细胞分离纯化

1 血浆稳定性研究的意义1.1 血浆稳定性研究的重要性在药物发现过程中，先导化合物的代谢稳定性（包括肝代谢稳定性和血浆稳定性等）是影响其成药性的关键因素。在药物研发案例中，很多先导化合物都存在稳定性差的问题，而很多具有良好药理活性的化合物由于不够稳定最终导致研发失败而终止。因此，代谢稳定性研究是寻找候选药物过程中不可或缺的一项重要内容。尽管化合物的肝代谢稳定性被普遍认为是药物发现过程中所面临的最主要的挑战之一，但是 ...

1 空白生物基质采自健康受试者或者健康实验动物的空白全血、血清、血浆、胆汁、乳汁、尿液、粪便、肠道内容物、组织脏器、玻璃体液、房水、脑脊液等多种类型的生物基质，统称为空白生物基质。2 空白生物基质应用在生物基质分析方法的建立和验证中，需要使用空白生物基质，确保分析方法的准确性及可靠性。空白基质主要用于配制校正标样、制备质控样品用于考察分析方法的特异性、选择性、精密度、准确度、基质效应、回收率、稳定性、稀释线性、干扰效应等。其中检测 ...

1 药物与血浆蛋白结合药物和血浆蛋白的结合对药物在体内的分布和转运有重要影响，因此药物蛋白结合率的测定是新药开发过程中的一项重要工作。药物与血浆蛋白结合后很难通过血管壁，故蛋白结合型药物通常没有药理活性。相反，非结合的游离型药物易于透过细胞膜，与药物代谢、排泄以及药效密切相关，具有重要的临床意义。血浆中与药物结合的蛋白主要有白蛋白（Albumin，65KDa）、脂蛋白（Lipoprotein，200~3400 KDa）、a ...

1 Ames试验简介Ames试验，亦称细菌回复突变试验（Bacterial Reverse Mutation Test)，于1975年由美国加利福尼亚大学伯克利分校生化系B.N.Ames教授实验室建立并不断发展完善，至今已成为国际上通用的遗传毒理评价体系的必检项目，同时也是许多遗传毒理学新兴技术发展过程中对照验证结果的试验之一，广泛应用于化合物的致突变性和潜在致癌性的初筛检验。当前，Ames试验在食品、药品、化学品、化妆品、农药 ...

药物被机体吸收后，在体内各种酶以及体液环境作用下发生化学结构的改变的过程，称为药物代谢（Drug metabolism），又称生物转化（Biotransformation）。药物代谢主要在肝中进行，也发生在肠、肾、肺、血液和皮肤等器官，尤其是药物的肠代谢越来越受到人们的关注。口服药物主要经小肠和大肠吸收进入肠毛细血管床，它是药物进入体内的一条重要途径，但研究发现许多药物通过肠道时即被代谢，这种肠道的首过效应往往造成进 ...

磁性细胞分选（MACS）是一种20世纪70年代发展起来的相对高效简便的细胞分选方法，所需设备和操作较为简单，对操作人员的技术要求也不高，只是让细胞处于一个低磁场中，基本可以忽略对细胞的影响，分离得到的细胞具有较高的复苏率及细胞活性，对于下游应用影响较小，在保持细胞活性方面优于流式分选，是细胞分选的首选方法，具有潜在的应用前景。1 磁性细胞分选原理磁性细胞分选是基于免疫学中抗原抗体之间特异性结合的原理进行的。以磁性 ...

正常人外周血中的干/祖细胞的含量占有核细胞数的1%左右，经有效动员后，骨髓中的造血干细胞会释放到外周血中，使外周血中的干/祖细胞比例明显增高。动员外周血是指用有效的动员剂对供者进行动员后采集的外周血。重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）是外周血动员最常用的动员剂，它可选择性的作用于粒系造血祖细胞，促进其增殖、分化，并可增加外周血中性粒细胞的数目和功能。动员外周血单个核细胞是采集经动员后的健康供者的外周血，采 ...

骨髓单个核细胞（Bone Marrow Mononuclear Cells，BMMNCs）是一群混合细胞，其中绝大多数是早幼粒细胞、早幼红细胞、成熟B细胞、T细胞和单核细胞等，还含有少量的干细胞，包括间充质干细胞、造血干细胞和内皮祖细胞等，它们密度相近，因此可通过密度梯度离心法从骨髓液中分离出来。1 原理单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同，在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞 ...

脐带血是指胎儿出生时脐带内及胎盘近胎儿一侧血管内的血液。脐带血单个核细胞（Cord Blood Mononuclear Cell，CBMC) 分离自正常人胎盘脐带组织，是脐带血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞等，是机体防御系统的一个重要组成部分。1 原理单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同，在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离 ...

脾脏（spleen）位于上腹部左后侧，体积较大，长条形，是体内最大的淋巴器官，也是血流通路中的过滤器官。脾脏内定居着大量的淋巴细胞和其它免疫细胞，是机体发生特异性免疫应答的场所。1 原理单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同，在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。2 方法1）无菌条件下取出脾脏，在培养皿中加入适量的分离液，将脾 ...

外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC），是指外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞（Lymphocyte）、单核细胞（Monocyte）、树突状细胞（DC）和其他少量细胞。1 原理单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其它细胞不同，红细胞和多核白细胞的比重超过1.080，单个核细胞的比重为1.070左右，血小板为1.030左右。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各 ...

01 概述1.1 药物代谢研究简介药物代谢研究是创新药物研发的重要内容，它不仅决定了创新药物制剂研发的成败，而且与创新药物研发的速度和质量有密切关系。因而，药物代谢研究在新药研发工程中具有不可或缺的重要作用，研究药物代谢对于了解药物在体内的变化过程至关重要。药物代谢研究的方法主要分为体内和体外两种。体内代谢法因药物在生物体内的分布较广，加上代谢转化的器官和酶系的多样性，使药物及其代谢产物在体内的浓度比较低，代谢产物 ...

1 概述1.1 药物代谢研究简介药物代谢研究是创新药物研发的重要内容，它不仅决定了创新药物制剂研发的成败，而且与创新药物研发的速度和质量有密切关系。因而，药物代谢研究在新药研发工程中具有不可或缺的重要作用，研究药物代谢对于了解药物在体内的变化过程至关重要。药物代谢研究的方法主要分为体内和体外两种。体内代谢法因药物在生物体内的分布较广，加上代谢转化的器官和酶系的多样性，使药物及其代谢产物在体内的浓度比较低，代谢产物的 ...

01 概述1.1 药物代谢研究简介药物代谢研究是创新药物研发的重要内容，它不仅决定了创新药物制剂研发的成败，而且与创新药物研发的速度和质量有密切关系。因而，药物代谢研究在新药研发工程中具有不可或缺的重要作用，研究药物代谢对于了解药物在体内的变化过程至关重要。药物代谢研究的方法主要分为体内和体外两种。体内代谢法因药物在生物体内的分布较广，加上代谢转化的器官和酶系的多样性，使药物及其代谢产物在体内的浓度比较低，代谢产物 ...

人CD3+T淋巴细胞阳性分选原理及注意事项一、细胞分选方法概述细胞学研究中一个很重要的课题就是细胞的分离纯化，尤其是需要对某种特定的细胞进行功能研究，如对细胞培养上清液通过ELISA分析检测细胞因子、细胞共培养检测细胞功能等，都需要得到高纯度的目的细胞。因此，高效地分离所需要的目的细胞是进行细胞功能研究的先决条件。细胞分选（cell sorting）是指根据细胞所具有的特性把某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中 ...

​免疫亲和层析法常用于蛋白质等生物大分子的纯化。但你是否想过，一根亲和层析柱子也能用来进行细胞分选，而且还不使用高亲和力抗体？在细胞分选中，我们常常利用免疫识别特性来进行，比如流式分选 (FACS)和免疫磁分选 (MACS)。免疫细胞的划分是依据表面标志 CD 分子，可以被抗体识别。比如针对 CD4 + T 细胞这一特定类群，表面含有 CD45、CD3 和 CD4 标记。而表达 CD4 就是辅助性 T 细胞的特征。由此而来，免疫磁分选利用特定抗体偶联磁珠来捕获细胞。细胞与磁珠 ...

1.分选原理源自德国 IBALifesciences 的多重磁珠阳选，选后细胞无试剂残留（即 label-free）的特性，非常适用于分选一些需要用多种 marker 才能准确鉴定的细胞，如 Tcm，Tn，Treg 细胞。假如现在我们想用 CD8+CD62L+CD45RA- 这几个 marker来分选 Tcm 细胞，首先我们可以通过磁珠法阳选先得到 CD8+的细胞，将分选得到的细胞上结合的磁珠等分选试剂去除后，再分选出 CD62L+ 的细胞，这样获得到CD62L+CD8 + 的高纯度 T 细 ...

​通过 TCR 与 MHC 多肽复合物间的特异性识别作用，可以对抗原特异性 T 细胞进行检测和分离。然而，当 MHC 多肽复合物为单体状态时，其与 T 细胞的结合并不稳定。若将其四聚体化后，其与 TCR 的结合可保持在一个稳定的状态，成为检测的工具。德国 IBA Lifesciences 研发的 MHC I STREPTAMERS®技术，利用了这一特点，将传统的链霉亲和素改进为 Strep-Tactin®，搭配荧光标记或纳米磁珠，与多聚化的低亲和力MHC I-Streps 形成复合体，实现了对抗 ...

一起看 NK 细胞分选方案与数据～在细胞分选中，阴选通常是指对非目的细胞进行标记和去除，来得到目的细胞。避免通过直接的标记目的细胞（比如使用表面特异性抗体标记），从而来减少细胞活化可能。因此，阴选方法的优势在于可以保持目的细胞未受刺激的原始状态，分选速度快。不过相对阳选而言纯度稍低，而且需要事先对原始样品的细胞组分有所了解，准备相应的标记抗体。阴选的优势与劣势本文将大家分享一种新的阴选方法和相关数据，利用 Strep-Tac ...

Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC），是指外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞（Lymphocyte）、单核细胞（Monocyte）、树突状细胞（DC）和其他少量细胞。PBMC 可利用健康人或动物供体的外周血，通过 Ficoll 密度梯度离心，磁珠分选等步骤获得，主要包括淋巴细胞和单核细胞。Ficoll 是蔗糖的多聚体，中性，平均分 ...