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细胞形态检测

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红细胞形态学诊断技巧(一)

1 . RBC 的 Hb 、网织 RBC 、 MCV 、 MCH 、 MCHC 及 RBC 体积分布宽度(RDW)是判定贫血类型重要依据: (1)Hb/RBC 比值:正常人: Hb/RBC 比值为 3 gHb/L=100 万 RBC/ μ L 即 3:1 。 AA 、溶血性贫血及继发性贫血等属此类。 3:1 者即为大细胞高色素性贫血 ,5% 。其网织 RBC 内嗜碱性网织增多,代偿性功能减低者,低于正常水平。多见于 AA ,但有不典型 AA(1/4)患者可有网织 RBC 增高。网织 RBC 计数 1000 个 RBC 中有多少网织 RBC ,以其 % 数表示,是一个比值数,不是绝对值。精确应计算绝对值或用流式细胞仪计数更 ...

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细胞自噬的研究方法介绍

【嘉美生物】正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:一、自噬诱导剂 (1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Chloride(氯化锂):IMPase 抑制剂(即Inositol monophosphatase,肌醇单磷酸酶)(3) Earle's平衡盐溶液:制造饥饿(4) N-Acetyl-D- ...

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【求助】转染对细胞形态的影响

蓝莓之夏 各位大侠:我做的是关于microRNA mimics 转染的实验,正在做预实验。之前从基因芯片中挑选出了microRNA, 然后合成了他的类似物,也就是mimics.。 我在转染进去24h之后,还要加入TGF-β进行刺激,观察转染的作用。现在我的问题是: 我选的microRNA mimics 是对细胞有保护抗纤维化作用的,TGF-β 是诱导纤维化作用的。转染进去又加入TGF之后,为什么转染了mimics的细胞的形态都是纤维化的摸样,而没有 ...

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【求助】利用流式细胞仪检测乳酸菌的细胞膜完整性

hhppli 我的实验:利用流式细胞仪检测乳酸菌的细胞膜完整性,采用荧光染料PI染色,样液只是乳酸菌的纯培养液,没有其它杂菌,得到的流式细胞二维图,见附件,左下为活细胞,右下为死细胞。发表文章后,编辑让我解释四个象限,并问为什么“左下为活细胞,右下为死细胞”。第二个编辑问的问题就更麻烦了:I miss percentage values on the quadrants and maybe a pseudocolour plot to better evaluate the am ...

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如何让支原体滚远点

据统计,大约三分之一的细胞培养物都感染了支原体!这些小东西神不知鬼不觉,侵入你的细胞。支原体大小一般在0.3-0.5um之间,最突出的结构特征是没有细胞壁,对作用于细胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明,支原体能耗尽营养物,促进代谢积累,导致pH改变,对细胞造成多种影响,包括生长状况、生化特性、代谢、免疫、以及细胞存活等多方面的改变,继而干扰实验结果,或造成无法解释的差异。更加不幸的是拯救被感染的细胞几乎是不可能的。因此 ...

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你的细胞受到支原体污染了么?

细胞培养被支原体污染是个世界性问题,在细胞培养中支原体感染发生率达到63%。支原体是一类无细胞壁,形态呈高度多形性,为圆形、丝状或梨形,其直径仅有0.13~0.18μm,变形能力大,故能通过滤菌器,最突出的结构特征是没有细胞壁,对作用于细胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明,支原体能耗尽营养物,促进代谢积累,导致pH改变,对细胞造成多种影响,包括生长状况、生化特性、代谢、免疫、以及细胞存活等多方面的改变,继而干扰实验结果, ...

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细胞爬片的保存和抗原修复问题总结

1.细胞爬片可以用含叠氮钠PBS液保存,但不知道具体浓度,请告知。答:加在液体中作为防腐剂的叠氮钠浓度一般为0.04–0.08%。但是我建议对于细胞爬片,还是尽量快的进行处理,以防不必要的问题!2.我的细胞爬片经过4%多聚甲醛固定,PBS冲洗后直接就放在了-20度,还能用于免疫组化吗?!答:应该没有问题,但是还是现作先染好些,以防抗原的丢失3.mRNA原位杂交经4%多聚甲醛固定,固定液需加DEPC水。其它建议用甲醇固定。-2 ...

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癌症常见症状大盘点

癌症(Cancer),亦称恶性肿瘤(Malignant neoplasm),为由控制细胞生长增殖机制失常而引起的疾病。作为全球较大的公共卫生问题之一癌症极大地危害着人类的健康并将成为新世纪人类的第一杀手。 由于癌症的发生部位、病理形态,以及发展阶段各有不同,因而各种癌症患者的症状会有差异,为了达到早发现,早诊断,早治疗的目的,根据癌症在中国的发病特点,汇总了11种癌的常见症状及高危人群,供临床医 ...

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支原体之检测:直接培养法

原理 直接培养支原体于培养基中,观察其生长及菌落生成。 特点 是目前最直接与灵敏之步骤,亦是用来评估其它侦测新步骤之标准步骤。 缺点 培养时间长,须3-5星期才能判断。有些支原体不能在培养基培养出来 (例如M. hyorhinis)。需同时培养支原体株作为正反应对照组,可能会造成污染。 材枓 dextrose、L-arginine HCl、Difco P ...

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支原体污染以及检测

支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2 um)并独立生活的微生物,约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性,可为圆形、丝状或梨形。 支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构,其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞微绒毛相似,但微绒毛电子密度比支原体小,且中央无颗粒群或中 ...

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人源细胞表达高活性天然细胞因子:细胞因子表达技术新趋势

来源于:ACROBiosystems USA 细胞因子简介 细胞因子(CytokineCK)是一类能在细胞间传递信息、具有免疫调节和效应功能的天然活性蛋白质,可以有效促进免疫细胞(如DC细胞,CIK细胞等)、干细胞的体外生长。根据细胞因子主要的功能可分为以下几类: 1,白细胞介素(InterleukinIL)由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子,在细胞间 ...

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细胞消化的个人总结

一、酶消化法 1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。 2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温 ...

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细胞凝集反应与细胞膜的渗透性

实验的原理: (一)细胞凝集反应 细胞膜是由脂类双分子层镶嵌蛋白质构成的单位膜,而脂类和蛋白质又与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质,具有使细胞凝集、血型鉴定、促进淋巴细胞分裂、防害抗虫等作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞外被的寡糖链相连接,起到“桥”的作用。 (二)细胞膜的渗透性 细胞膜是细胞与环境之间进行物质与能量 ...

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显微摄影术

实验用品 1.器材: 复式显微镜及其摄影装置、黑白胶片、显影罐、温度计、电炉、暗房袋、暗盒、相纸、剪刀、塑料盘、烧杯、量筒、天平、生物样品等 2.试剂: ①显影液 (D72通用显影液): 用50℃蒸馏水150ml先将小袋药粉溶解再将大袋药粉放入搅动至完全溶解加水至250ml.待温度降至20℃左右时使用. ②定影液: 用50℃蒸馏水150ml将药粉完全溶解后加水至250 ...

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原位同时观察病毒特异性CD8+ T细胞和病毒感染细胞

将检测病毒特异性CD8+ T 细胞的原位四聚物染色法与检测病毒-RNA+ 细胞的原位杂交法相连用,以评估免疫效应物病毒特异性CD8+ T 细胞和被感染细胞在空间和数量上的关系。

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斑马鱼神经元、神经嵴胚胎干细胞细胞运动和肌动蛋白的动态成像

我们以如何观察带有膜靶向GFP或生物传感器探头的活细胞内F -肌动蛋白的运动为例,描述了一种标记神经元、神经嵴胚胎干细胞并对它们进行成像,以分析细胞行为方式的方法。

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“黏着斑”的分子架构被确定

细胞外基质与一个细胞的肌动蛋白细胞骨架之间的物理联系由被称为“黏着斑”(focal adhesion)的细胞器组成,它们通过“整联蛋白”(或称整合素)发挥作用。它们在人体生理中具有根本的重要性,因为它们调控细胞黏附、机械传感和控制细胞生长及分化的信号。现在,“黏着斑”的分子架构已通过利用三维超分辨率荧光显微镜在纳米尺度上观测蛋白组织方式而被确定。

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杂交瘤细胞株稳定性的检查

杂交瘤细胞株稳定性的检查 在液氮中保存的细胞株及体外传代培养的细胞株,都需要定期检查染色体数和抗体产生能力,因有些杂交瘤细胞会逐渐丢失染色体,使产生抗体的能力丧失或减弱。此时需及时进行克隆化,保留稳定分泌抗体的细胞株。 1. 杂交瘤细胞染色体检查 【材料和试剂】(1) 秋水仙素。(2) 甲醇,冰醋酸。(3) Giemsa染液,玻片。【操作步骤】(1) 取传 ...

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用有机溶剂固定细胞爬片、甩片或切片

用有机溶剂固定细胞爬片、甩片或切片 所有的固定方案必须做到:①防止抗原丢失;②维持细胞正常结构;③尽量使抗原保持能与抗体结合的状态。 常用的固定剂种类很多,固定剂的选择取决于被研究抗原的性质及所用抗体的特性。固定剂可分为两大类:有机溶剂和交联剂。有机溶剂,如乙醇和丙酮能够去除脂类物质,使细胞脱水,把蛋白质沉淀在细胞结构上。交联剂一般通过自由氨基基团把生物分子桥连起来,形成一个相互连接 ...

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51Cr释放试验测定NK细胞活性

51Cr释放试验测定NK细胞活性【基本原理】Na251CrO4能进入到增殖的细胞内,与细胞浆蛋白质牢固地结合。当标记的51Cr细胞受到损伤或死亡之后,即可释放出51Cr。51Cr辐射γ射线,通过测定受损伤或死亡靶细胞释放到上清中的51Cr,即可计算出NK细胞活性。【试剂及材料】(1) 铬酸钠(Na251CrO4): 51Cr的物理半寿期为27.72d。(2) 十二 ...

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