染色体免疫共沉淀（chip）

The ChIP (chromatin immunoprecipitation) method has emerged as a very powerful tool to study in vivo protein-DNA interactions. It has been applied to the dynamics of chromatin structure regulation by ...

染色质免疫沉淀法（Chromatin immunoprecitation，ChIP）是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况，还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰，如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等，这些共价修饰与真核基因的表达密切相关。根据“组蛋白密码”假说，组蛋白的各种共价修饰的组合会以协同或拮抗的 ...

非放射性凝胶迁移试剂盒（EMSA）操作手册 ...

原理：此技术建立于PCR基础之上，使用一系列具有10个左右碱基的单链随机引物，对基因组的DNA全部进行PCR扩增，以检测多态性。由于整个基因组存在众多反向重复序列，因此须对每一随机引物单独进行PCR。单一引物与反向重复序列结合。使重复序列之间的区域得以扩增。引物结合位点DNA序列的改变以及两扩增位点之间DNA碱基的缺失、插入或置换均可导致扩增片段数目和长度的差异，经聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳分离后 ...

H. Simmler and H. SingpielAcconovis GmbHLindenhofstr. 42-4468163 Mannheim GermanyeMail: simmler@acconovis.comR. M¨annerUniversit¨at MannheimB6 23-2968131 Mannheim Germanymaenner@ti.uni-mannheim.deAbst ...

1.加入solution.III，经10分钟离心后细菌沉淀怎么不结实，有的漂浮在液面，有的贴在离心管壁上，一摇晃即破碎脱落下来？细菌的用量太少，导致产生的沉淀主要是盐分的沉淀，因为缺少变性的细菌蛋白和细菌基因组DNA的缠绕，沉淀就显得不结实。解决方法：将细菌的用量增加。2.加入soln.III，经10分钟离心后细菌沉淀怎么不结实，呈大块的水泡状，上清较少？（1）使用了过多的细菌，导致菌体未被有 ...

BioGene-ExpuzeTMDNA 10分钟快速提取试剂盒中文说明书从全血样本提取DNA的操作规程1、在离心管中加入900 µl的溶液 1及250-300 µl的全血，振荡30秒。2、离心（9000 rpm，1分钟），倒掉上清液。3、先至少振荡30秒，以打破Pellet。4、加入400 µl 溶液2，振荡20秒使Pellet完全溶解（在光线下溶液应清亮透明） ...

3 植物总DNA 的提取 1976 年，Millgan 用Blin 和Stafford 描述的方法分离了植物DNA，然而这些DNA 是不能用于克隆的。在发明了去除植物DNA 上污染物的方法之后，人们可用分离动物组织DNA 的方法分离植物DNA。去除植物带电高分子污染物的方法有核分离（Bickle 等1977）。CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）分离（Murray，Thompson 1980）和 ...

一、试剂：TNE ：10mmol/L Tris cL (ph 8.0)100 mmol/L NaCl 1 mmol/L EDTA 10%的SDS酚、氯仿、乙醇二、操作步骤：（1）收集鼠卵细胞，PBS 漂洗3次；（2）将细胞悬浮于500 ul的TNE缓冲液中；（3）加入6 ul20mg/ml蛋白酶K和50ul10%SDS，轻缓摇动；（4）37℃保存1-4小时；（5）加入等体积250ul饱和酚和氯仿， ...

　　近10年来，现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域，为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为，人类基因组并非人们想像的那样稳定，诸如基因重排、扩增、缺失，突变和DNA甲基化类型改变等时有发生，这些改变对于基因表达和调控，以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。　　医院病理科档案中积存的大量石蜡包埋组织，是一个可靠的分子生物学研究的材料来源。在石蜡切片上进 ...

本方法通过SDS裂解细胞，蛋白酶降解蛋白，CTAB去除多糖成分一：仪器：同方法一 二：试剂：TE、TAE缓冲液；10%SDS；５ＭNaCL；20mg/ml蛋白酶Ｋ；CTAB/NaCL溶液(10% CTAB，0.7M NaCL 4.1gNaCL 溶于80ml水中，缓慢加入10gCTAB，加热溶解)；25/24/1酚/氯仿/异戊醇; 24/1氯仿/异戊醇；异丙醇；70%及100%乙醇三：操作 1. ...

This protocol is essentially as described by Murray (1991) Cell Cycle Extracts. In Methods in Cell Biology B.K. Kay and B. Peng eds. (San Diego: Academic Press) pp. 581-605. I've included a protocol w ...

grow plants in trays of 96 and leave two spots open (for the PCR controls) harvest 1 to 2 young and green leaves (1cm2/plant at rosette stage if possible). Use 96 well plates (1 or 2 ml E&K polypr ...

Isolation of High Molecular Weight DNA from Yeast For each sample grow 5 ml yeast culture to saturation in YEPD. Pellet cells by spinning at ~2 K for 5 min. in tabletop clinical centrifuge. (Us ...

　　定位克隆（positoinal cloning），又称图位克隆（map-based clonig），1986年首先由剑桥大学的Alan Coulson提出。用该方法分离基因是根据功能基因在基因组中都有相对较稳定的基因座，在利用分离群体的遗传连锁分析或染色体异常将基因伫到染色体的1个具体位置的基础上，通过构建高密度的分子连锁图，找到与目的基因紧密连锁的分子标记，不断缩小候选区域进而克隆该基因，并 ...

1、基本原理所谓平衡饱和，是指抗原和抗体反应达到再不结合，也不解离的平衡状态，称为饱和状态，即平衡饱和。所以，有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。 2、加样程序一般先加标准物或被测样品，再加抗血清，最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合，提高抗原的竞争抑制能力。 在小分子半抗原的放射免疫分析中，标记抗原和未标记抗原与抗体结合的亲合力常常是 ...