细胞周期/增殖/凋亡检测

shao74 最近在做细胞凋亡方面的实验,碰到的问题是手头上的细胞系对凋亡不是很敏感,所以不知哪位有更好的建议,谢谢!freecell 这个不好说啊，看你主要做哪个组织的细胞凋亡,什么因素引起的细胞凋亡。Fasta921 所以要自己筛选敏感的细胞株啊，不同细胞系对同种基因或药物的耐受性不一样的。goldendoctor Hela 是比较常用的，你可以试一下本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法 ...

ziweihua 求助高人啊，我想用斑马鱼整体胚胎检测其细胞凋亡情况，选用的Roche的in situ cell death detection kit, POD. 按照其中的贴壁细胞或细胞涂片的方法做了两遍，可是连阳性对照都没有信号。后来查找到一篇论文中的方法，如下：a，收集胚胎后用PBS清洗，转移到1.5ml的EP管内，4%多聚甲醛PBS固定过夜b，用PBS配制 25%50%75%的梯度酒精，每次5min将胚胎梯度脱水。c，用-20度预冷的丙酮冷冻 ...

ysh2006 我现在手上有一个携带杆状病毒一凋亡抑制基因（此基因属于凋亡抑制基因家族成员，其家族其它已发现的成员均在人肿瘤组织中有表达，并具有或多或少的临床意义，这是我们选择此基因的依据）的质粒，在昆虫细胞中证实此基因具有抑制凋亡的功能。我准备做如下实验：质粒扩增、转染入肺癌细胞株，验证其是否具有抑制肺癌细胞凋亡功能，如果有表达，则继续行动物实验验证，最后一步检测其在人肺癌标本中的蛋白表达及其与临床病理特征之间 ...

suxiang0815 在氧化应激的过程中，有哪些通路可以直接或者间接的作用于JNK，而影响细胞的凋亡。请各位高手指点一下suxiang0815 自己顶一下骑猪逛大街 帮你顶一下，我也想知道doctormy suxiang0815 wrote:在氧化应激的过程中，有哪些通路可以直接或者间接的作用于JNK，而影响细胞的凋亡。请各位高手指点一下您所讲的问题即为在氧化应激的过程中JNK通路的“cross-talk”问题。目前研究的比较 ...

feroger 请问在平滑肌细胞增殖信号通路中，NF-KB、EKR、PI3K三条通路是并列的吗？还是NF-KB是EKR、PI3K其中一个的下游信号通路？谢谢yhwangcams 这个问题？有点......还是多看看文献，建议先看综述。feroger 我就是看了文献后才糊涂的，有的说3条并列，有的说NF-KB是EKR的下游靶点，更多的说NF-KB是PI3K的下游靶点。刚刚接触这方面的信号通路，望多指教，谢谢！yhwangcams 呵呵，好多 ...

wangjinsheng 准备开题了，打算制作动物肿瘤模型，然后加以治疗后，观察肿瘤的凋亡情况，判断凋亡通路。有师兄介绍让我做NFKB、Caspase3、Tunel，可是我觉得这几个指标能够解释得了我的治疗是否促使肿瘤细胞按照某种凋亡通路来凋亡吗？因为我是临床专业的，基础实验方面的知识很欠缺，所以请专家指导一下，如何选择指标来做？谢谢。zhengfeifei 做个MTT、Caspase3、Tunel检测凋亡。 NFkb是转录 ...

月朗渔 我的试验是要先感染动物，再从动物体内取出待检测的细胞，测定细胞的凋亡。我现在做的有吉姆萨染色观察细胞形态、上流式检测早期和晚期细胞凋亡率。正准备做的有电镜观察细胞亚单位形态变化，caspase-9、caspase-3和细胞色素C释放的检测。因为我做的是线粒体途径的凋亡，所以选了这些指标，不知道是否合适？如果要排除死亡受体途径不知道还要检测哪些指标？还请各位高手指点一二。月朗渔 怎么没人回啊？还请做过凋亡检测的朋友 ...

lxzhjiang 查了很久都没有查到在衰老组织中，P53表达在什么位置，哪位大侠帮帮忙！happytears 应该跟正常组织相同，只是ｐ５３功能或胞核定位发生改变lxzhjiang 哦！谢谢！其他大侠还有没有好的建议？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

perfectstory 各位大虾，小弟准备做白血病或淋巴瘤细胞的凋亡方面的研究，不知道最新有关细胞凋亡方面的信号途径有没有新进展啊？呵呵，比如核因子途径，NOTCH，MAPK，FAS之类的，谢谢哦xls_2008 我也是刚刚接触凋亡信号转导的研究，还有好多东西要学习，希望以后能多交流交流，比如最新进展、试验技术等等，嘿嘿。。。xls_2008 QQ983892357 注明：同路人清清河水 同路人ljldella 有不有成骨细胞方面的啊本 ...

nydljl 最近在做高糖诱导心肌细胞凋亡，多数文献提示用其它糖对照，渗透压不是主要的凋亡诱因。那么胞外的葡萄糖是怎样通过胞膜，哪些特异的通路起作用（培养中没有胰岛素），产生oxidative stress，AGE损害等，诱导ROS，线粒体等导致凋亡？我找的很多文献基本是在下游的机制，具体讨论胞外high glucose开始是如何进入的文章较少。不知有没哪位战友做过这方面的工作，指教指教。shqling Can I ask you a quest ...

yqsqzr 实验需要检测细胞凋亡，请问：1 共聚焦激光扫描显微镜是否可以用来做细胞凋亡的形态学检测？敏感性如何？这个方法好吗？磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法）是否可以用共聚焦激光扫描显微镜来观察结果，其结果有相应的处理软件可以分析吗？2 用于检测细胞凋亡的最佳方法是哪种？麻烦做细胞凋亡的高手指导一下，谢谢！xls_2008 FCMhappytears 建议提问前先搜索相关版面一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察：凋亡细 ...

yinhaipeng 打算做两种药物的协同作用，请问药物剂量如何选择？实验设计应该如何做呢？求 凋亡的信号转导通路，图片动画lwjssry Caspase-Cascadelwjssry Cellular-Apoptosis-Pathwaylwjssry Apoptosis-through-Death-Receptors灰飞与烟灭 有谁知道哪里有做实验的公司吗本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的 ...

yqsqzr 本人要研究巨核细胞的凋亡情况，检测caspase-3,8,9,初步判断其通过哪条凋亡通路起作用，有很多不懂之处，需要高人指点一下：1 如何检测caspase的活化2 若要检测caspase的量，应选择何种可靠简便的方法3 有专门的试剂盒可以用来检测caspase吗？非常感谢！！fghostyun 1. caspase活化会产生裂解条带，western blot可以检测。2. western blot可以半定量3. caspase的活性有试 ...

xueerzsc 我准备检测UV诱导后细胞的凋亡情况，我选用不同剂量的UV诱导细胞，然后24小时收集细胞，准备进行流失分析细胞的凋亡情况，可是我在收集细胞的时候把漂在培养液中的死细胞都扔掉了。请问漂在培养基里的死细胞要不要一起收集啊？？？lee800265 最好是一起收集，因为这部分细胞也算是UV后的反应，因此收集起来更能真实的反应细胞凋亡状态，而您也可能考虑到由于细胞培养而漂浮的死细胞，也可以通过收集正常组的漂浮细 ...

chenjun98ji 谁有关于CDC25C在细胞周期调控的线路图lwjssry .........................lwjssry ..........................本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

经历是财富 各位站友：为什么在分析mRNA稳定性的时候，要加入放线菌素D和放线菌酮，实验该怎么设计才合理？做荧光定量PCR分析的时候，该以哪种处理为基线？得到的数据该怎么处理？经历是财富 自己顶经历是财富 自己再顶ikewei 你的标题和你问的不太一致，“放线菌素D和放线菌酮在细胞凋亡的研究起什么作用？”我来试试回答你这个问题吧，我觉得可是是看刺激是通过已有的蛋白促发凋亡 还是转录合成蛋白来参与凋亡，因为放线菌素D可以抑制蛋白质 ...

peakhell 请问各位高手TNF-a诱导肿瘤细胞凋亡后，提取细胞蛋白做westernblot，IKB-a与NF-KB的水平是否一致啊一般认为TNF-a诱导肿瘤细胞凋亡后，促使IKB-a降解，而NF-KB从胞浆转入核内，那么我做westernblot，检测NF-KB的水平，需要提取核蛋白吗，如果只是按常规提取细胞蛋白，TNF-a诱导肿瘤细胞凋亡后NF-KB的水平是上调还是下调啊lwjssry 如果只是按常规提取细胞蛋白， ...

植物源重组人胰岛素生长因子融合蛋白（OsrIGF-1），胰岛素在无血清细胞培养中的最佳替代品

细胞凋亡的形态学检测1 光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态..查看原文磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法)磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细 ...

NK细胞又称为自然杀伤细胞，属于大颗粒淋巴细胞，来源于骨髓，占外周血淋巴细胞的5%~15%，是重要的免疫细胞。科学家在1975年首次鉴定到了NK细胞，这类细胞能够在缺少T、B细胞的情况下直接杀伤肿瘤细胞。与具有细胞毒性的CD8+T细胞不同，NK细胞杀伤肿瘤细胞时不需要预先致敏可以直接杀伤MHC阴性的肿瘤细胞，这使得NK细胞在过继细胞免疫治疗中被广泛应用。但NK细胞在外周血淋巴细胞中所占的比例较低，所以有必要建立一 ...