研究体外培养细胞成功率.主要针对原代培养的动物和人的组织细胞,由于培养的目标细胞很多是成体细胞和分化终末的细胞,缺乏肿瘤细胞无限增值的能力。容易导致培养失败,为了在实验中提高原代培养的成功率,应注意一下几个方面的因素。一、取材(一) 细胞的种类根据实验的目的和要求,尽可能选择具有分裂增殖能力的细胞,如上皮细胞、成纤维细胞等。原代培养肿瘤细胞较正常细胞容易,成功率也较高。(二) 取材的部位在实验目的和要求允许的情况下.取材应 ...
科幻电影中将冻存若干年的生命体重新解冻复活的情节在生命科学研究过程中每一天都在上演。为了将每一种有生命的细胞较好的保存其原有的细胞特性或者长久的保存种质资源,实验人员往往将细胞用特殊配置的细胞冻存液保存于-196℃ 的液氮,使得细胞暂时脱离生长状态,等到实验需要的时候再从液氮中取出复苏应用。在这一看似神奇的生命存储过程中,我们不禁要问,这是如何实现的呢?其实,细胞冻存和复苏的教科书和实验手册上面都有。小编不想再重 ...
您还在为买不到高效能进口血清苦恼吗?请试用我们的全新血清替代物BSSubTM-XF 细胞培养添加剂BSSubTM-XF 细胞培养添加剂BSSubTM-XF 是细胞培养添加剂,能够很好的替代细胞培养基中的 FBS(胎牛血清),是专为各种哺乳动物细胞的体外培养而开发的。 BSSubTM-XF 已用于各种原代细胞和细胞系的培养。BSSubTM-XF 无异源动物成分,不含牛或其它动物来源蛋白。特色和优点性价比高,无异源/血清替代物细胞生长的天然营养 ...
HUVEC 分离自脐带静脉,一般用于生理学和药理学研究,例如大分子转运、血液凝固、血管发生和纤维蛋白溶解作用。PromoCell 提供取自单个供者的 HUVEC,混合来源的则混合有至多四个不同供者。(Human Umbilical Artery Endothelial Cells (HUAEC) from the same donor are available on request.)此外,根据信号传导研究的不同,可以为血管生成研究和其他依赖 VEGF 的信号通路研究(相 关内皮生长 ...
非血清、非动物来源之免疫细胞培养营养补充剂UltraKURETM 為非血清、非动物来源之细胞培养补充剂,经实验证实能取代人类血清,在 CIK 细胞培养有极佳表现效果。来自美国最先进製造技术。每批次 UltraKURE™ 皆经严格测试,品质保证。批次间稳定性高。UltraKURE™ 优点• 无动物来源/无血清之细胞营养补充剂• 仅需 2.5 % 即可获得比 5% 人类血清更高的生长倍数• 提供免疫细胞自然生长环境• 可与多种培养基搭配使用,均可获得极佳的结果• 严格的安全性管控:− 细菌 ...
由于欧盟关于化学物质的毒性风险评估(REACH EC No. 1907/2006)法规的改变,以及目前不断发展的替代方法的需求,以取代动物实验为目标,在体外模型基础上进行肺毒性的评估的技术,显然是非常有必要的。迄今为止,国内外的细胞体外毒性测试实验研究中,仍多采用浸没式细胞培养方法进行。然而,在浸没条件下的颗粒物暴露并不符合在细胞体内的真实情况,并可能影响研究受试物(颗粒物、气体等)的物理化学性质。早在 1999 年,德国 Aufderh ...
Transwell 小室在细胞实验中很常用,共培养实验、趋化实验、细胞迁移、细胞侵袭以及药物转运实验都会用到,但小室的规格有很多种,不同的实验需要用到的小室规格也不同。根据 transwell 板的不同,transwell 小室可以分为 6 孔板小室、12 孔板小室和 24 孔板小室以及和 transwell 皿配套的 75 mm 直径的小室;根据孔径的不同,从小孔径到大孔径又分为 0.4μm 规格、3μm 规格、5μm 规格、8μm 规格,不同实验对小室孔径的要求也不一样。小于 3μm 孔径的 ...
1.一体化小室——细胞培养&显微成像两用玻片/皿细胞免疫荧光实验你是怎么做的?还在用小玻片,先泡酸、再晾干、再 coating、再种细胞、染色、最后封片成像?那您太 out 了吧!使用 ibidi 产品,先养细胞、然后直接固定、染色、成像,在培养皿/玻片上全部搞定!绝对能帮您把细胞养好、又帮您省时省力的获得漂亮的成像结果(见图 1)!图 1. 传统爬片方法与 ibidi 产品免疫荧光实验比较2.ibidi 产品底部媲美盖玻片厚度,为高分辨率显微成像而设计的光学特性德国 i ...
亲,你还在为流动状态下的细胞培养而苦恼吗?不要怕,ibidi流体剪切力系统为您提供完美解决方案!通常我们都是在静止状态下进行细胞培养(图1右)。但是在体内,很多细胞都暴露在机械剪切力下(图1左),比如血管内皮细胞。如果您的研究涉及剪切力,或者需要在流动状态下进行细胞培养,那么您关注ibidi流体剪切力系统就对啦!图1. 流动状态、静止状态下进行细胞培养的示意图为什么要在流动状态下进行细胞培养呢?在流动状态下和静止状态下 ...
南国小医 近两周SD大鼠的海绵体平滑肌细胞的原代培养老是感染细菌,早上还是好的,到下午就感染了,因为是新手,求一些更详细的操作注意事项,或者一些可以避免的小窍门。万分感谢dachong99 1. 检查培养箱和培养基,可将空白培养基在培养箱中培养来检查。2. 具体手术器械、操作者、操作环境等。这个环节比较多,需要一一排除。建议严格按照protocol进行实验。南国小医 但是我和师兄两个各自培养原代的,师兄是好的,他也是在旁边监督我全程操 ...
mhy叶可 大家好,我是新手,第一次养细胞,恳请各位大虾给点关于培养K562以及K562/A02的建议。K562是悬浮细胞吗?还是半贴壁?半贴壁的话应该怎么换液?请各位老师不吝赐教,多谢,多谢。yupingwang 悬浮细胞,离心后去上清,培养基重悬mhy叶可 多谢,以后还要多多请教,呵呵mhy叶可 请教楼上老师,k562/A02耐药细胞株培养时,怎么维持它的耐药性,加阿霉素大约从什么剂量开始加?百迈生物 mhy叶可 wrote:请教楼上老师 ...
暮色英雄 我是用无血清NB培养基+EGF+bFGF+B27+p/s双抗的培养基培养的胃癌原代细胞,培养基已经用0.22μm过滤器过滤除菌,但是培养细胞之后出现很多小颗粒,不知道是什么东西,这照片是昨天照的,今天再观察的时候这些小颗粒已经长满了,我师姐帮我看了说是污染,然后我把细胞倒掉了,但是她也不知道这是什么污染。希望各位大侠能帮小弟看看这到底是不是污染,是什么东西?谢谢了这是20x镜拍的ecust小熊 真菌污染吧?双抗无 ...
bahai 各位老师好,最近在做阴道壁鳞状细胞的原代培养,一直不见起色,培养不成功,情况就是没有任何细胞长出来,特来请教大家。看了好多文献,看了很多细胞培养的资料,咨询过很多同学,然后做了多次,都是没有细胞,呵呵现在有这么几个问题:1:培养基的选择:文献中都说用的是K-SFM培养基,我现在是用了K-SFM培养基和DMEM/F12两种培养基同时做,希望对比一下两种培养基的情况。结果都是没长出来,DMEM/F12时,24小时候, ...
tangc233 一直在养骨髓间充质干细胞,年前出现了一次细胞污染,年后我改用进口血清,同时每次配完液(低糖DMEM+10%血清+双抗)后都用滤器过滤一下,最近发现细胞不肯长,甚至之前都贴壁生长的细胞换完液后2天大半都不见了,但还可见一些贴壁细胞(换液前后的培养液配置都是一样的),现在我也不知道问题出在哪里,还请各位高手多多指教!宋丽娟1016 我想,你可以从以下几个方面考虑:1,是不是你的双抗浓度太高了呀2你的细胞是第几 ...
holybible1263 请问体外做hepG-2,体内做H22,有可比性吗?fuxiao29 我个人认为体外做hepG-2实验,体内也应该用同一种细胞系做,这样才有可比性。holybible1263 谢谢,不过HEPG-2没有办法做体内呀,体内要用什么呢?fuxiao29 可以做体内实验呀,你可以将你用的质粒转染到HEPG-2细胞系里,构建稳定细胞系,然后注入动物体内。xiayuxue 据说HepG2很难成瘤本文由丁香园论坛提供,想 ...
chuenshui 细胞株:LS 174T来源:中科院上海细胞库培养基 :DMEM 10%小牛血清问题:刚买回来时传代2次,都没问题。扩大培养时发现,细胞养起来时培养基发紫,0.25%胰酶消化传代,24小时候细胞50%不贴壁,细胞还呈发亮状态。尝试解决办法:更换培养基,10小时后培养基发紫,细胞依然呈漂浮状态。无解决现象。请问有什么办法可以解决,培养箱应该没问题,箱子里有同时培养的其他细胞,无异常现象。布布vs果果 细胞有抱团生长现象吗?s ...
haofeng 无血清培养MDA-MB-468细胞24小时,细胞漂起来,细胞周围出现淡黑色半透明的圈;正常10%血清培养时也有,不知道各位高手,有没有人见过这种情况,有什么建议?hngwzhu 你的所谓的黑圈有没有增多的情况,如果有的话可能是酵母污染!如果没有考虑是不是细胞本身就污染所谓的黑胶虫。drcells 不像是传说中的黑胶虫污染。。。细胞系中这种“污染”比较普遍。特别是对相对生长周期比较长的细胞。和死细胞成正比。它们可大 ...
lesenhower 想到一个问题:体外切断了正常的血供,器官的营养交换取决于简单的灌流。对于血管有畸形的器官,体内会因血供不足发育异常;如果将该器官放在体外培养,由于不依赖血管了,而直接由培养基灌流提供营养,是否就不会存在“血供不足”的问题了,所以反而可能发育正常了?换个说法,对于体外培养的器官,其内部血管是否存在,正常与否还有区别吗?有没有人能给这个问题以确切的答案?谢谢!孤单走着 版主太小气,2叮当,过年啦!整个50叮当。 ...
xiaoerlong 求“体内培养”定义lightningwing 能否说的详细些,是抗体这类的体内培养,还是生物医学工程相关的体内培养?xiaoerlong 生物医学工程相关的体内培养(细胞培养方面的)xiaoerlong lightningwing wrote:能否说的详细些,是抗体这类的体内培养,还是生物医学工程相关的体内培养?生物医学工程相关的体内培养xxsl_2007 还真不好回答。体内培养是在动物体内生产所需物质的方法,如 ...
lingdestar 想用western检测一下刺激后的细胞外释放的蛋白,请教各位高手,怎么浓集培养基呢?liubingood 使用冷冻干燥机可以浓集培养基并且保持培养基中的蛋白活性,原理是将含培养基冷冻到冰点以下,使水转变为冰,然后在较高真空下将冰转变为蒸气而除去的干燥方法。培养基可先在冷冻装置内冷冻,再进行干燥。但也可直接在干燥室内经迅速抽成真空而冷冻。升华生成的水蒸气借冷凝器除去。这种方式的使用的前提是你们实 ...