细胞功能测定

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相关专题 细胞凋亡专题 PTEN依赖的细胞生长抑制和细胞凋亡 PTEN (phosphatase and tensin homology deleted on chromosome 10)在广泛的人类肿瘤中发生基因突变或缺失。PTEN是一个PIP3-磷酸酶，与PI3K的功能相反，它可以通过去磷酸化将PIP3转变为PI-45-P2。PTEN可 ...

相关专题 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Ks)信号参与增殖、分化、凋亡和葡萄糖转运等多种细胞功能的调节. 近年来发现 IA型PI3K和其下游分子蛋白激酶B(PKB或Akt)所组成的信号通路与人类肿瘤的发生发展密切相关. 该通路调节肿瘤细胞的增殖和存活 其活性异常不仅能导致细胞恶性转化 而且与肿瘤细胞的迁移、黏附、肿瘤血管生成以及细胞外基质的降 ...

相关专题 AKT大家一定不陌生，即蛋白激酶B，细胞凋亡重要因子。本文精选了Nature子刊、世界公认的顶尖综述期刊——Nature Reviews Cancer上关于akt pathway的信号通路图。 Activation of class IA phosphatidylinositol 3-kinases (PI3Ks) occurs ...

相关专题 在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。 HEPES分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式: C8H18N2O4S。 HEPES常用于生 ...

相关专题 293细胞总有一种转染方法适合你 gdgznf2008：大家看看我的293细胞状态怎样? 适合转染吗? my5155714认为： 不太好至少你的细胞长的太不均匀了 而且有的细胞已经老化消化的问题 网友gdgznf2008认为： 我的细胞是师兄冻存的，也不知多少代了，我用的是0。025的胰酶+EDTA消化的，而且尽量吹打均匀，可 ...

相关专题 全球领先的生物技术公司Eppendorf率先在中国推出全新细胞培养耗材，扩展了eppendorf细胞处理（Cell Handling）产品线，为客户提供完整的细胞产品解决方案。 eppendorf作为拥有50多年高品质耗材研发和制造经验的生产商，一直致力于为客户提供高品质耗材。正如Eppendorf的承诺以及客户的信赖，Eppen ...

相关专题 The PI3K/AKT and related pathways are important in internalizing the effects of external growth factors and of membrane tyrosine kinases. Activation of membrane kina ...

相关专题 常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。转染方法的选择对实验结果影响很大，不少转染方法都需对细胞数量，DNA与转染试剂比例，培养及检测时间进行优化。传统的转染技术，如DEAE右旋糖苷法，磷酸钙法，电穿孔法，脂质体法各有利弊，其主要原理及应用特点见下表： ...

相关专题 滋养层细胞在胚胎干细胞的培养中扮演了双重角色，同时提供了生长底物和生长因子。后者我们能用外源的生长因子来替代。至于前者，一些研究人员也开始用基底膜基质来替代，如BD的Matrigel。当然，人类胚胎干细胞及诱导多能干细胞(iPSC)的最佳培养条件是成分完全明确，并且完全人源性的。 为此，StemCell Technologies公 ...

相关专题 在分子生物学中，磷酸钙沉淀法特指将外源DNA转入真核细胞的一种方法。将氯化钙、DNA和磷酸缓冲液混合，形成吸附DNA的不溶性羟磷灰石细微颗粒附着在细胞表面，通过胞饮进入细胞。此方法对于贴壁细胞转染是最常用并首选的方法。 核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时，可使DNA附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的 ...

相关专题 脂质体介导是目前条件下最方便的转染方法之一，适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，其转染率高，优于磷酸钙法，比它高5～100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。 用LR进行转染时，首先需优化转染条件，应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等，对每批LR都要做：第一，先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细 ...

相关专题 实验前应明确的问题 1. 选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行mtt试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MTT结晶形 ...

相关专题 细胞凋亡(apopotosis)是指细胞在一定生理和病理条件下，遵循自身程序，由基因调控的主动性死亡过程。细胞 凋亡具有重要的生理和病理意义，它是多细胞生物发育和组织平衡的主要机制，并且与肿瘤、神经推行等发病机理有关。许多病理生理因素如自由基、辐射、DNA损伤、剥夺生长因子以及死亡受体和配体作用等都能引起细胞凋亡。 常用方法： 1 ...

相关专题 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。 在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝 ...

相关专题 体外培养的细胞直接生活在培养基中，因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。 营养成分 1. 氨基酸：所有细胞都需要12种必须氨基酸：缬、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精、胱氨酸。 2. 单糖：六碳糖是主要能源，也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。细胞对葡萄糖的吸收能力最高，半乳 ...

相关专题 1. 材料和试剂 1.1培养液A ：DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)。 1.2培养液B：DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)和终浓度为0.7--1μg/ml的放线菌素D。 1.3 L929细胞株：鼠结缔组织纤维母细胞，来源于22天雄性C3H鼠皮下组织。 1.4 结晶紫染色溶液：0。05%结晶紫 (50mg ...

相关专题 1、取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。 2、将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基，处理1~2小时。 3、将细胞培养液倒掉，马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶，并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后，马上加入终止液终止消化，并将分裂相细胞收集在一个15ml的 ...

相关专题 体外神经细胞的培养已成为神经生物学研究中十分有用的技术手段。神经细胞培养的主要优点是:(1)分散培养的神经细胞在体外生长成熟后能保持结构和功能上的某些特点 而且长期培养能形成髓鞘和建立突触联系这就提供了体内生长过程在体外重现的机会。(2)能在较长时间内直接观察活细胞的生长、分化、形态和功能变化便于使用各种不同的技术方法如相差显微镜 ...

相关专题 1、如何选用培养基? 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI- 1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基(SFM) 2、为什么要热灭活血清? 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌 ...