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问:BAF cell的来源是什么?有什么特性和用途呢? 答:ATCC上没有你所谓的BAF cell,DSMZ上有两种BAF cell,如下: Cell line:BA-F8 Cell type:mouse hybridoma(anti-rat fiber/myosin) Origin:this hybridoma cell line was described to secrete a mouse ...
tydyhan: 我一直做细菌这块,对病毒操作不是很懂,请教大家: 建立表达某基因的重组逆转录病毒载体的B16细胞系 含某基因的重组逆转录病毒载体已获得,需转染PA 317包装细胞,通过G418筛选获得表达某基因的重组逆转录病毒。Polybrene进行转染B16细胞,筛选阳性转化克隆,获得稳定表达的B16细胞株。这里怎么具体进行操作?? 丁香园网友adychen认为: 1、首先最好选择的是带EGF ...
1、毕氏酵母氯化锂转化法 (1)试剂 1M LiCl(用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌;必要时用消毒去离子水稀释) 50% PEG3350(Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌,用较紧的盖子的瓶子分装) 2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl pH8.0 1.0mM EDTA)-20℃保存 注:醋酸锂对毕氏酵母无效,仅氯化 ...
在甲醇酵母中表达蛋白的步骤比大肠杆菌复杂得多。首先要考虑选用什么载体。一般人们趋向于使用分泌表达载体,以便于蛋白的纯化。但有的蛋白并不适合于分泌表达,如一些胞质蛋白,非糖基化蛋白等。此外分泌表达的蛋白信号肽存在一个效率问题。有的蛋白即使存在信号肽,也不能分泌。并且有的分泌蛋白较易受到蛋白酶的降解。所有这些因素都需综合考虑。 1、酵母菌株的分离纯化 接种GS115于5ml YPD液体培养基,30℃ ...
分子生物学技术的发展为利用生物反应器生产外源蛋白提供了许多方法和手段。到目前为止,已发展出了大肠杆菌、酵母、昆虫、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统,其中酵母表达系统是最近发展起来的新型表达系统。最先使用的是酿酒酵母,1981年Hitzeman等用酿酒酵母成功地表达了人干扰素,但该系统具有一定的局限性,缺乏强有力的启动子,分泌效率差,质粒不稳定等。因此,人们在此基础上又寻找了新的酵母表达系统&mdas ...
基因表达是分子生物学领域的重要内容之一,人们利用基因表达技术制备各种目的基因的重组蛋白质,在分析基因的表达与调控、基因的结构与功能、基因治疗以及生物制药等领域均取得了令人振奋的成果。其中,酵母表达系统拥有转录后加工修饰功能,操作简便,成本低廉,适合于稳定表达有功能的外源蛋白质,而且可大规模发酵,是最理想的重组真核蛋白质生产制备用工具。 1、酵母表达系统的特点 酵母是一种单细胞低等真核生物,培养条 ...
1、舒林酸和尼美舒利的溶解方法的问题: 问:最近在做试验时发现舒林酸和尼美舒利两种药物很难溶解,加入DMSO后可以溶解,但是再加入1640培养液稀释时又出现结晶,而且很难溶解。有什么好的办法吗? 答:(1)可以先把所需药母液加如一个小安剖瓶,再加入培养基,用枪多吹打几分钟就会溶解。 (2)如果还是溶解不了,可以换用乙醇试试。 (3)配制药母液时浓度要尽量高,这样稀释后培养基中的DMSO浓度才越低。 ...
Analysis Kits (Chips and Reagents) Experion Automated Electrophoresis — Sample Types What types of samples can the Experion separate and analyze?The Experion automated electrophoresis system se ...
什么是外周血干细胞移植? 干细胞由骨髓大量生成,其中少量的干细胞被释放到血液中,这就是外周血干细胞(PBSC) 通过使用一种叫做Filgrastim的药物(重组人粒细胞集落刺激因子),我们能够增加释放到血液中的干细胞数量,从而有可能直接从血液中采集到干细胞移植所需要的足量的干细胞。 外周造血干细胞移植的现状: 1979年Goldman等为一组加速期或急变期慢性粒细胞白血病患者移植初诊时采集冻存的外 ...
【参考值】 自动计数仪法为:男性4.1~10.4×109/L,女性4.1~10.8×109/L。 【分析变异】 自动计数仪法的变异系数CV=4%。 【生理学变异】 1、升高 婴儿约高150%,吸烟者约高37%,妊娠约升高20%,昼夜节律(晚上)约高16%,饮酒约升高14%,4~10岁的儿童约高12%,肌肉活动约升高12%,女性黄体期约高9%,周年节律约升高7%。 2、降低 ...
旧称红血球。血液中的一类细胞。除骆驼和鹿的红细胞呈卵圆形状外,人和大多数哺乳动物正常成熟的红细胞呈双凹圆盘形,中央较薄,周缘较厚,平均直径红7~8微米,无细胞核和细胞器,胞质内含有血红蛋白,因而使血液呈红色。成年男性每立方毫米血液里红细胞为400~500万个,成年女性为350~450万个;婴儿和高原居民红细胞数较多。红细胞的主要机能是运输氧和二氧化碳。红细胞的特殊形态增加了红细胞的表面积,缩短了细 ...
概述及注意事项: 细胞学检查包括有细胞的涂片与染色技术,其来源先于组织切片技术,目前是较为常用的病理检查方法之一。它所运用的范围也很广泛,如女性生殖系统、食管、胃、肺、浆膜腔积液、泌尿管道、鼻咽部等部位的脱落癌细胞,以及胸、腹腔的肿块、淋巴结、乳腺、和其它组织器官的细胞学诊断。 标本采集注意事项:: 1、要在较为准确病变的部位采集病变标本。 2、标本应及时处理,固定。以防止细胞自溶**。 3、 ...
由于现在国内的细胞库资料不是很充足,而且比较零散,包括建株时的技术层面不一,没有比较严格统一的操作规范,所以在遇到比较重要的实验项目时,一般都比较倾向于购买国外的细胞株,但购买国外细胞株需要考虑的因素有如下几点: 1、细胞株的生物等级,由于有些细胞株及菌株属于管制品,所以从国外购货比较麻烦。 2、在购买国外细胞株时,需交待国外加比较多的干冰(一般在13公斤以上,采用比较密封的泡沫盒加套纸箱。 3、 ...
AO / EB原理与流程 zhongyisheng: 1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(V ...