其他PCR技术

实验原理 聚合酶链式反应-单链构象多态（Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism，PCR-SSCP）技术是在PCR技术基础上发展起来的，它是一种简单、快速、经济的用来显示在PCR反应产物中单碱基突变（点突变）的手段。该方法已被用做癌基因和抑癌基因突变的筛查检测，遗传病的致病基因分析和基因诊断，基因制图等领域 ...

随着分子生物学技术的发展，检测基因结构和突变的方法不断涌现.尤其是PCR技术问 世以后，各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展.如不对称 PCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage，RNAase)、限制性 片段长度多态性分析(Restriction Fragment Length PolymorPhism，RFLP)等等已成 为基因分析 ...

胰腺癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，多发生于胰头部。腹痛及无痛性黄疸为胰头癌的常见症状。难发现、难治疗、病情进展快、死亡率高。。。。。。这些关键词使胰腺癌登上了新“癌中之王”的宝座。因此，只有10%-15%的患者有手术切除的机会，其中能根治者仅为5%——7.5% 。

对泌尿生殖道感染患者而言，继续忍受病痛的骚扰还是忍受临床检查时采样的痛苦是一个两难的选择，他们中很多人往往因为惧怕采样的痛苦而一再拖延就诊的时间，直到忍无可忍。现在，国内已有检验产品可以尿液作为样本，检测沙眼衣原体（CT）、淋球菌（NG）或解脲脲原体（UU）。尿液是名副其实的无创式取样方式，相比传统的女性宫颈拭子、男性尿道拭子可完全避免取样过程对患者的痛苦和损伤。那么，尿液作为生殖道CT/NG/ ...

PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用，其灵敏度高、特异性好，是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂，对仪器和人员要求比较高，不适合基层或现场快速诊断，因此在国内的推广速度并不是很快。 2000年日本学者Notomi在Nucleic Acids Res杂志上公开了一种新的基因诊断技术，即LAMP (Loop-mediated isot ...

免疫PCR(IM-PCR) 免疫PCR是将抗原抗体反应的特异性与体外扩增DNA的技术相结合用于检测生物样品中含量极少的蛋白质，如细胞因子，微量抗原等的方法。首先由Sahot等用重组的链霉亲合素和A蛋白的嵌合体，将免疫法和PCR结合在一起而形成。其基本原理和酶联免疫固相检测法(ELISA)一样只是标记物质为一段特定的DNA，并且通过PCR扩增进行检测。为此它要比ELISA敏感10万倍敏感 ...

直接原位PCR（In situ PCR） 原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。1． 组织切片和细胞样品的制备【试剂与配置】10%福尔马林二甲苯PBS【操作方法】（1）用10%福尔马林固定组织8 ...

PCR产物克隆方法:平端连接、粘端连接、T4DNA聚合回切产生粘端、T－vector法、共环消解法、无连接酶亚克隆法(A)。

实时定量PCR是检测基因表达最灵敏，最可靠的方法。通过在试验过程中，实时监测荧光染料的信号变化，反映样品中的基因拷贝数。实时定量PCR线性范围广（能达到5个数量级），因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是，由于实时定量PCR需要制备标准曲线和同时分析内参基因，因此，每次实验只能检测少数几个基因的表达水平，若要检测大量基因，则工作量巨大，耗时长久。

LAMP,即：核酸环介导等温扩增技术。本文简要介绍了LAMP的原理及引物设计与实例。

cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends，RACE）是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。

免疫PCR（immuno polymerase chain reaction,IM-PCR）是1992年Sano建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。其本质是一种以PCR扩增一段DNA报告分子代替酶反应来放大抗原抗体结合率的一种改良型ELISA。

免疫PCR（immuno polymerase chain reaction,IM-PCR）是1992年Sano建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。其本质是一种以PCR扩增一段DNA报告分子代替酶反应来放大抗原抗体结合率的一种改良型ELISA。

免疫PCR（immuno polymerase chain reaction,IM-PCR）是1992年Sano建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。其本质是一种以PCR扩增一段DNA报告分子代替酶反应来放大抗原抗体结合率的一种改良型ELISA。

免疫PCR（immuno polymerase chain reaction,IM-PCR）是1992年Sano建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。其本质是一种以PCR扩增一段DNA报告分子代替酶反应来放大抗原抗体结合率的一种改良型ELISA。

免疫PCR（immuno polymerase chain reaction,IM-PCR）是1992年Sano建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。其本质是一种以PCR扩增一段DNA报告分子代替酶反应来放大抗原抗体结合率的一种改良型ELISA。

inverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多，而Inverse-PCR一般只要有特异条带，基本上就是目的片段。

原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术,就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。

无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官，或者是从正常的组织突变为肿瘤组织，都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因，因而也就成为一项热门的技术。 寻找差异表达的基因有不少方法，抑制消减杂交（SSH）是比较有效的一种方法。以Clontech的PCR-Select cDNA Subtraction Kit为例：将样品（tester） ...

随着分子生物学技术的发展，检测基因结构和突变的方法不断涌现。尤其是pCR技术问世以后，各种与pCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展。如不对称pCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage，RNAase)、限制性 片段长度多态性分析(Restriction Fragment Length polymorphism，RFLp)等等已成为基因分析的有力工 ...