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抗原设计

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免疫学实验室实验须知

相关专题 一.实验课的目的要求 免疫学实验课的目的是加强和巩固对课堂讲授的基本理论的理解和体会,学习和掌握免疫学实验的基本操作技术。为今后的实际工作和科研工作打下基础。为上好免疫学实验课,要求同学做到如下各点: 1.课前务必做好充分预习,明确实验目的、原理、方法及操作中的注意事项,做到心中有数。 2.在实验进程中,严格按照实验指导所列步骤和要 ...

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T、B淋巴细胞分离试验

相关专题 淋巴细胞主要分T淋巴细胞和B淋巴细胞两大亚群,它们具有不同的特性和功能,为此在进行某些免疫学实验时,首先需分离出纯的T淋巴细胞和B淋巴细胞。本试验的原理为:淋巴细胞与用溴花二氨基异硫氢化物(简称AET)处理的绵羊红细胞(SRBC)混合后,其中全部T淋巴细胞均能吸附AET—SRBC,形成牢固稳定而巨大的E—花环,较正常未处理的SRBC ...

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50%溶血试验(CH50)测定补体实验

相关专题 50%溶血试验即求得能使50%致敏羊红细胞发生溶血的最小量血清,然后计算出每毫升血清中补体含量。以补体量作为横坐标,溶血百分数作为纵坐标,可得到一个清晰的“S”形曲线。在50%溶血周围,线段近似一条直线。因此当补体用量稍有变动,就可对溶血程度发生很大影响。所以用50%溶血作为终点要比100%溶血更为敏感。50%溶血试验定血清中补体含 ...

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豚鼠T淋巴细胞的测定

相关专题 玫瑰花环试验,又称为花结试验。是测定淋巴细胞数量和功能的一种方法。 人类T和B淋巴细胞表面具有不同的受体。由于人类T淋巴细胞表面具有与绵羊红细胞结合的受体,能与绵羊红细胞非特异性结合,形成E花环,因此,T细胞也成为红细胞花瓣形成细胞。根据E—玫瑰花环形成率,可以间接判断机体细胞免疫力。目前,已广泛应用于临床,作为测定人群免疫状态的一 ...

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与免疫相关的细胞形态的观察

相关专题 目的要求: 观察与免疫相关的几种细胞的形态,了解它们在机体免疫反应中的作用。 实验器材: 显微镜 血液涂片(瑞氏染色) 结缔组织切片 方法: 油镜观察 一.血涂片的观察 (A) 红细胞:淡红色,无核的圆形细胞,因红血球为双凹形,故边缘部分染色较深,中心较浅,直径7—8微米。 (B) 颗粒白血球 嗜中性颗粒白血球:体积略大 ...

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机体的天然免疫机制

相关专题 目的要求: 观察机体的非特异免疫现象;加深理解机体的天然免疫机制。 基本原理: 机体的天然免疫机制是通过机体在种族进行过程中由于不断与病原微生物进行斗争而建立起来的。这种天然获得的免疫性首先表现在种的免疫上,如不同种动物对某些感染具有先天的抵抗力。 机体的天然免疫机构对消灭侵入的微生物具有重要的作用。如皮肤与黏膜是抵抗外来侵害的第一 ...

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沉淀反应(Precipitation)实验

相关专题 可溶性抗原与相应的抗体混合,在电解质存在的条件下,两者比例适合,即可有沉淀物出现,叫沉淀反应(Precipitation).由于沉淀反应抗原多系胶体溶液。沉淀物主要是由抗体蛋白所组成。 为了求得抗原与抗体的适宜比例,保证有足够的抗体,而且抗原分子小,具有较大的反应面积,因此操作上通常是稀释抗原,不稀释抗体。 沉淀反应的种类有环状沉淀 ...

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凝集反应(agglutination reaction)实验

相关专题 当颗粒性抗原与其相应抗血清混合时,在有一定浓度的电解质环境中,抗原凝集成大小不等的凝集块,叫做凝集反应。 凝集反应广泛地应用于疾病的诊断和各种抗原性质的分析。即可用已知免疫血清来检查未知抗原,亦可用已知抗原检测特异性抗体。 一.直接凝集反应 颗粒抗原与抗体直接结合出现凝集现象叫直接凝集反应。 (一)玻片凝集反应 材料: 1.诊断血清 ...

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溶血反应与补体结合试验

相关专题 一.溶血反应 免疫血清与其相应的抗原细胞(血球、细菌及其组织细胞相遇,并在补体的参与下可出现溶细胞反应。依抗原、抗体的种类不同可有溶血反应、溶菌反应等。 溶菌反应只在某些细菌中出现(如霍乱弧菌)。应用溶血反应是补体结合反应中不可少的因素。溶血反应是由于抗原(红血球)和抗体(溶血素)进行特异性的结合,并吸着了补体,而使红血球在补体的作 ...

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免疫学检验室内质量控制的标准操作程序

相关专题 【目的】保证ELISA 检测结果准确可靠 充分发挥其方法学的优点。【该SOP 变动程序】本标准操作程序的变动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。【方法】【分析前质控】1. 人员培训实验是人操作的,因此检验人员需经过培训,熟练掌握本专业如下几方面的技术知识: ...

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免疫学检验室间质量评价的标准操作程序(EQA)

相关专题 【目的】采用一系列的办法连续地、客观地评价各实验室的试验结果,并发现室内质控不易发现的不准确性,了解各实验室之间结果的差异,并帮助校正,使具有可比性。。【该SOP 变动程序】本标准操作程序的变动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。【质量控制】是监视ELISA 操作全过程,排除误差,维持标 ...

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免疫金标记检测方法标准操作程序

相关专题 【目的】保证免疫金标技术检验准确性【本SOP 适用范围】免疫金标技术【该SOP 变动程序】本标准操作程序的变动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。【原理】氯化金分子在还原剂作用下聚合形成金颗粒,颗粒与颗粒之间因静电作用而相互排斥,使其保持一个比较稳定的胶体状态,故称作胶体金。利用胶体金颗 ...

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杂交瘤细胞的制备

相关专题 1) 瘤细胞培养(无特殊要求) 骨髓瘤细胞呈悬浮或轻微附着形式生长,如附着性生长的细胞多时,用吸管轻轻吹打或轻轻叩击培养容器即可分离下来。通常要维持细胞于指数生长期(细胞培养时间为15~20小时),每3~5天取细胞0.2~1ml移入到10ml新培养液中,其最大细胞密度不能超过5×105~106/ml。一般使用含有高糖的DMEM培养 ...

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Polyclonal and Monoclonal Antibodies(克隆和克隆抗体)

相关专题 Adaped from David Bowtell (bowtell@ariel.ucs.unimelb.edu.au)Polyclonal AntibodyImmunization of Mice:Injections should be made at intervals of at least two weeks.. We h ...

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免疫组织化学技术(immunohistochemistry)

相关专题 由于免疫组织化学技术具有特异性强、灵敏度高及能将形态研究与功能、代谢研究有机地结合在一起的显著特点,所以,这门新技术从一诞生起就显示出了强大的生命力和广阔的应用前景。此方法经不断改进和发展已日趋成熟,应用范围逐渐扩大。目前已有近十种技术方法及几百种标记抗体,技术方法逐步规范化,标记抗体逐步商品化,现今它已被广泛地应用于生物学和医学研 ...

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Expanding Hybridoma(杂交瘤细胞) Clones

相关专题 Borrowed from David Bowtell (bowtell@ariel.ucs.unimelb.edu.au)Transfer the srongest positive clones to a 24 well plate by scraping the adhering Cells with a truncated ...

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免疫酶技术

相关专题 1原理:免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),它是使抗原或抗体吸附于固相载体,使 ...

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制备单克隆抗体的技术要点

相关专题 1.交瘤技术的技术流程如图4-1所示。图4 杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本流程2. 技术要点  1) 免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。  2) 骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选 ...

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免疫印迹法(immunobiotting test,IBT)

相关专题 次与特异性抗体和酶标第二抗体作用后,加入能形成不溶性显色物的酶反应底物,使区带染色。常用的HRP底物为3,3’-二氨基联苯胺(呈棕色)和4-氯-1-萘酚(呈蓝紫色)。阳性反应的条带清晰可辨,并可根据SDS-PAGE时加入的分子量标准,确定各组分的分子量。本法综合了SDS-PAGE的高分辨力和ELISA法的高特异性和敏感性,是一个有效 ...

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E玫瑰花环形成试验(E Rosette Test)

相关专题 【原理】 正常人外周血中T细胞在体外能直接和绵羊红细胞(SRBC)结合形成玫瑰花样细胞团,这是因为人的T细胞膜具有能和SRBC膜上的糖蛋白相结合的受体,称为E受体。已证实E受体是人T细胞所特有的表面标志,也是T细胞的常用方法之一。 【材料】 肝素抗凝人外周血1ml 淋巴细胞分层液(见附录)2ml 0.5%SRBC:悬液将脱纤维的绵羊 ...

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