细胞培养

强少1988 请问细胞培养使用的Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) (Gibco)，写文章的时候需要填产品公司，产地，国家这三个信息。大鹏鸟 GIbco已经被Invitrogen收购，可以写Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM, Invitrogen, CA, USA)，或者写(Gibco, Carlsbad, CA, USA). 大鹏鸟 GIbco已经被Invitrogen收购，可以写Dulbecco's M ...

liuzm021 如题，谢谢。xiaojianmao 都是离子，应该可以吧……建议灭完分装……看到染了直接丢掉……xiayuxue 可以呀，为什么不能？roy2929 补一点超纯水进去再灭吧，会有蒸发~liuzm021 多谢各位，我自己也觉得可以。不过最好还是少灭几次吧本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

cynthia_rui 求助！！！细胞转到6孔板培养后长得一直很慢，目前贴壁50%左右，能提RNA不？是不是一定要等到长到80%才能提啊？有没有什么具体的操作办法让细胞在胰酶消化时损失小一点？请各位大侠指导，感激不尽！selleckchem01 1，六孔板的细胞长到50%会有点少，不过如果很着急也是可以提取的2，楼主可以用PBS洗掉培养基后，不用胰酶消化，直接在六孔板中加入trizol裂解~zitong1983 selleckc ...

dongfangzhizi06 打算培养成骨向诱导BMSCs，请问：诱导剂是溶于培养基中保存（4度和-20度）呢，还是单独保存每次用时再混于培养基中呢？如果是后者，又该在什么温度下保存？dongfangzhizi06 自己顶一下！ruiteluoshuixiu 我觉得是要单独保存啊，如果混了的话，容易影响效果的dongfangzhizi06 谢谢！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都 ...

尘朵朵 请问用过transwell小室的战友们，你们用它种细胞时的密度+时间是多少啊（加药之前）。我每次也没计数，就是一个25cmXcm的培养瓶，长满之后消化，每个小室种250ul细胞，一共12个小室，长至第二天约16小时。不知道是否太满了？请各位提出宝贵意见哈！先谢谢了！ciliary 你好，我每次都是计数的，养的是HUVEC，每孔细胞数为5×10^4，每孔是100ul，一般测迁移，6-8小时就可以了，我最长做过24小时，觉得 ...

淡墨留痕 我们最近在培养ＨＣＴ１１６细胞，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢五月鱼 你好， 我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。tianyayangg ...

256k 实验要抽血，提取血中的单核细胞、巨噬细胞、DC细胞，然后提取RNA。------------------------------------背景线。提取RNA不可能一次成功，如果多次做就要反复抽自己的血，太血腥也太打击积极性了。我设想：能否，分离出的单核细胞扩大培养，再传几代，以扩大细胞数目。问题：单核细胞能传代么？能扩大培养么？ningmeng1119 提取出来后你可以把细胞保存起来，需要的时候拿出来复苏直接提取RNA，可以试一下256k 谢谢 ，这也是 ...

观天 有用钒酸钠（sodium orthovanadate）、氟化钠（sodium fluoride）做细胞培养抑制磷酸酶活性的吗？（不是提蛋白的cocktail）请问使用浓度是多少？有一篇paper配的钒酸钠stock pH=10,需要这么高吗？同一篇paper又-80°C保存，-20°C容易降解吗？观天 已经知道了。wangyananxy 同问，求楼上解答！谢谢观天 使用浓度因细胞而不同，可用MTT确定；配制：stock pH=10时以单体形式存在； ...

ez815 各位战友，请问gastrin怎么溶解？我买了想加在细胞培养液中，但不知道粉末怎么溶解？急呀！紧急求助！在此谢过！zhujoker http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=gastrin看看人家是怎么做的？kuailecaoyang 请问一下问问题的战友已经知道怎么溶解了吗，gastrin？我也想做，但是也不知道如何溶解。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷 ...

紫色云龙 本人初做细胞，想各位大虾多多指教。不胜感激。目前的课题做wista大鼠肾上腺细胞原代培养，（也可以做人肾上腺细胞，可以买的到，考虑到没有经验，加上大鼠肾上腺提取也可以做）。试 剂：hank‘s缓冲液（漂洗用），培养基【DMEM/F12，gibco胎牛血清（用10%），双抗（青链）（用1%）】，胰酶（用大概0.1%），胶原酶1型（用0.1%），透明质酸酶（未到货）主要仪器:常规东西（枪头，酒精灯，打火机等），3套取材器械，400目不锈钢网筛，5 ...

七叶禾0916 想要将细胞培养板重复利用，要怎样处理呢，有人说用酸泡过夜，再用自来水和蒸馏水冲，再用酒精浸泡过夜，再紫外灭菌2h，不知应该用什么酸泡，这样处理效果怎样？求高手指教！！！wendywan 可以用酸泡一夜，然后单蒸水冲掉酸，后双蒸水冲至少三遍以上，这是最少的。然后紫外灭菌，时间可以长一些，放在超净台里照着就好了。酸一般可以用浓硫酸加重铬酸钾，比例在网上查一下就可以了！完了之后，可以在用之前重新包被板子，这样的话，效 ...

一光年 最近要做生殖的细胞方面的实验，前期一直用在垂体细胞原代培养，但是一直困扰没有促性腺激素细胞系，但是在网络中搜索，发现老外的文章中经常提到αT3-1，LβT2 或LβT4细胞系，在ATCC等知名的细胞库也未发现这些细胞系，不知道各位高手指点在哪里可以找到这几种细胞系？不甚感激！！veimojie 我一直也在做这方面的研究 什么地方能有啊 ？banana_smile 我也想做这方面的研究，恳请知道的大虾告之beastjane “一光年 ...

杨蕾医生 PBS是为了洗掉培养基 以便胰酶的消化 可是 能否用双蒸水呢lmnsmu 不可以用ddH2O，它里面没有离子，渗透压与细胞内液不同，会导致细胞水肿。不过偶尔用一次，时间短也不会有太大的影响。杨蕾医生 lmnsmu wrote:不可以用ddH2O，它里面没有离子，渗透压与细胞内液不同，会导致细胞水肿。不过偶尔用一次，时间短也不会有太大的影响。嗯 有道理 谢谢指点啦knightkidd 考虑渗透压！不然全爆了~本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用 ...

妍会 最近在养HCT116细胞，DMEM+10%胎牛血清，感觉细胞生长状态不好，虽然2天换液，但是培养基里悬浮有很多死细胞，细胞生长缓慢。最主要的，贴壁的细胞中有很大团的东西，又不像是细胞，消化之后，那些大团的东西就成了大泡，比正常细胞大数倍。养了大约2周后发现正常细胞变少了，大泡反而增多了，好像细胞被吃掉了一样。非常想知道是什么原因，不知道这种细胞状态做了转染之后会是怎么样的？急求高手指教！先谢了！zhangshuxi ...

bbdeng 有没有红细胞裂解液的配方？本人试了碧云天的红细胞裂解液，效果不大好，请高人指点！dnazyme http://baike.baidu.com/view/2601370.htmhttp://www.genialgenetics.com/products/reagents/erythrocyte-lysis-solution.htmlCOMPOSITION AND COMPONENT DATAPrepared or working solu ...

zcy20002001 请问上海哪里有可以做细胞低氧培养的地方，本人想做低氧条件下细胞的信号转导，谢谢！j19s87x 有意可以联系我QQ：59405497 以前做过，也在上海zcy20002001 没有QQ号，请问你在上海哪个大学或研究所，或者留一个msn细胞超人 现在很多人都在作信号转导 ，我女朋友博士课题也是在做，挺麻烦的，要做很长时间常能出结果，你去别人那儿做是啥意思，花钱用人家设备，还是跟他们老师合作。北京这边很多也是做低 ...

cell100 最近用ly294002处理2种细胞系，添加浓度为20uM处理2-12小时，wb检测p-Akt的量发现不但没减少，反而增加，很奇怪的！百思不得其解，不知是何原因？用50uM处理时也是这样?看来只有向高手求助了。cell100 用50uM处理后的结果也差不多，请高手帮忙分析一下原因，呵呵shutaozheng_824 其实，我也出现过类似的情况啊！当时我在用MAPK/ERK1/2 特异性抑制剂U0126预处理食管癌细胞 ...

andyjiang_007 请问在培养基名称后面的W/O是什么意思呢？比如：LM|MEM/ALPH W/OMEM-Eagle Earle's Salts with L-Glutamine, w/o Sodium Bicarbonate等等xdb86 withoutylhuang0502 补充一下，W/O是美国人常用的简写方式，但是正规发表的文章，一般没有人这么写（目前还有看到二般的），相应的， w/自然就是with啦。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前 ...

entmao 我做的是喉癌HEP-2细胞培养，要用胰岛素刺激，浓度5微克/ml,不知道临床用的普通胰岛素可不可以用。另外临床用胰岛素都是多少多少单位，不知道1U胰岛素等于多少微克。请各位大侠们指导，多谢啦。ylhuang0502 这个我是外行，但是胰岛素作为一种多肽，LZ要保证它能透过细胞膜，所以一般商用多肽类的抑制剂等试剂用于细胞时，都会连接TAT等信号肽，以保证能透过细胞膜。这一个很重要，希望LZ选用临床用的普通胰岛 ...

375308329 我用雷帕霉素50、100、200uM处理了细胞24小时，然后测了个MTT但是一点趋势都没有，想请问有哪位高手做过这个药的相关实验？非常感谢！jz2298 什么细胞？小有 这个药是典型的诱导自噬的chaomindai 单用这个药物处理细胞，在低浓度时对细胞几乎没有影响。我曾用rapamycin 100nM-100uM处理cortical neuron，对neuron影响不大，但在加H2O2的同时加rapamycin ...