所讨论的某些细节问题可能不再出现。 首先坛子上还有少数实验室处于DAB显色时代，奉劝一句，都走到最后一步了就不要节省了；DAB显色的灵敏 ...

基因是DNA上具有遗传学效应的核苷酸顺序 基因的概念随着遗传学的发展与研究的深入，不断变换形式，扩大内涵，人们所知的基因种类也日益增多，可以说遗传学的发展史是对基因的认识史。 孟德尔在分离定律和自由组合定律中认为生物性状的遗传是由遗传因子决定的，这是最初的基因概念，但当时并不知道遗传因子的物质基础是什么，位于生物体的什么位置。1909年丹麦遗传学家约翰生(W.Johansen)提出 ...

基因的本质是一段有功能的DNA 一个基因是编码一条多肽链或功能RNA(tRNA、rRNA、snRNA等)所必需的全部核苷酸序列。决定性状表现的遗传物质――基因的本质是一段有功能的DNA(有时是RNA)，从以下实验得到证明。 1928年英国细菌学家格里费斯(Fred Griffith)利用肺炎双球菌(Streptococcus pneumoniae)的光滑型(有荚膜，毒性强，可引发肺 ...

免费分子生物学软件 互联网上有许多免费分子生物学软件，一些是在线使用的，也有一些可以下载在PC机上使用。(一)质粒作图软件(P1asmidProcessor) PlasmidProcessor是一种免费绘制质粒图软件，可以绘制线状或环状DNA。用户定义限制位点、基因段与多克隆位点，还可插入或删除DNA片段，支持剪贴板、打印和存盘功能。下载站点：http：//www.uku.fi/_k ...

四聚体染色技术【试剂与设备】（1）待检细胞：PBMC，脾细胞，淋巴结细胞或经过相应病毒感染细胞（注意其HLA-A型别）刺激形成的CTL细胞（2）FACS缓冲液（FB）：PBS+2%小牛血清+0.1%叠氮钠（3）2 X HLA-I/抗原肽四聚体：2倍使用浓度的HLA-I/抗原肽四聚体（4）1%多聚甲醛(PFA)的PBS（5）离心机（6）流式细胞分选仪（7）加样器、吸头等【操作步骤】（1）将待检细胞 ...

核酸疫苗接种方法 (1)注射法：医用注射器是最简单和最常用的接种工具。由于骨骼肌细胞并非唯一可以摄取DNA疫苗组分的，根据疫苗的性质特点也可选择其他途径的注射方式，如静脉注射、皮内注射、皮下注射、腹腔注射等。 (2)“无针头”注射导人系统：“无针头”注射装置是一种强力喷射系统，即在高压下使接种物形成细流喷射而出，可穿越组织和细胞。当DNA从该装置中喷出时，DNA在高压下可能发生断裂 ...

Feulgen反应步骤 标本需经固定后方可染色，Carnoy固定液可按无水乙醇：三氯甲烷：冰醋酸为6：3：1比例配制。固定后石蜡切片即可。尽量不用新鲜组织恒冷箱切片，因胞质中存在的缩醛磷脂会出现非特异染色。若必须使用恒冷箱切片，需做切片后固定。用已固定的组织石蜡切片可消除缩醛磷脂。减少非特异染色，具体操作如下： 1．切片脱蜡入水； 2．用lmol／L HCl浸洗； 3．切 ...

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讲述内容：核酸电泳、杂交技术、PCR技术、基因芯片

干细胞都可以进行多次分裂增殖（自生），并产生多种分化程度更高的子细胞。成体干细胞在各种成体组织的自生和修复中都发挥着不可替代的作用，比如骨髓中的造血干细胞可以通过分化产生各种血细胞，包括红细胞、巨核细胞、血小板以及多种淋巴细胞。成体组织的干细胞只能分化成某一系列的特定细胞，而早期的胚胎干细胞却具有全能性，也就是说，它们可以分化产生生物体中所有类型的细胞。因此，也许能使用囊胚时期的胚胎干细胞产生一个活体哺乳动物的想法让科学家们为之兴奋并努力了许多年。

一、如何获取已知目的基因的序列信息 先查找其蛋白相关信息了解该基因编码产物的基本情况与功能（www.expasy.org） 进一步查找其核酸相关序列信息，常用数据库：Genebank、EBI、DDBJ 二、目的基因cDNA序列的获取方法 cDNA文库扫描 RT-PCR 人工合成 组织RNA的提取 -在匀浆器中加工冷冻的组织 -通过注射器加工冷冻的组织 -在 ...

实验目的了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义；学习外源DNA转化入受体菌细胞并筛选转化子的方法。实验原理转化（transformation）是将异源DNA分子导入另一细胞品系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段。其原理是细菌处于0℃， CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面，经42℃短时间热击处理，促进细胞吸收DNA ...

物种的遗传多样性在本质上是DNA 一级序列的多样性。近年来，随着DNA 测序技术的迅速发展和日益普及，DNA 测序在遗传多样性的研究中正在起着越来越大的作用。本章将介绍目前在遗传多样性研究中常用的一种手动和一种全自动双链DNA 测序方法。1 DNA 模板的制备在遗传多样性的研究中，由于样本量一般都较庞大，因而DNA 测序的速度就成了很关键的因素。因此，这类研究中常常直接测定纯化的PCR 双链产物而 ...

1. 实验目的和要求通过本实验学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞和外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术以及筛选转化体的技术。了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。 ...

将外源基因通过体外重组后导入受体细胞，使该基因能在受体细胞内复制、转录、翻译和表达，整个操作称为基因重组技术。要实施该技术必须具备四大要素：工具酶、载体、基因和受体（宿主）细胞。

质粒DNA的提纯是基因工程实验中最常用的试验方法之一，质粒DNA提纯效率和质量与其后续实验步骤（如PCR扩增、酶切、连接、转化大肠杆菌和转染真核细胞等）的成功与否有着直接的关系，因此高效快速地从细菌细胞中提纯质粒DNA 具有重要的意义，本文主要介绍了由QIAGEN plasmid Midi试剂盒方法提取质粒的方法。

掌握DNA重组技术的基本原理和基本方法和熟悉质粒DNA的小量制备及酶切鉴定方法

本方法的核心部分是医科院基础所的生化脂蛋白组的吴刚老师所创，我在其基础上进行了一些改动，主要是DNA回收上采取了更简单的方法。（本方法最适用于双酶切制作片断并进行克隆 的情况。对于分步酶切制作片断，也可以使用本方法，但需要加倍起始酶切DNA的量。）

真核细胞的mRNA在加工过程中有一个比喻为“穿鞋戴帽”的过程，因此mRNA的3'末端都带有一段Poly A，这是利用逆转录酶制备cDNA文库的基础。但是由于cDNA的5'端的序列各不相同，如何获得全长的cDNA，如何扩增由微量的mRNA逆转录得到的cDNA文库、如何利用已知片断序列得到全长的cDNA（即RACE），曾经是一个令人困扰的问题。

I have read some books but cannot find the answer.I think NaAc may increase the ionic strength to stabilize DNA duplexes.Is it right?