染色体免疫共沉淀（chip）

为了使高效气相色谱仪氮磷检测器保持性能最优，预防损坏和出现事故，使用中需注意以下四方面事项：一、电离源的维护：1、电离源老化时，切勿将色谱柱连至检测器。可将色谱柱卸下后用螺丝将检测器入口密封，通氢气和空气老化。2、开加热电源后，应逐渐升高加热电流，切勿突然用大电流加热电离源。3、只要氢气流速能满足灵敏度等分析要求，应尽量用低氢气流速，以延长电离源寿命。4、关电加热前，务必先将加热旋钮退回至不加热状态，然后关电源。以防下 ...

化验室分析色谱仪种类有多种。1、按流动相物理状态可分：气相化验室分析色谱仪和液相化验室分析色谱仪。2、按固定相和流动相的极性大小可分：正相化验室分析色谱仪和反相化验室分析色谱仪。3、按色谱柱控温方式可分：恒温化验室分析色谱仪和程序升温化验室分析色谱仪。4、按分离对象的离子性质可分：阴离子化验室分析色谱仪和阳离子化验室分析色谱仪。5、按检测器属性可分：质量型检测器化验室分析色谱仪和浓度型检测器化验室分析色谱仪。6、 ...

高效气相色谱仪氮磷检测器检测条件的选择包括加热电流、载气流速、氢气流速和空气流速等选择。一、加热电流：基流和响应值均随加热电流的增加而增大。实际操作时，可用基流为标记来调节加热电流的大小。调节基流的原则是在达到检测下限的前提下，宁小勿大。如已满足分析要求，仍加大加热电流，即使检测下限还可下降，但已意义不大。相反，会缩短电离源的寿命。低基流使电离源寿命长，但过低可能造成溶剂猝灭。一般设定基流后 20～60 min，基线即稳定。二 ...

反相离子键合相色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分：实验室反相离子键合相色谱仪和工业反相离子键合相色谱仪。2、按使用范围可分：专用型反相离子键合相色谱仪和普通型反相离子键合相色谱仪。3、按分离规模可分：小型反相离子键合相色谱仪和大型反相离子键合相色谱仪。4、按作用可分：反相离子键合相定量色谱仪和反相离子键合相定性色谱仪。5、按结构可分：台式反相离子键合相色谱仪和落地式反相离子键合相色谱仪。6、按洗脱方式可分：反相离 ...

高效气相色谱仪氮磷检测器的主要缺点是随着使用时间增长，性能变差，最后响应极小，必须换新电离源。为了达到要求的响应值，可提高 NPD 加热电流，但使用一段时间后，响应值又逐渐降低，须再提高其加热电流，如此多次提高加热电流，以保持 NPD 的正常工作。响应值下降的一般规律是：使用初期下降速度快，后期下降速度慢。所以，为了避免换新电离源后基线漂移太大，通常在使用前要预老化。通常电离源的使用寿命在 1000 h 左右，陶瓷电离源寿命可达 2000 h 以上。电离 ...

高效气相色谱仪的氮磷检测器（NPD）又称热离子检测器、热离子发射检测器和碱火焰电离检测器等，对氮、磷化合物的检测灵敏度高，选择性强，线性范围宽。目前已成为测定含氮化合物最理想的气相色谱检测器，对含磷化合物的灵敏度也高于FPD。一、结构：NPD与FID结构相似，两者的差异是NPD在喷口与收集极之间有一个电离源。二、工作原理：NPD主要利用以下三个条件达到检测目的。1、氢火焰：氢火焰为有机物分子燃烧和碱盐的蒸发、化学离解 ...

高效液相色谱仪化学键合固定相的制备包括硅胶预处理、试剂与溶剂预处理、衍生化反应和端基封尾等。一、硅胶预处理：1、酸处理：用0.1mol/L的盐酸在90℃下浸泡24h，或以10%的盐酸在回流状态处理8h。2、中和：水洗至无Clˉ，经酸处理后的硅胶表面的羟基浓度已达到理论值8μmol/m2左右。3、干燥：在200℃以下真空烘干除去物理吸附水，注意不得超过200℃，否则，硅醇基会脱水形成硅氧烷。二、试剂与溶剂预处理：1、硅烷化试剂 ...

高效液相色谱仪化学键合固定相是利用化学反应将有机分子键合到载体表面上，形成均一、牢固的单分子液膜。一、化学键合固定相的类型：1、按化学键合固定相的表面结构可分：单分子化学键合固定相和聚合化学键合固定相。2、按键合有机硅烷的官能团可分：极性化学键合固定相、非极性化学键合固定相和离子交换化学键合固定相。二、化学键合固定相的优点：1、与液液分配色谱相比，使用过程中固定相不流失，耐溶剂冲洗。2、与液固吸附色谱相比，消除了载体 ...

多少人因为一句“21 世纪是生命科学的世纪”而进入这个领域。不管您在这条漫漫科研路上的感悟如何，生物学是 21 世纪最活跃的学科已然是不争的事实。竞争激烈也是不可否认的现状。现在发好文章不仅要好的idea，领先的技术，更需要得心应手的好工具。所谓工欲善其事必先利其器，今天为大家介绍德国 ibidi 的 ibipore （ 图 1）,一款可用于实时观察流动、剪切力条件下的细胞侵袭、迁移以及细胞相互作用的可视化的“ transwell ”，更多应用见 图 2。图 1. ibip ...

cindyly267 最近在构建一个克隆，两个多月了都还没成功。具体情况如下：使用的是promega公司的Halotag载体，约3900kb。片段约500kb。酶切位点是SgfI 和 BamHI。之前用别人连了片段的载体酶切后再做载体的，无论怎么切都是自连。这次使用了公司的原始载体（带致死基因），片段也是从T载上切下来的，所以感觉载体和片段都切的没问题了，结果一个都没长（可能有自连的但是死了）。引物，酶切位点什么的都检查过了没 ...

hust_ggjj 第一次1%的胶，跑的图感觉不太好，所以换成0.7%的跑我觉得是dna没有提好，所以重提了一次，1%的胶第一次提dna,不知道经验，请高人指点，能不能去做pcr试试，可能是什么原因没有提出来，我的样品放在-80时间不长。。。skyhater 总dna电泳？什么目的？skyhater 这样的电泳无目的哇，p试试是可以的本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙 ...

麦宝 老师有布置作业说要找一个简单DNA分子的酶切位点，要举个实例，请问怎么找啊....月中雨 DNAstar和PRIMER相关软件说明书说明很详细！！！yxx44 1、直接在网上分析，如neb公司的网络工具nebcutter,网址如下：http://tools.neb.com/NEBcutter2/打开网站，输入序列，提交,ok可以根据自己的需要选择结果显示2、直接用软件分析，如：DNAstart,primer 5,vector NTI等等3 ...

cpumxl 我现在想让公司帮我全合成所要表达蛋白的核酸序列，这个序列是在NCBI中找到的mRNA序列中的CDS区（不知道这样做可不可以），合成的序列要在大肠杆菌中表达，那么这个CDS区中的核酸序列要不要先优化成大肠杆菌偏爱性密码子再去合成啊？谢谢！qing0831 jiawo qq2582634920济南基美 最好要优化。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙 ...

keimon 要对MUT基因缺失的病进行检查，检测对象是个携带者，怀疑是大片段DNA缺失，求大片段外显子缺失的检查方法？ :Dwoxingwosu 呵呵，虽然不熟悉，我也来说说看法。是否可以通过PCR基因组来判断呢？设计一对引物，其中一个引物要在这个大片段上面，然后从对象提取基因组，做PCR，再与正常的基因组比较得到差异？或者是通过提RNA,RT-PCR,最后在用这一对引物去检测与正常的差别？或者干脆做western来检测蛋 ...

mijiagaga 有郁闷问题想请教各位大侠：我做免疫共沉淀，从细胞中提取内源性表达的蛋白，按照常规方法做，可是最后银染总是没有条带？多谢多谢！woxingwosu 有几个问题需要确认一下：1. 你做免疫共沉淀（IP）的抗体是否可以用。WEstern能识别的抗体不一定能用在IP。2. 内源性蛋白的表达量。需要先确认一下这个蛋白的表达量，如果这个蛋白本来表达量就很低，那么做IP的难度就很大，这时候需要考虑过量表达这个蛋白了。或者需要 ...

三叶虫 大家好，由于我的基础不太扎实，希望各位战友能告诉我，这种是什么实验方法。简单说明其过程。1，transgenic mice that overexpress Runx2 under the control of a 2.3-kb mouse Col1a1 promoter。2，In dn-Runx2 transgenic mice under the control of the same2.3-kb mouse Col1a1 promoter。问题一，是上面是通过什么方法进行基因改造的，望战友简单说说其过 ...

zjhua 请问，找到一个基因，其蛋白定位在线粒体膜上。如果要进一步研究其功能，有哪些实验方法？谢谢了！iscience 线粒体是细胞进行呼吸的主要场所，在细胞代谢旺盛的需能部位比较集中，其主要功能是进行氧化磷酸化，合成ATP，为细胞生命活动提供直接能量. 催化三羧酸循环、氨基酸代谢、脂肪酸分解、电子传递、能量转换、DNA复制和RNA合成等过程所需要的一百多种酶和辅酶都分布在线粒体中. 这些酶和辅酶的主要功能是参加三羧酸循环中的 ...

gaohuairen 我做的原核生物 细菌。既然是原核基因，老板让我做真核表达，这还有什么意义？我一直想不明白原核基因做真核表达的意义何在，在此请教各位freecell 这个你应该问你老板。gaohuairen 我就是觉得老板他的想法可能有问题，老板是性情中人，一激动了，就让我这么做freecell wrote:激动和科学是两码事。顶着领导或者导师的帽子，就得承担那个责任。goooooodboy 你做的是什么细菌的基因？有的细菌致病是 ...

在Lateral Flow Diagnostic这个领域内,感觉大家的思路太窄了,给出一点新的思路大家参考,主要是用这个模型来测DNA和化学发光等东西.抛砖勾引玉:) 希望对于这个模型的应用有更多新的思路产生.FROM IVD.Present and future applications of gold in rapid assaysWhile stability, sensitivity, and bulk reproducibility still make gold colloid an ...

为了突破0，今天上来贡献点，小生最近在做分子标记的分析，用popgene做种群的聚类分析，想必做过popgene的都知道分析挺简单的，就是popgene文件要求的格式输入比较严重，有一点不对，就算不了，闲言少述，下面我将自己的经验全盘奉上：1.dominant Marker例如:AFLP、ISSR、RAPD这些标记都属于此类，在数据输入中，表头的格式都是固定的，如：/AFLP_dipiolad_populationundefined/numb ...