细胞功能测定

实验动物及分组：选用健康SD 雄性大鼠32只体重280～330 g 将其随机分成A 、B、C、D 4 个组A 组即对照组鞘内注射( IT) 生理盐水。模型组:B 组鞘内注射0. 5 % AlCl3 C 组鞘内注射1. 0 % AlCl3 D 组鞘内注射1. 5 % AlCl3 5 d 后拔管单笼饲养28 d。AD 动物模型建立方法及判定蛛网膜下腔插管及给药方法采用Yaksh 法 。AD 动物模型成 ...

1.Hypovolemic shock（MODS Multiple organ dysfunction syndrome）： 低血容量性休克模型Wistar大鼠，4. 5 %异戊巴比妥(80 mg/ kg )？ 在25 ℃室温下腹腔内给药麻醉?右股动脉插入套管针 连接多导生理记录仪监测血压;左颈静脉插入套管针给予甘氨酸、生理盐水和自体血(复苏通路) ;右颈动脉插入套管针另一端连接肝素化玻璃注射器中 ...

材料：DMEM培养基(Gibco BRL Co生产)， 无糖DMEM培养基(Gibco BRL Co生产)，NRKSIE 鼠。肾小管细胞株(购于华西医科大学内科实验室)，乳 酸钠(国产分析纯试剂)。 方法 肾小管细胞培养 NRKSIE鼠肾小管细胞 用0．25% 胰蛋白酶消化，将小管细胞分离成单个细胞悬液，用含100 mL/L 胎牛血清的DMEM培养基，于37℃5%(体积分数)CO2 孵箱中培养。每 ...

【细胞种类】小牛肺动脉平滑肌细胞第5代；【培养液】含15％FBS的MEM液；【固定方法】70％酒精固定；【染色方法】PI单染法；【具体步骤】1、接种：以1undefined5/ml密度（活细胞）接种，加培养液；2、同步化：24h后加不含FBS的MEM进行同步化12－24h；3、加因素：弃MEM液换等量的培养液，加药物等因素培养到指定时间；4、消化：用不含EDTA的0.25％胰酶进行消化，离心（2000转5min ...

前阵子做单抗，做了几次细胞融合都没做出来，后面怀疑是SP2/0受支原体污染，细胞生长速度减慢，出现细胞碎片，换液后情况稍好。怀疑受污染后我对细胞做了一系列的处理，终于有一种处理成功地削除了支原体污染，细胞融合也成功了，现在单抗已经做出来。现在想把我的处理方法贴出来，希望对一些遇到同样问题的朋友有用。处理方法：以两种抗生素交替使用，第一种是2-3倍于正常浓度的双抗（青霉素、链霉素），第二种是10ug ...

最近第一次养细胞就养成功了非常高兴发上来跟大家分享养细胞主要是无菌我用得是组织块消化法首先要把培养用的DMEM和PBS 用过滤法抽吸式过滤一下取材时注意无菌150克的大鼠用7毫升的1%戊巴比妥消毒用DMEM反复清洗用眼科剪刮去外膜剪开血管用棉签刮去内膜的脂滴再用眼科剪剪成碎块铺到培养瓶里均匀铺开滴少许含20%FCS的DMEM湿润一下然后再加3---5毫升的DMEM(含20%FCS)到培养瓶内使铺组 ...

一、原理黄色的噻唑兰，简称MTT，可透过细胞膜进入细胞内，活细胞线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性MTT还原为难溶于水的蓝紫色的针状Formazan结晶并沉积在细胞中，结晶物能被二甲基亚砜（DMSO）溶解，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映细胞数量。二、实验步骤（实用于贴壁细胞）1）收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，分于96孔板，每孔180μl，3000-10000个/孔 ...

1.什么是细胞转化？何时会发生细胞转化？　　细胞转化是细胞发生遗传性状改变的一种变化，它的基础是DNA或基因的突变。从属性上说，基因突变导致生物体发生的转化，有利于生物体的转化，也有不利于生物体的转化（例如癌变）。　　在体外培养的细胞，受到致突变作用时便可发生转化，凡能诱发DNA（基因）结构改变的因素均视为诱发因素，有物理因素（如射线）、化学因素（MNNG）、病毒（EBV、SV40）、癌基因也是， ...

染料同时染色细胞，为鉴别凋亡细胞和坏死细胞提供较好的方法。染料： 吖啶橙(AO)膜通透性较高的染料 溴化乙啶(EB）正常细胞： AO－ 绿色荧光强，EB－ 染色红色荧光较弱；凋亡细胞： AO－ 绿色荧光强度弱减，EB－ 染色红色荧光加强；坏死细胞： AO－ 绿色荧光强度弱或消失，EB－ 染色红色荧光强（EB可诱导AO的淬灭）。 ...

方案11．细胞培养材料：取病人手术切下的病理性瘢痕组织及其周围正常组织。2.取材部位：前胸、四肢等，病人年龄从3到35岁，瘢痕生长时间为6个月到1.5年。3.采取组织块贴壁法进行成纤维细胞培养。4．过程：在手术室无菌条件下将手术切下的病理性瘢痕及周围正常组织小心去除表皮及皮下脂肪组织，然后在超净工作台上用眼科剪刀将组织剪成大小约 0.5-1mm3的小块，加入少量小牛血清，接种于培养瓶中，在95%空 ...

绒毛来源于胚胎的中胚层，最早的初级干绒毛出现于孕三周初，孕8周左右是绒毛发育最旺盛时期。目前国内外绒毛取材多选于8-9周。研究资料表明，绒毛取样不影响胚胎的发育及胎盘的功能。但取样的失败可导致胚胎丢失而终止妊娠。绒毛取样前者首先要检查阴道分泌物以判别阴道的洁净度，防止取样导致宫内感染。其次需做B超检查，一是确定胚胎大小，二是确定胚芽有无心血管搏动，三是确定胚芽在子宫内的位置，用以判别取材时间，是否 ...

组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株，多为恶性肿瘤细胞株，且呈贴壁生长，仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态，只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相，所以积水仙素处理的时机及量是染色体标本形态及分裂指数的关键。 　　1、 实验材料　　培养液（PRMI 1640、M199、DMEM ...

在恶性肿瘤的胸腹水中有大量的分裂期细胞，其中多以非整倍体细胞存在，并含有各种标记染色体。　　1、 实验材料　　2.5%碘精、75%酒精、无菌棉球、镊子20-22号无菌腰穿包、50ml离心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、载玻片等。　　2、 操作过程（1）采样：选择有胸或腹水患者，在无菌条件下，轻腹穿刺或于手术取胸或腹水20-50ml；（2）培养：立即加入秋水仙素培养，最终浓度为0.02-0.04 ...

药物毒理体外经典实验。国家都有标准了就可以想象重要性了。自己做了一个PDF文件，方便大家收藏。中华人民共和国国家标准GB 15193．12一91体外哺乳类细胞（V79/HGPRT）基因突变试验V79/HGPRT gene mutation test-------------------------------------------------------------------------1 ...

三.器械的清洗和消毒 玻璃器械洗消： (1)新的玻璃器皿的洗消： 1.自来水刷洗，除去灰尘。2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。3.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。4.泡酸、清洗：用清洁液（重铬酸钾120g：浓硫酸200ml：蒸馏水1000ml）浸泡12小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次，最 ...

四.细胞培养用液的配制与消毒 器材与试剂： 干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。具体步骤： (1)水的制备： 细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水.(2)PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)： 1.溶解定容：将药品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2 ...

七.细胞计数 实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。具体操作： (1)准备工作： 取一瓶传代的细胞，按照《传代细胞培养（消化法）》中的传代方法繁殖细胞，待长成单层后以被使用。 (2)细胞悬液制备： 细胞悬液的制备方法是用0.25％的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后，加入培养液（或Hanks液或PBS等平 ...

配液：Hanks液、低糖DMEM液、高糖DMEM液、胰酶消化液、双抗液、碳酸氢钠液、盐酸液。取鼠：鼠盆用棉铺好，取鼠。准备：事先检查显微镜、磁力搅拌器及离心机是否好用，提前三小时把小牛血清、胰酶、抗生素拿出来化开。其余未冻药品也提前20分钟拿出来缓和一下。新洁尔灭（0.1％）泡纱布（用10ml5％的新洁尔灭加水至500ml即得），消毒地面（1：500的84液）。用酒精棉球擦拭台面后把物品摆放好，开 ...

细胞传代(1) 试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。(2) 弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3) 用Tip头加入1ml Trypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2 )。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞完全从壁上脱落下来为止。(4) 加入1ml的含血清培养基终止反应。(5) 用Ti ...

1.取材： 选取水稻种子，充分浸种后，将它们摆在铺有滤纸的培养皿内，在约28℃条件下发芽培养，当胚根长至1～1.5cm时，剪下备用。2.预处理 压片法：采用0.1％秋水仙素处理2h左右去壁低渗法可采用以下四种方法处理处理方法 0.002mol/L8-羟基喹啉 α－溴萘饱和溶液 低温（－4℃） 卡诺氏Ⅰ固定液处理时间（h） 1 24 ...