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wfn_1999 信号转导阻断剂使用时，是否必须使用无血清培养基？影响有多大chenlydd 因为血清中含有某些细胞因子，可能对你研究的信号通路有激活作用。chuckdouble wfn_1999 wrote:信号转导阻断剂使用时，是否必须使用无血清培养基？影响有多大A组使用阻断剂+含血清 B组使用阻断剂+不含血清 C组不含阻断剂 分组后测一下阻断率就知道了.doctormy 并不是必须使用无血清培养基，只要有平行对照即可本文由丁香园论坛提供 ...

foreach_no1 想请教下关于CHIP和CO-IP的问题1.我想知道这两个的区别是什么?我的理解前者检测蛋白和DNA,后者是检测蛋白和蛋白.不知道我这样说对不对?如果对的话,还有别的不同吗?!2.CO-IP我的原理我倒是明白了,但是关于实验的对照设计还有些问题,所以想请高手指点下3.CHIP我也是大致明白原理,不太知道实验要怎么设计.请大家指点!非常感谢哦!玉兔jane 我也想要知道roy2929 ChIP和Co-IP都是 ...

xuelang09nianhao 现在我在做分子生物学实验 急需 希望哪位大侠给找一下 谢谢 可以发到我的邮箱：xueliangliang2008@163.comzhujoker freecell建议：这里下载好像更快些。http://www.seekbio.com/soft/459.html 你提供的地址下册不能下载。分子克隆实验指南(第三版)中文版上下册共275mb pdf格式的 ，不用注册，下载速度也很快http://www.biocity.cn/ ...

daiguo 求电子书Cell Cycle Control: Mechanisms and Protocols ，不胜感激！daiguo 怎么没人理我呢？bigben446 daiguo wrote:求电子书Cell Cycle Control: Mechanisms and Protocols ，不胜感激！http://www.uushare.com/user/vi1sun/file/1180008本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你 ...

freedegree doxorubicin(阿霉素）文献说是一种p53诱导剂，我想咨询一下，在细胞中加入doxorubicin会使p53活性升高吗？如果不加的话，细胞中的p53是不是没有活性的？chenlydd 在细胞中加入doxorubicin会使p53活性升高，如果不加，细胞中的p53也是有活性的。参考信息如下：1 阿霉素　　Adriamycin (Doxorubicin,ADM)阿霉素是一种抗肿瘤抗生素，可抑制RNA 和DNA的 ...

roy_liu823 逆转录病毒和慢病毒载体经包装后可以得到携带外源基因的病毒，将病毒感染细胞后，外源基因可以整合到细胞基因组中，经过稳定的筛选后，就可以得到稳定表达外源基因的细胞。而一些真核表达载体如pcDNA3.1经脂质体转染进细胞后，也可以整合到细胞基因组中，并经过G418的筛选后，也可以得到稳定表达外源基因的细胞。我就很困惑：这两者有什么区别？用逆转录病毒或慢病毒载体的优势在哪？如果我想得到能稳定表达某一基 ...

yu3242001 最近在文献中看到一个新技术：gene set enrichment analysis (GSEA)，看不懂这个方法，请高手给解释一下这个方法是怎么一回事。万分感谢freecell Gene Set Enrichment Analysis分析，就是基因富集分析，它是用统计学的方法分析若干类功能基因簇（gene set）是否在不同的生物样本组中存在差异，通过芯片实验数据的分析，寻找不同样品的差异基因可能与哪些生物学功能相关，为后期实 ...

gln109 胞内钙离子荧光强度如何测定？chenlydd 见附件chenlydd 荧光钙离子测定技术在医学研究中的意义及应用钙离子是机体的重要元素，同时作为细胞内第二信使通过与钙调蛋白（Calmodulin，CaM）结合激活多种蛋白激酶（如腺苷酸环化酶、磷酸二酯酶、钙调蛋白激酶等）及诸多蛋白水解酶和核酸酶，从而参与包括细胞代谢、细胞周期等多种细胞功能的调节，在细胞的许多生命活动中担当着重要的角色。因此，钙离子测定在医学实 ...

libiqing77 最近老板要我到网上搜metacore这个软件，但是好像要收费，有没有哪位大哥用过这个软件，给指条明路，小弟谢过了！welcomemydxy MetaCore™ is an integrated software suite for functional analysis of experimental data. The scope of data types includes microarray and SAGE gene expression, SNPs and CGH arrays, pr ...

xiexia2008 请问下，我买的SB203580呈粉末状，去查了SIGMA上面的说明，-20度保存，不明白是直接连包装保存-20度还是需要我先配成工作母液在保存-20度，我过两星期才用这个抑制剂。谢谢回复。xiexia2008 希望有做过这方面的朋友指点一下doctormy xiexia2008 wrote:请问下，我买的SB203580呈粉末状，去查了SIGMA上面的说明，-20度保存，不明白是直接连包装保存-20度还是需 ...

waterbottle_12 哪位前辈用过NF-KB阻断剂PDTC，我订购的PDTC药物马上要到了，听说PDTC要放在惰性气体里，现在不知道怎么存放，具体存放是怎么操作，及那我把药物配成溶液的时候怎么操作及配液的注意事项（是不是配液也要在惰性气体里操作？谢谢doctormy waterbottle_12 wrote:哪位前辈用过NF-KB阻断剂PDTC，我订购的PDTC药物马上要到了，听说PDTC要放在惰性气体里，现在不知 ...

rainlijun 兄弟是做产品经理的，说的可能是外行话，请不要嘲笑:).最近在研究甘草酸苷的药理作用。发现甘草酸苷的作用机制很复杂，经典一些的作用如抗炎、抗过敏、免疫调节、抗病毒等，新发现的作用更多，比如调节血脂、血糖、抗艾滋病毒等。甘草酸在肠道代谢为甘草次酸后发挥作用。从分子生物学的水平上看，甘草次酸可以抑制磷脂酶A2的磷酸化，可以抑制NF-kB的磷酸化，可以抑制HMG蛋白的磷酸化，抑制补体的磷酸化。后来上网一搜，原来 ...

luming10 求助,本人用RAW264.7细胞诱导破骨细胞一直失败，96孔板，2000个细胞/孔，RANKL50ng/ml,M-CSF25ng/ml,5到6天后TRAP染色一直没有看到理想的结果，各位前辈有做过这个实验的请传授经验，培养ＲＡＷ２６４．７细胞的时候是否有些特别注意事项，如何使RAW264.7的状态达到最佳？以及关于TRAP染色有什么需要注意的，多谢xxmchappyniu 同问，最近一个同事也要做RAW的 ...

吾夜清心 请教：胰腺癌细胞有耐药的吗？如耐5-FU胰腺癌细胞株，耐多种药物胰腺癌细胞株我想从逆转耐药着手，有耐药的肿瘤细胞株吗？ 谢谢:Pzhujoker 胰腺癌细胞有耐药的，比如胰腺癌耐药细胞株SW1990/FU的建立、鉴定。这是采用5-氟尿嘧啶（5-FU）浓度梯度递增法建立胰腺癌耐药细胞株SW1990/FU。耐多种药物胰腺癌细胞株，耐药细胞亚株SW1990／FU和SW1990／ADM，不过好像这些耐药细胞株的建立都是用药物诱 ...

吴佰霖 将一个目的基因在细胞稳定过表达后，用芯片分析有许多细胞因子发生了改变，能证明该基因是怎么起作用的，是跟什么蛋白结合了，通过什么通路等。。。。哪位战友可以提供一些思路或一些类似的文献，谢谢！吴佰霖 谢谢版主的置顶，也希望广大战友发挥你们的宝贵意见！其实我们在看文献的时候就会发现，研究一个基因的功能，很多时候不是nockdown ，就是overexpression，然后研究细胞的形态改变，生物学功能（生长，侵袭，移动），致瘤 ...

iu_ui 请教下，Rac-1表示什么意思，是哪个通路的？看文献的时候看到写到由Rac-1介导的信号通路不知道什么意思，它是调控什么的，手头没有相关资料，来求教下，谢谢~！zhujoker Rac-1是指的是ras-related C3 botulinum toxin substrate 1，中文也叫Ras相关的C3肉毒素底物1。Rac 1基因位于人染色体7p22，其编码产物是小G蛋白Rho(Ras homologue)家族重要成员。Rac 1蛋白具有Rac ...

davinci2008 请教一下各位高手：想证明A通过B作用于C，A→B→C。已知A对B有肯定作用，是否证明了B对C的作用，就能证明A通过B作用于C呢？谢啦！！！zhao22840718 不能，也许A可以通过其他途径作用于C。首先你要把A——C弄通，然后中间抑制B，看对C的影响。同时中间要检测B是否变化（磷酸化，或总蛋白水平等）。A对B有肯定作用，证明了B对C的作用，只能说A可能通过B作用于C。magichunter 1.先证明A可作 ...

Iping 各位老师好，我的实验出现了问题，很急，想向各位请教，希望能获得帮助。我的实验设计是看药物A能否增加细胞对TRAIL因子敏感性、促进细胞凋亡，因此我将低浓度的药物A（MTT致死率为10%左右）与TRAIL一起作用细胞，因为TRAIL引发的凋亡通路要通过caspase的激活而实现，因此我同时再另外设置添加caspase抑制剂的实验组，即A + TRAIL + caspase抑制剂。观察到的实验现象很奇怪，A + TRAIL出现了协 ...

RYOo 读了很多文献，直接上来就开始说XXX受体的亚型中存在可溶性受体……是我文献没读够吧，但是我还是晕晕的搞不清楚概念。请老师们指点一下！对于配体来说，到底decoy receptor，soluble receptor，和soluble decoy receptor，有什么区别？谢谢！:Ifreecell 这段话不知是否有助于理解这个概念：The concept of a ‘receptive substance’ (or receptor) was first form ...

yilulihua 近来查文献，发现筛选抗炎活性时.in vitro, RAW, 提前给药，孵育一段时间，再给与lps刺激，然后提取rna, 进行PCR分析in vivo, 也是提前给药，再给与lps.想请教一下，如果提前给药，然后lps刺激，发现NF-kb 等被抑制，那么同时给药或者先给与LPS 刺激，然后再给药，对于研究机理上有什么区别。我现在做的一个药物，发现在小鼠急性炎症模型上（LPS刺激），发现提前6小时给药，也能抑制tnf-a, il-6等细胞因子的 ...