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抗原设计

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免疫球蛋白的类型

双重特性: 抗体活性 免疫原性(抗原物质) 抗体的异质性:指抗体中免疫球蛋白的不均一性 表现为: (1)抗体有多种多样的抗原特异性(不同的抗原/不同的抗体) (2)免疫球蛋白本身也是抗原,有不同的抗原决定簇可以诱导产生抗体(分三类) 一.同种型(isotype) 同一种属每个个体都具有的免疫球蛋白的抗原特异性,其抗原决定簇主要存在于Ig的C区。即种属相同性 1.类和亚类(根据H链的抗原性 ...

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构成抗原的条件

一. 影响免疫原性的因素(免疫原性基础) (一)抗原因素: 1.分子量:一般是分子量越大,免疫原性越强。 2.化学组成及结构: 蛋白质: A.氨基酸组成 --- 含芳香族氨基酸(特别是酪氨酸),免疫原性强; B.结构:环状,免疫原性强;直链,免疫原性弱。 多糖:具有免疫原性 较蛋白质弱。 核酸:多无免疫原性。 3.可降解性: 含L-氨基酸的蛋白质易降解,具有免疫原性。 含D-氨基酸的聚合体不易 ...

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医学上重要的抗原

一. 病原微生物: 1.细菌性抗原:细胞壁:蛋白质、脂多糖等。 鞭毛:蛋白质 菌毛:蛋白质 夹膜:多糖 2.病毒性抗原: 衣壳:蛋白 包膜:糖蛋白 3.其它:立克次体、螺旋体、真菌等。 二.细菌的外毒素与类毒素 外毒素:细菌分泌的毒性蛋白质。 类毒素:经0.3%~0.4%甲醛处理过的失去毒性保留免疫原性的外毒素。 三.异种动物血清 异种动物的血清蛋白对人具有免疫原性。如:抗毒素血清(马血清) ...

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抗原的类型

一.根据抗原性质: 完全抗原(complete antigen):具有免疫原性和抗原性的物质,如:蛋白质、细菌、病毒等。 半抗原(hapten,或不完全抗原incomplete antigen):无免疫原性,只有抗原性的物质,如:多为某些简单的小分子物质。 载体(carrier):赋予半抗原以免疫原性的蛋白质。半抗原 + 蛋白质 à 完全抗原 二.根据抗原刺激B细胞产生抗体是否需 ...

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抗原的基本概念和特性

抗原(Antigen,Ag)是一种物质,能够刺激机体产生免疫应答,能与免疫应答产物特异性结合免疫应答产物(抗体或免疫效应细胞);凡能诱导免疫系统发生免疫应答,并能与其产生的抗体或效应细胞在体内或体外发生特异性反应的物质。 Antigen: (Ag) something that stimulates an immune response~ 10 amino acids long i ...

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免疫系统的功能

免疫功能是免疫系统在识别和清除“非己”抗原的过程中所产生的各种生物学作用的总称。 主要以下三大功能包括: 1.免疫防御(Immunological defence) 是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。正常时可产生抗感染免疫的作用,防御功能过强会产生超敏反应,过弱则产生免疫缺陷(后两种情况均属异常反应)。 2.免疫自稳(immunological homeosta ...

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抗血清的制备

有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。 (一)用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因动物反应良好,而且能够提供足够数量的血清,用于免疫的动物应 ...

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杂交瘤的克隆化 :软琼脂培养法

杂交瘤克隆化一般是指将抗体阳性孔进行克隆化。因为经过HAT筛选后的杂交瘤克隆不能保证一个孔内只有一个克隆。在实际工作中,可能会有数个甚至更多的克隆,可能包括抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、所需要的抗体(特异性抗体)分泌细胞和其它无关抗体的分泌细胞。要想将这些细胞彼此分开就需要克隆化。克隆化的原则是,对于检测抗体阳性的杂交克隆尽早进行克隆化,否则抗体分泌的细胞会被抗体非分泌的细胞所抑制 ...

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杂交瘤的克隆化:有限稀释法

杂交瘤克隆化一般是指将抗体阳性孔进行克隆化。因为经过HAT筛选后的杂交瘤克隆不能保证一个孔内只有一个克隆。在实际工作中,可能会有数个甚至更多的克隆,可能包括抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、所需要的抗体(特异性抗体)分泌细胞和其它无关抗体的分泌细胞。要想将这些细胞彼此分开就需要克隆化。克隆化的原则是,对于检测抗体阳性的杂交克隆尽早进行克隆化,否则抗体分泌的细胞会被抗体非分泌的细胞所抑制,因为抗体非分 ...

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ELISA的概念、原理、操作步骤

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很 ...

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Elisopt(酶联免疫斑点法)

随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用,使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,而不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。80年代,国外的科研工作者根据ELISA技术的基本原理,建立了体外检测特异 ...

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血清学筛选克隆新抗原/新基因

一、E.coli/phage 裂解液预吸附血清 1. 将E.coli /phage lysate 以1:10-20 稀释在TBST 溶液中。 2. 将4 张82mm 的nitrocellulose membranes(NC)浸入稀释后的E.coli/ phagelysate 中,室温下水平摇动30 分钟,取出NC 并使膜沥干。 3. 用50ml TBST ...

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检测抗DNA(ssDNA和dsDNA)抗体知识问答

1957年Ceppelini等首次报道了系统性红斑狼疮(SLE)患者的血清成分可与DNA发生反应,随后建立了几种定性和定量检测抗DNA抗体的方法。随着研究的不断深入,发现定量检测IgG型抗DNA抗体对SLE更具诊疗参考价值。在SLE患者的血清中存在三种类型的抗DNA抗体,其中的抗dsDNA和抗ssDNA最常见也最常用。本文以问与答的形式围绕两种抗体的应用向读者逐一介绍。问:抗ssDNA抗体存在于多 ...

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影响制备高效价专一性抗血清的主要因素

1. 抗原本身的有关性质:抗原刺激免疫动物产生抗体的能力,是否使用佐剂,注射途径及注射间隔时间等。2. 抗原必须纯化:对于免疫用的抗原,成分必须均一,除了作为免疫原的抗原物质外,不能含有可激发机体产生其它抗体的物质。在制备病毒抗血清时,必须去除寄主蛋白成分;假若这种材料是互不相同的病毒复合感染的,还必须将这些互不相同的病毒一一分离。只有制备了具有一定浓度的纯化的抗原,才能制备出高效价的专业性抗血清 ...

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美发现能识别多种流感病毒的广谱抗体

美国科学家在8月8日出版的《美国国家科学院院刊》上撰文指出,他们最新发现了一种能识别30多种流感病毒菌株的人类广谱抗体,更多地了解这种抗体有助于科学家研制出长期有效的流感疫苗。 波士顿儿童医院的斯蒂芬·哈里森和同事在一名男性志愿者体内发现了这种名为CH65的中和抗体,其能黏附在流感病毒表面的血细胞凝集素蛋白质上,从而中和流感病毒的毒性,阻止病毒入侵人体细胞。 血细胞凝集素是流感病毒 ...

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预防性丙肝疫苗新突破

法国科学家在美国最新一期《科学转化医学》杂志上报告说,他们开发出一种能预防丙型肝炎的疫苗,动物实验显示这种疫苗有效。 目前世界上通用的丙肝疫苗都属于治疗性疫苗,还没有疫苗能起到预防丙肝的作用。与甲肝和乙肝不同,大多数人无法依靠自身的免疫系统清除丙肝病毒,这是因为丙肝病毒在受到人体免疫系统攻击后,会转为更强大的变种。 法国巴黎第六大学的科学家利用类病毒颗粒开发出一种丙肝疫苗。类病毒颗粒和病毒相似, ...

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浅析影响胎牛血清质量的几大因素

市场上的胎牛血清种类繁多,鱼龙混杂,很多科研工作者,特别是刚接触细胞培养的人,难以分辨血清质量的优劣。本人根据十多年来血清生产销售的经验,总结如下: 一、外观 拿到血清,最先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要 1、颜色 根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响, ...

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Western Blot抗体杂交

孵育一抗 A. 先将需要检测的抗体准备好,并决定好它们的稀释度。 B. 配好5%的Milk(TBST溶解),按要求稀释好抗体。注意,如需高比例稀释, 最好采用梯度稀释。 C. 将稀释好的抗体和膜一起孵育。 一般采用RT 1小时,可根据抗体量和膜上 抗原量适当延长或缩短时间。 注意:为了便于后面分析结果,我们一般会选用已确定分子量大小而且纯度高的抗体作为marker与一抗同时孵育。 洗涤 用 TB ...

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抗体孵育:一种抗体一个脾气

来源自:http://protein.dxy.cn/bbs/topic/17898080 --WB真正的难点:抗体的使用是一种艺术,一种抗体一个脾气。 对WB结果有决定性影响的因素是抗体的效价和如果正确使用手中的抗体。无论你如何提高自己的转膜技术,高效和低效之间往往只有数倍的差异,而抗体的效价可以差数千倍以上;同样,正确使用抗体可以保证抗体效价不被过分的拮抗,谋求特异性和非特异性背景之间差异的最 ...

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二抗如何选择-论一抗与二抗种属及类型区别

二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般来说,选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑: 【一抗的种属来源】 二抗应选用与使用的一抗相同的物种 ...

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