组织培养

植物组织培养常见问题解析Coolaber1. 培养基的配制注意事项植物组织培养最常用到MS培养基，包含十几种化合物。因为有些化合物相遇会发生化学反应产生沉淀，影响培养基的营养成分，准备MS培养基需要配制多种高倍母液。且配制母液时，尤其涉及大量元素的母液时，一定要等一种成分溶解之后，再缓慢的添加另一种成分，切记“一锅煮”，即不能将各种化合物一齐添加进去。可选用Coolaber的MS培养基基盐（PM1011）在自行加入蔗 ...

像其他真核细胞一样，在植物细胞中，糖基化是被研究最多的翻译后事件之一。根据寡糖部分和蛋白质骨架之间的连接方式，可将糖基化分为两种类型：N-糖基化和O-糖基化。在此介绍我们实验室常用的研究植物蛋白质糖基化的几种不同的实验方法。这些方法依赖于糖特异探针的印记检测、糖蛋白的特异去糖基化以及质谱分析。通过这些实验，不仅可以确定一个蛋白质是不是糖蛋白，还可以确定糖蛋白是在哪个位置以及如何被糖基化的。本章最后部分介绍植物细胞中糖蛋白类群的特殊纯化和鉴定方法，称为糖蛋白质组学。

植物组织培养基包括多种成分：无机盐、维生素、氨基酸、生长调节剂、糖类、琼脂（或结冷胶）和水。所有这些成分在植物组织培养中至少有1种或多种作用。植物组织培养基中的矿质元素进入植物细胞后用于合成有机分子或作为酶反应中的催化剂。可溶性盐离子在植物电离分子运输中作为平衡离子，渗透压的调节以及维持植物体电化学势的平衡都起着重要的作用。氮、硫和磷是蛋白质和核酸的组成成分。镁离子和许多的微量元素是许多酶和细胞器的基本组成部分， ...

原生质体（Protoplast）：指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。一、原生质体的应用由于没有细胞壁，原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。 用作细胞杂交服务于作物改良 用作遗传转化的对象 研究细胞壁的发生过程 筛选突变体 膜的结构、运输、激素接受位点等的研究 用于分离细胞器和大分 ...

方法和试剂 母液 1. 冰醋酸 2. 乙醇 3. 1 M NaOH(氢氧化钠) 4. 100 ml 1 M K2HPO4（磷酸氢二钾） 5. 100 ml 1 M KH2PO4（磷酸二氢钾） 6. 苯胺蓝（Fisher） 7. 甘油 工作溶液 1. 冰醋酸含量为10%的乙醇溶液（固定组 ...

任何动、植物细胞都具有特定的形态结构，对其进行固定和染色等处理，便可以在显微镜下分辨清楚，然后借用目镜测微尺和镜台测微尺，便可测量大小。 实验用品 器具：显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、目镜测微尺、镜台测微尺 材料：H.E 染色标本：小白鼠肝细胞、睾丸组织细胞 I.H 染色标本：洋葱根尖细胞 新鲜材料：洋葱、紫鸭趾草 实验方法步骤 （一）细胞形态观察 1. 投影各种形态 ...

原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下，①具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；③通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。 实验原理 去掉植物细胞壁的方法可以是机械的人工操作，也可以利用酶解法。较早利用机械法制备原生质 ...

植物制片是进行园艺植物科学研究所需用的一种基本方法，比如进行植物各个器官的解剖构造观察、花芽分化研究、授粉受精观察、贮藏营养观测以及染色体观察等等都需要进行制片。 。通过对切片结果的分析，可以比较不同试验处理的效果以及了解不同树种和品种相应的生物特性等。植物制片技术是一个相对独立的体系，内容繁多。

原位杂交法不但费力费时，往往还需要根据物种和组织优化实验条件。对于松柏类植物挪威云杉等木本植物来说，原位杂交更难进行。因此我们提出了一种以非放射性的DIG为标记的适于挪威云杉和植物物种的原位杂交方法。

禾谷镰刀菌（有性型为玉米赤霉）是一种小麦和大麦赤霉病的致病菌种。真菌有性生殖产生的繁殖芽体子囊孢子，是初侵染的主要根源。因此在无菌条件下收集大量子囊孢子是研究真菌子囊孢子发育进程的前提条件。

非人类灵长目动物是一种重要的理解人类大脑正常功能和疾病进程的平行物种。而无偏体视学，是最先进的量化生物学对象组织切片以及生成可靠的关于哺乳动物大脑生物学特征的结构数据的方法。

足量的胰岛对成功移植胰岛非常重要。但是，捐赠者的身体特征，器官的获取和保存均影响胰岛分离效果。伊利诺大学芝加哥校区（UIC）的学者开发了一种成功分离胰岛的改良方法。这一部分介绍胰腺组织的消化和收集。

无偏体视学是一种准确，有效地估算某给定区域总神经元数（或其他细胞类型）的方法。为了实现这一目标，需要采集覆盖整个结构的6-10个系统切片，通常却只处理了1/5的切片，留下大量未经处理的材料。为了最大限度地利用原材料，我们提出了一种固定组织长期存储的廉价方法。

发展了一种外周神经嫁接技术，将坐骨神经片段直接放置到两个脊髓损伤末端之间，或形成一个损伤处的桥梁，再通过促进轴突再生来修复脊髓损伤处的连通性。

我们描述的灵长类动物视网膜解剖技术，适于为视网膜组织学，免疫组织化学，激光捕获显微切割，以及光学和电子显微镜等研究过程提供组织切片。

足量的胰岛对成功移植胰岛非常重要。但是，捐赠者的身体特征，器官的获取和保存均影响胰岛分离效果。伊利诺大学芝加哥校区（UIC）的学者开发了一种成功分离胰岛的改良方法。这一部分讲述人胰岛的纯化和培养。

绝大多数原生质体制备方法选用拟南芥成熟植株的叶片组织为原材料，比如35天龄植物。我们在已有的方法上作了某些变动，发展出14天龄拟南芥幼苗组织原生质体分离的方法。

晶状体上皮组织中央分离块在添加FGF-2的体外培养条件下，能够诱导分化为晶状体纤维，然后可利用蛋白质分析和免疫检验法研究其终末分化。

主动脉环实验是一种基于器官培养的血管再生术模型。在此实验中，血管原性脉管由一小段主动脉发育而来。

线艺兰是指兰科，兰属中的春兰，建兰，寒兰，墨兰, 惠兰五种国兰线艺品种的总称。线艺兰花是因受到外界环境因素（如光照、雷击）的刺激，导致其遗传基因产生变异，叶片上出现黄、白色线条或斑纹等艺象的变异品种。而且组织培养苗在种植技术与培养基上要求更为严格