细胞百科

一、微量全血培养 (一)原理 人体外周血中淋巴细胞是成熟的免疫细胞，正常情况下处于G。期不再增殖。PHA(Phytohemagglutinin，植物血凝素)是人和其它动物淋巴细胞的有丝分裂刺激剂，它能使处于G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞，进入细胞周期开始旺盛的有丝分裂。 人体微量全血培养是一种简单的淋巴细胞培养方法。此法采血量少、操作简便，在 PHA作用下进行短期培养即 ...

【实验目的】 通过细胞融合技术，初步了解染色体提前凝集标本制备原理、方法及间期细胞三种时相的提前凝集染色体特点。 【实验用品】 一、材料 人宫颈癌上皮细胞(HeLa细胞) 二、器材和仪器 显微镜、离心机、水浴箱、热吹风机、10ml刻度离心管、5(1/2) 针头注射器、试管架、染色槽、废液缸、吸水纸、擦镜纸、冰冻载玻片、香柏油瓶、记号笔、酒精灯。 三、试剂 5 ...

第一阶段：1．准备合适体积的由25%体积新培养液和75%旧培养液（即细胞原先适应的培养液）组成的混合培养液I。2．将细胞以通常分装时使用的最低分装密度的两倍分装到混合培养液I中。3．使细胞生长到通常培养时的较高密度，监测细胞生长参数。4．继续以步骤2中的密度分装细胞到新鲜的混合培养液I中，直到生长参数达到可以接受的水平。有时候分装一次就可达到要求。5．一旦细胞稳定下来，以通常使用的最低分装密度分装 ...

【实验目的】1.掌握相差显微镜的使用。2.掌握培养细胞的计数方法。3.掌握细胞融合的实验方法及融合率的计算。4.熟悉体外培养细胞的形态和生长状态的观察和判定方法。【理论基础】主要联系理论课“细胞的研究方法”一章的相关内容。1.细胞融合技术基本概念杂交细胞的基本概念：具有两个细胞的特性常用的促融方法：PEG、仙台病毒、电穿孔主要应用：基因定位、单克隆抗体制备等2.体外培养的细胞的两种状态(贴壁型细胞 ...

【实验目的】 了解电子显微镜的基本原理及电镜生物标本的制备方法和观察。 【实验用品】 一、材料和标本 家兔一只。 二、器材和仪器 H—600透射电子显微镜、S—450扫描电子显微镜、超薄切片机(AO型)、解剖镜、震荡器、恒温箱、临界点干燥器、JB一3型离子镀膜机、单面刀片、铜网、解剖器材。 三、试剂 乙醚、2.5％戊二醛(0.1mol／L(pH7.4)二甲砷酸钠缓冲液 ...

目的要求 使学生在了解电融合原理的基础上，学会掌握各种细胞悬液的制备及电融合过程的操作方法。 实验原理 游离的动物细胞或原生质体，置于电融合室中，在高频交流电场的作用下，细胞被极化，成为偶极子，造成细胞之间相互连接，如果施加的高频交流电压（既正弦波的P-P值）过高或作用时间过长，则细胞连接成串珠状，应适当控制以上条件，尽量是两细胞处于点接触状态；然 ...

【实验目的】 掌握微丝的染色方法，了解光学显微镜和电子显微镜下微丝的基本形态结构。 【实验用品】 一、材料和标本 盖片培养的成纤维细胞三片。 二、器材和仪器 光学显微镜一台、镊子一把、小平皿六个、载片三个、吸水纸、37℃恒温箱。 三、试剂 PBS(pH7.2)、2％Triton X—100液、M—缓冲液、3％戊二醛固定液、0.2％考马斯亮兰染液、100μg／ml的细胞松驰素B、 ...

1 了解细胞显微注射的基本原理2 掌握细胞显微注射基本技术显微注射技术是利用显微操作系统和显微注射技术将外源目的基因直接注入到受精卵的原核中，使外源基因整合到受体细胞的基因组内，再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体动物的子宫内发育，从而获得转基因动物。它是目前基因转移效率较好的一种基因转移方法，可直接用不含有原核载体DNA片段的外源基因进行转移；外源基因的长度不受限制 可达100k ...

（一）融合剂细胞融合的方法有物理法，如电融合、激光融合，化学融合法和生物融合法，如仙台病毒，此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。聚乙二醇（PEG），在分子量为200～700时，呈无色、无臭的粘稠状液体，分子量大于1 000时，呈乳白色蜡状固体，能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂，对热稳定，与许多化学药品不起作用。用作细胞融合剂的聚乙二醇一般选用分子量为4 000者，常用浓度为50％，pH8. ...

【实验目的】 观察除了实验二～五以外的其它细胞器在光学显微镜和电子显微镜下的基本形态结构。 【实验内容】 一、三种细胞器的光镜切片 （一）高尔基复合体(Golgi Complex) 用镀银法染色的豚鼠脊神经节光镜切片:神经细胞因合成运输大量的蛋白质而含有发达的内质网和高尔基复合体，在低倍镜下观察，神经节的假单极细胞体被神经束分隔成群。神经细胞的胞体呈圆形或椭圆形。转换高倍镜观察，细胞中央不 ...

【实验目的】1．了解细胞电穿孔和电融合的基本原理2．学习电穿孔和电融合基本技术【实验原理】当细胞置于非常高的电场中，细胞膜就变得具有通透性，能让外界的分子扩散进细胞内，这一现象称为电穿孔。运用这一技术，许多物质，包括DNA、RNA、蛋白质、药物、抗体和荧光探针都能载入细胞。作为一种基因转导方法，电穿孔已被广泛用于各种细胞类型，包括细菌、酵母、植物和动物细胞；而且，它还能作为注射方法（称为电注射）， ...

【摘要】 目的 提高HBsAg的表达量。方法 将CHO-C 28 细胞与NS-1细胞融合，用反向血凝法检测滴度。结果 融合后第11天，出现瞬时高表达，HBsAg表达量最高为1:2048，而对照仅为1:256。结论 融合法可以明显提高HBsAg的表达量，为进一步研究提供了证据。关键词 CHO-C 28 细胞 NS-1细胞 细胞融合 HBsAg表达量The study on enhancing exp ...

一、兔肝细胞线粒体的活体染色 （一）原理 线粒体是细胞内一种重要细胞器，是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成 ...

细胞融合与单株抗体 Cell Fusion and Monoclonal Antibodies 台湾大学 农业化学系 生化研究室 庄荣辉 基础免疫学： A) 脊椎动物体内有催毁外来入侵物体的免疫系统： 免疫反应可分成先天及后天两大系统，又各有两种方式，分别以细胞或分子去扫除入侵物。 当入侵物太多时，即由先天免疫系统诱发后天免疫，开启了更有效率、更为强大的防御机制。 点这里下载 抗体.doc ...

细胞质膜是由蛋白质不同程度镶嵌在脂双层中所形成的动态流动结构，蛋白质和脂类分子又与寡糖链结合为糖蛋白和糖脂分子，糖蛋白和糖脂分子伸至细胞表面的分枝状寡糖链在质膜表面形成细胞外被（又称为糖萼）。许多研究结果表明：细胞间的分子识别、细胞的生长和分化、免疫反应和肿瘤发生等均与细胞外被（分枝状寡糖链）有关。凝集素能与细胞外被的糖分子相连接、在细胞间形成“桥”，从而达到细胞凝集的效果。 1．实验目的 1 ...

1.实验目的 学习减数分裂压片标本制备方法，观察减数分裂过程，掌握减数分裂过程的分期和特征。 2.实验原理 细胞分裂对生物的个体发育和生存，对种族绵延有着十分重要的意义，高等生物体内细胞的分裂方式有三种：无丝分裂、有丝分裂和减数分裂。本实验为减数分裂压片标本的制备与观察。 3.实验用品 3.1 示范照片；百合花粉母细胞减数分裂过程示范照片，蝗虫精母细胞减数分裂过程示范照片。 3.2 ...

【实验目的】 了解核酸、蛋白质、糖及酶的细胞化学反应原理，掌握Brachet反应及碱性蛋白、酸性蛋白、糖原和过氧化物酶的细胞化学染色方法。 【实验用品】 一、材料和标本 蟾蜍、小白鼠各一只、肝脏石腊切片、培养的Hela细胞。 二、器材和仪器 光学显微镜、解剖器材、蜡盘、载玻片、吸水纸、染色缸、盖玻片、水浴箱。 三、试剂PBS缓冲液(pH7.2)、甲基绿一呱咯宁醋酸缓冲液 ...

Mose(1956) 最早在研究精喇姑精母细胞减数分裂前期的超微结构时发现联会复合体(synaptonemal complex S.C)，1977年他又证明使用光学显微镜可以检查联会复合体。其后发展了许多适用于光学显微镜检查用的S.C染色法。依靠光学显微镜显示联会复合体的技术，不仅对于联会复合体的结构和功能的研究有用，而且在临床细胞遗传学中对染色体异常、遗传性疾病的病因和病理研究，以及环境诱变剂的 ...

实验原理：两个或两个以上的细胞合并成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合，也称细胞杂交，在自然情况下的受精过程即属这种现象。诱导细胞融合的主要方法有：病毒诱导融合，化学融合剂诱导融合和电融合。1. 病毒诱导融合：有许多种类的病毒能介导细胞融合，最常用的是灭活的仙台病毒（HVJ），为RNA病毒。病毒诱导细胞融合的过程有：首先是细胞表面吸附许多病毒粒子，接着细胞发生凝集，几分钟至几十分钟后，病毒粒子从 ...

细胞骨架(cytoskeleton)是指真核细胞胞质中错综复杂的纤维状网络结构，主要包括微管（microtubule，MT，20~25 nm）和纤丝（filament）两大类；另外，胞质中还散布着一些3~6 nm的细小纤维。按纤维的直径、组成成分以及组装结构的不同，纤丝又可分为微丝（microfilament，MF）、中间丝（intermediate filament，IF）和粗丝（thick f ...