SDS-PAGE

Q：SDS－PAGE 电泳的基本原理？A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS（十二烷基硫酸钠）， SDS 会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合 SDS 的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此 SDS 多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与 1.4 g 去污剂结合。当分子量在 15KD 到 200KD 之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K ...

miamian 请问哪位用ABI 7900做过等位基因分型？我们装的是SDS2.3软件，今天做等位基因分型，可是最后图谱那里没有图出来，结果无法判断，是不是设置错误了呢？我看的ABI 7900说明书，说明书上关于等位基因分型（AD）其中有一步是“create marker”，再“create detector”，可我设置完cmarker后，就软件上没有发现“ceate detector”，所以我没有另外设置detector，只是在PCR扩增 ...

秦奋 为什么HIV-gp41与原核PET28a质粒构建后，行诱导表达，SDS-PAGE无结果，而WB却有结果，这种情况怎么回事？（构建后测序同源性达95%，而且已酶切认证构建成功） 谢谢zhujoker “SDS-PAGE无结果，而WB却有结果”是什么意思，你表述清楚一点，要不人家会有疑惑的。其实这主要看你是否诱导成功。个人认为还有就是你在原核里面表达，作为包涵体存在形式，你是否将蛋白提出来了呢？woxingwosu 首先，我有点疑问 ...

总结了论坛现有的sds-page及相关方面的绝大部分帖子，并没有进一步筛选精华，因为，可能每个人遇到的情况不同，一个人认为是精华不一定代表对所有人都适用，因此，集合了这么多帖子，也许里面某个小小的问题就是困扰实验的症结所在，主题后面的数字代表了回帖数目，可以据此决定是否有必要浏览该帖子。希望能够对大家有用，如有任何建议，欢迎提出。据说考马斯亮兰能染出颜色就能做出Western是么？SDS－PAGE中用琼脂糖封边有 ...

先说一下Tricine胶的好处。Tricine胶比较容易将样品压平，具体原因我也没有搞清楚，但可以肯定的是这种胶跑出来的Marker又细又直，同样，显出来的条带也压的很好。与普通的SDS-PAGE胶跑出来的结果相比，Marker扩散没有那么厉害，各泳道条带间隔明显，不像普通胶的条带容易连到一起。反正跑出来的条带就是很漂亮。Tricine-SDS-PAGE胶的配方：（我一直用的就是10%这个浓度，把8KD和280KD ...

做了两个月的western blot，在跑SDS-PAGE中，几乎遇到了各位战友在站内提到的所有问题（比如胶聚合速度过慢，胶聚合不均匀，胶孔漏样，蛋白带笑脸状等等）。虽然SDS-PAGE做了这么多遍，可每次都有不同的问题出现，所以很是佩服自己“创造”问题的能力。在此把这些问题归纳一下，算是总结经验，也算是给总是失败的自己打打气，更是想把这些经验教训与各位战友分享，希望能给斗争在SDS-PAGE中的战友一些启发，也希望实验 ...

这篇配方是我原发在这儿的http://www.dxy.cn/bbs/thread/3193927怕帖子沉了，搜索了一下就开了一个新主题。另有Tricine SDS-PAGE凝胶配方（10％）的配方，有战友需要话我再发出来 。希望用了这个配方的战友如果效果好的话请跟贴说明，效果不好的话，我尽可能帮助战友们分析一下问题，反正这是我实践过的东西，不应该跑步出来的呀^_^另外Tricine SDS-PAGE16.5％是我见过最浓的Trici ...

来自 Research Laboratory for Biotechnology and Biochemistry ( RLABB)，不知道那个兄弟可以 翻译 一下：HOW DOES AN SDS PAGE GEL REALLY WORK? 06/06/2007The system most people use for separating proteins by gel electrophoresis was formulated by Laemmli (Nature 227:680-685 ). It is such a commonly used laborat ...

做了这么多的电泳一直都是闷着头做，今天突然意识到堆积胶和分离胶pH不同，不知为何。以下内容为转载。SDS－PAGE电泳的原理及浓缩胶浓缩样品的原理（甘氨酸的作用）SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）是目前最常用的分离蛋白质的电泳技术。下面就SDS-PAGE的基本原理做简单介绍。SDS－PAGE电泳的基本原理？SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS， SDS能断裂分子内和分子间氢键 ...

一、原理细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色，可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量，可筛选阳性表达的重组体。二、试剂准备1、30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr）29.0g，亚甲双丙烯酰胺（Bis）1 ...

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳一、原理细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色，可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量，可筛选阳性表达的重组体。二、试剂准备1、30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr）29.0g ...

Biotechniques 1998 Apr;24(4):676-8 Related Articles, LinksSDS agarose gels for analysis of proteins.Wu M, Kusukawa N.FMC BioProducts, Rockland, ME, USA.A new agarose-based protein electrophoresis gel system is described. The system consists of a highly resolving agarose, MetaPh ...

配制 Tris- 甘氨酸 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分 不同体积（ ml ）凝胶液中各成分所需体积（ ml ）5101520253040506% SDS-PAGE 水 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.530% 丙烯酰胺溶液 1 2 3 4 5 6 8 1010% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.510% 过硫酸氨 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.02 0.024 0.032 0.04 8% SDS-PAGE 水 2.3 4.6 6.9 9.3 11.5 13.9 18.5 23.230% 丙烯酰胺溶液 1 ...

SDS-PAGE相关帖整理（2005年4月到7月）注：已经筛选，主要是得分帖或小生以为有参考价值的帖子。SDS的作用SDS沉淀SDS去除SDS破坏二硫键？上样缓冲液配方SDS不影响制作多抗SDS胶检测蛋白纯度各工作液的保存时间分子量胶浓度和PH切胶免疫动物电泳缓冲液配方组织蛋白提取液各成分作用AP尤应冰箱保存裂解细菌双向电泳电压时间引起的问题条纹上样量不宜太少分离胶不凝的原因确定是否表达和形成包涵体磷酸 ...

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Nondenature PAGE）主要是根据蛋白质分子的电荷性质、电荷多少和分子的大小来进行蛋白质分离。虽然它的分辨率不高，但它不像变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）那样使蛋白质变性，电泳后的蛋白质保持其生物活性，可以进行进一步的蛋白质分子结构与功能的测定.1 材料1.1设备 低温台式离心机（德国Beckman公司），高速台式离心机 TGL-16C（上海安亭科学仪器厂），DYY-10型三恒电泳仪（北 ...

应用SDS-PAGE显示小分子多肽SDS-PAGE在分离、鉴定和纯化蛋白质方面有着广泛应用，其有效分离范围取决于聚丙烯酰胺的浓度和交联度，其孔径随着双丙烯酰胺与丙烯酰胺比率的增加而减小，比率接近于1：20时，孔径达到最小值。分子量低于10kD的小分子肽类，即使用较高浓度的聚丙烯酰胺凝胶的SDS-PAGE也不能完全分离，或是显不出色，或是显带较弱，带型弥散。且分子量越小，效果也越差。为了能在SDS-PAGE上显示测定 ...

摘要：在细胞的发展过程及其各种重要功能中，可逆的蛋白质磷酸化扮演了重要的角色。我们在做实验的过程中证明蛋白质体外磷酸化的实验经常碰到。在此，我以一种蛋白质激酶为例介绍蛋白质体外磷酸化的方法；同时，谈谈我做这个实验的一点点心得。希望对大家有点帮助。主要试剂：10x磷酸化buffer(200mM tris-HCl PH7.5 ,500mMKCl,100mM MgCl )PBS, 1xSDS电泳缓冲液 6xSDS加样缓冲液（参考精编分子实验指南第 ...

关于SDS-PAGE凝胶电泳SDS-PAGE凝胶电泳是在PAGE凝胶电泳中引进阴离子去污剂SDS，通过SDS打开分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构。蛋白质在一定浓度的含有SDS的溶液中，与SDS分子按比例混合，形成SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合了大量SDS，是蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子间天然的电荷差异。由于SDS与蛋 ...

1．目的学习SDS-PAGE的基本操作，学会用SDS-PAGE检测蛋白。2．原理蛋白质在加热变性以后与SDS结合，带上负电荷，在电场的作用下，向正极移动，结果按分子量大小排列在胶板上，含量多的蛋白带纹粗。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，台式冷冻离心机，制冰机，超声波破碎仪，电磁炉，电泳仪，垂直电泳槽及配套的玻璃和密封条、梳子等。4．试剂SDS（十二烷基磺酸钠），Acr（丙烯 ...

sds-page电泳主要利用聚丙烯酰胺的分子筛效应分离蛋白质和核酸，SDS-PAG蛋白质电泳分析可从蛋白质亚基分子量的大小就分离蛋白质。几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，最常用的就是SDS-PAGE电泳技术，关于大家在此过程中经常遇到的问题进行一些讨论：Q：SDS-PAGE电泳的基本原理?A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙 ...