氨基酸生化实验技术

问：小分子水溶性γ位的氨基酸酯如何水解？如何显色？如何析出固体？谢谢！ 答：是谷氨酸吗？1）甲醇/NaOH水溶液，或THF/NaOH水溶液皂化。2）水合茚三酮显色。3）等电点水/甲醇重结晶。 答：甲醇溶解，加入过量1N NaOH搅拌，监测原料是否消失。茚三酮显色。反应完后PH调至中性，浓缩至干，水|甲重结晶。 答：当然会啊，所以要注意PH值。一般顶多用1N的NaOH，而且还要保持在冰浴 ...

建议：开辟一系列植化讨论专题，欢迎大家踊跃发言。大家可以随意提出自己得看法和意见：大到植化的研究进展，小到实验研究技术。 Topic大致包括： 1、天然药用植物的提取和分离； 2、天然化合物的结构鉴定和解析； 3、天然化合物的结构修饰和衍生化处理； 4、天然化合物的药理活性； 5、天然药用植物的研究进展； 6、新方法新技术的研究及应用进展； 7、天然药用植物化学在中药现代化中的地位 ...

问：我有一蛋白想做氨基酸组分分析，想用6MHCl处理成单氨基酸后用高效液像色谱议做，请问具体如何做，谢谢？ 答：这个问题比较大，呵呵，以前做过一点，和楼主讨论一下吧。 首先，氨基酸组成分析工作量不小，而且要求操作者有较高的操作水平，如果你只是为了检测一下的话，不如花点钱寄出去测测，自己做有时徒劳无功啊。液相色谱是可以做，但是检测机构都有专门的氨基酸分析仪（虽然核心也是一个HPLC）。 如果楼主坚持 ...

问：我最近在做AA，3篇文献都说精AA去峰时间在苏AA的前面，可是我和同事每人做了两次，都发现刚刚相反苏AA先，虽然去峰时间很接近，我用的是WATERS AQC-Tag法测定的，不知道你们可做过？ 答：用WATERS AQC-TagF方法测定氨基酸，我们经常做，精AA出峰时间一直在苏AA的前面。你可以看一下我的标准氨基酸定位色谱图。 ...

问：最近本人做一系列的氨基酸缩合反应，但有一类特定的羧集和氨基就是不反应，试了很多种方法，如EDCI，CDI，PyBOP等，由于羧基化合物中有一个未保护的咪唑环，也曾尝试过用二氯亚砜做酰氯，好象也不行，不知道各位大侠有没有更好的高招，或者是否用某种保基将咪唑环保护起来可行，请赐教！要参与反应的胺是一个脂肪族伯胺，只是位阻有点大，但是那个胺也并非不能缩合，用它和其他的不带咪唑环的酸反应，很好进行，用 ...

问：我们用的是岛津LC－2010CHT的高效液相色谱仪，采用waters的AccQ-Tag法测定17种氨基酸，但是每个进样瓶的第一针进样都偏低，差不多要低到一半，很郁闷，想了很多办法都没解决，检其它样品没有这种情况出现过。请问有没有和我们遇到相同的事情？ 答：我测血浆样品时遇到过你说的问题，原因是开始的时候柱子中的基质没有平衡。解决的办法是在实验开始的时候进几针空白血浆样品（我们做的是液质联用， ...

问：在薄层板上喷茚三酮试剂，吹干后110度高温显色5分钟，结果有明显的紫红色的斑点，但在空气中久置会慢慢褪色，几个小时后只能看到很弱的一点点小的紫红色了，请问这正常吗？ 我有同学做过氨基酸的薄层分析，他说在空气中时间越长显色越明显，而我的是相反的，是不是根本不是a-氨基的反应，而是不相干物质的干扰？ 答：还有就是我的样品需要在较高的温度下才显色，而对照的氨基酸则很快就显色了，这样是不是就代表我的样 ...

问：请教我现在测定氨基酸（只是打算测定其中的天门冬氨酸和谷氨酸以及丙氨酸三种氨基酸）：现用岛津液相，LC-10AT的泵和SPD-10A的检测器，色谱柱ods C18柱(250 X 4．6mm)，检测波长254nm，柱温40cc，流速lmL·min～，流动相A：0．1mol·L- ，醋酸钠溶液(pH6．5)一乙腈(93：7)，流动相B：乙腈一水(8o：20)，并按下述进行 ...

问：人体内是否含有D-氨基酸？ 答：人体很多组织和体液中都含有D-氨基酸。分为结合和游离两类。结合D氨基酸如一些长寿蛋白，牙齿珐琅质，晶状体等。游离D氨基酸比如胎儿血液中和羊水中。 人体内的D氨基酸有两个来源：体内和体外。体内包括人体胃、肠道细菌中所含的D氨基酸和消旋作用形成。体外来源主要是服用一些药物和日常食物中含有的DAA。 ...

问：本人正在做 L-丙氨酸苄酯的合成反应。请各位给点建议？具体方法或文献更好！ 答：我只做过氨基保护了的、羧基游离的氨基酸。 1、Cs2CO3代替Na2CO3 2、PhCH2Cl一定要用重蒸过的。用PhCH2Br更好。 3、反应过程保持碱性（9-10）。 答：很简单，L-丙氨酸8.9(100mmol)tosl.ho219.9（105mmol)苄醇100ML 苯或甲苯50ML 回流2小时分水到理能 ...

问：请教一下诸位学习生化的高手：1. 必需氨基酸的一个主要特点是不是人体不能合成。2. 必需氨基酸包括那几种。我查了一下网上有7中到10种的不同说法。记得读书时书上是8种，这是怎么回事？3. 儿童的必需氨基酸与成人是否相同？有人说儿童的会多一些，如精氨酸对儿童就是必需氨基酸。谢谢了先。 答：应该是8种，定义：必需氨基酸是人体必不可少，而机体内又不有合成的，必须从食行中补充的氨基酸，称必需氨基酸。 ...

问：咨询一下关于氨基酸保护方面的资料，请问哪里能找到啊，尤其是机理，谢谢。 答：有一本关于多肽保护的书，楼主可以在网上找找，再还有一本就是有机的官能团保护，这二本书可能机理讲得多一点，应会对你有点用处 答：氨基酸保护的很多的，通常-NH2保护，像Boc、fmoc等等。 ...

问：复方氨基酸和支链氨基酸是怎样制备的？原料的来源是啥？ 答：复方氨基酸是由人工合成的结晶左旋氨基酸根据临床需要以不同方式配制而成。含有14至20种氨基酸，但都包括8种必需氨基酸。可分为两大类：一类是适用于大多数病人的平衡氨基酸溶液，除含有8种EAA外通常含有6－10种非必需氨基酸，第二类复方氨基酸溶液的配方特殊，适用于某些特殊病人，如肾衰、肝病。支链氨基酸包括缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸。 答：氨 ...

问：组成抗原表位的一些氨基酸是疏水还是亲水的？为什么？还有组成信号肽的氨基酸是疏水还是亲水的？为什么？请高手赐教，感激不尽！ 答：信号肽序列在10-40个氨基酸残基范围，其中部有一段长度为10-15个氨基酸殘基的由高度疏水性的氨基酸组成的肽链。一般蛋白质是很难通过脂膜的，但信号肽可引导它通过膜到达特定的部位。 组成抗原表位的氨基酸则不一定是疏水的。看看这段话就清楚了： The antigenici ...

问：在多种氨基酸混合后，用摇摆制颗粒，颜色发绿。后用糖衣锅（铜）也变绿，不知道是我 清场不彻底，还是本来就与铜有反应，该怎样避免呢？各位前辈指教。 答：氨基酸具有还原性，可被铜氧化。 答：氨基酸在铜催化下容易发生美拉德反应。 ...

一般用薄层色谱法。标准方法大致如下，供参考。 其它氨基酸：取本品，加水微热使溶解，制成每1mL中含XXXmg的供试品溶液，另取XXXX对照品适量，加水制成每1mL中含XXXmg的对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取上述两种溶液各5uL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-冰醋酸（2﹕2﹕1）为展开剂，展开，晾干，在90℃干燥10分钟，喷以茚三酮的丙酮溶液（1→50），在9 ...

问：我在做HPLC测一个氨基酸的量，可是这个氨基酸会降解，所以很难办，不知道是否可以用什么固定剂将它固定，就像固定蛋白一样，向各位请教，急！先谢了。 答：只有蛋白可以固定，氨基酸没有什么固定的方法，不过你可以化学试剂把它修饰一下，让转变成稳定的结构。 ...

问：不好意思，请教一个简单的问题，试剂瓶上标DL××氨基酸，是否含有D-××氨基酸和L-××氨基酸各半？ 答：DL氨基酸 应该是外消旋氨基酸，也就是L型与D型氨基酸各一半，旋光度为零的氨基酸。这种氨基酸生产工艺比单一旋光氨基酸简便，价格也便宜。这种氨基酸一般都是化学法生产的，Ｄ型跟Ｌ型的氨基酸可能大体上等量，也许旋光度并不正好 ...

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答：本人曾合成了十多种氨基酸酯，初步总结氨基酸的酯化反应如下： 1、使用无水HCl为催化剂，通入HCl至氨基酸醇溶液中，注意防止通气管堵塞，然后回流半小时，冷却，析出固体，滤出，得氨基酸酯盐酸盐。然后加入到氯仿中，再加入NaOH固体，搅拌，TLC检测，滤出固体，滤液旋干，即得氨基酸酯。 答：我也曾合成了十几种氨基酸甲酯，所用的方法如下： 在冰浴条件下向无水甲醇中滴加氯化亚砜，地完后自然升温，室温 ...